李占芳 魏春芬

山東省東營市食品藥品檢驗中心，山東東營 257091

酸棗仁為鼠李科植物酸棗Ziziphus jujuba Mill.var. spinosa（Bunge） Hu ex H. F. Chou 的干燥成熟種子[1]，主要用于治療虛煩不眠、驚悸多夢、體虛多汗、津傷口渴等癥，是中醫(yī)臨床首選的安神藥[2]。現(xiàn)代研究表明酸棗仁具有鎮(zhèn)靜催眠、鎮(zhèn)痛抗驚厥、降血脂及抗血小板聚集、抗缺氧及抗心律失常、抗衰老、抗輻射等作用[3]。由于主流商品酸棗仁野生資源減少，市場資源供不應求，因此控制市場酸棗仁的質(zhì)量情況，查出不合格藥材，才能保證其臨床療效的發(fā)揮。本文通過對山東各地市場酸棗仁藥材質(zhì)量的分析，掌握本省酸棗仁市場質(zhì)量狀況，為保證酸棗仁臨床療效和藥品監(jiān)督提供依據(jù)。

老鱖魚，這就是我們找你談的話題。有人說，四細狗請你吃了燉雞喝了地瓜燒，你不但沒殺他，還成了他的腿子哩。是這樣嗎？我們想知道你去殺他，當年的那些細節(jié)。

1 材料

1.1 儀器

島津LC-20AT高效液相色譜儀（二極管陣列檢測器）（日本島津制作所；出廠編號：L20154970517US）；梅特勒XS205DU電子分析天平（瑞士梅特勒；出廠編號：1128491122）；臺式超聲波清洗機BRANSon 580（美國brabson；出廠編號：BIX101300860）；離心機LDZ5-2（北京雷勃爾儀器有限公司；出廠編號：L010606071）；硅膠G薄層板（德國默克薄層層析板）。

1.2 樣品與試劑

山東各地市搜集的覆蓋本品種的生產(chǎn)、經(jīng)營和使用單位酸棗仁樣品36批，編號1～36號。對照品酸棗仁皂苷A（110734-200611）、斯皮諾素（111869-201102）、胭 脂 紅（111771-201302）、赤蘚紅（111772-201202）和酸性紅73（111773-200701），均購自中檢院。乙腈、甲醇為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。見表1。

表1 樣品來源

2 方法與結(jié)果

2.1 藥材性狀分析

通過外觀性狀觀察，發(fā)現(xiàn)36批樣品中有9批樣品性狀不合格。多為染色的理棗仁和摻偽染色的理棗仁，酸棗仁和理棗仁來源、功效和主治有明顯的不同。其中酸棗仁為鼠李科植物酸棗Ziziphus jujuba Mill.var. pinosa（Bunge） Hu ex H. F. Chou 的干燥成熟種子，功效為養(yǎng)心補肝，寧心安神，斂汗，生津。主要用于治療虛煩不眠、驚悸多夢、體虛多汗、津傷口渴等癥。而理棗仁來源于鼠李科植物滇刺棗Ziziphus mauritiana Lam.的干燥成熟種子，具有清熱止痛，收斂止瀉的功效，用于燒燙傷，咽喉痛，腹瀉，痢疾[4]。因理棗仁顏色較正品酸棗仁色淺，故偽品多為經(jīng)過炮制或染色后顏色加深的理棗仁。正品和偽品比較見表2。

進行分道焊接時應根據(jù)實際的焊縫寬度選擇相應的焊道道數(shù)，以分兩道為例，第一道應覆蓋原始焊縫的2/3位置，第二道應覆蓋第一道焊縫的1/2位置，以保證焊縫整體成形平整。如需要分3道或3道以上焊接時，應先焊坡口兩側(cè)后焊中間。

表2 酸棗仁正品和偽品比較

2.2 樣品有效成分分析

打造谷子“種養(yǎng)加”產(chǎn)業(yè)鏈。2018年5月，保加利亞公司與華大小米產(chǎn)業(yè)股份有限公司簽署了合作協(xié)議，由華大小米提供種子資源、技術(shù)支持并派駐專家在保加利亞基地進行全程管理和指導，使試種與科研齊頭并進，對幾十個品種的谷子進行氣候、土壤等自然環(huán)境的比對，擇優(yōu)在保加利亞進行推廣。目前已經(jīng)開始試種的1800畝谷子長勢良好。

表3 酸棗仁含量測定酸棗仁皂苷A、斯皮諾素

3 樣品染色分析

3.2.2 供試品溶液的制備 取3.1.1項下的供試品溶液，作為供試品溶液。

3.1 薄層定性分析

3.1.1 供試品溶液的制備 取1、3、22、34號酸棗仁樣品各2 g（不粉碎），加70%乙醇5 ml，超聲提取20 min，離心（3000 r/min），取上清液作為供試品溶液。

應力腐蝕開裂的影響因素分別是：應力、環(huán)境、材料。油罐罐底在服役過程中所受應力情況十分復雜；由于長期處于罐底水的環(huán)境中，受罐底水中的酸度、礦化度和鹽度的影響，其應力腐蝕敏感性很大，尤其是柳屯原油庫的罐底水中Cl-的含量很高，很容易引起罐底的局部腐蝕，而局部腐蝕往往又是引起應力腐蝕的最基本前提，會增大罐底鋼材的應力腐蝕開裂敏感性。因此，油罐在介質(zhì)和應力的雙重作用下必然會具有應力腐蝕傾向。在油罐的生產(chǎn)運行中，為延緩油罐罐底的腐蝕，經(jīng)常對罐底實施陰極保護，而陰極極化電位大小也會影響應力腐蝕開裂的敏感性。

3.2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以甲醇為流動相A，以0.05 mol/L醋酸銨為流動相B，按下表進行梯度洗脫；檢測波長為508 nm。理論板數(shù)按酸性紅73峰計算，應不低于2000。見表4。

3.1.4 結(jié)果 薄層色譜中，在與對照品酸性紅73相對應的位置上出現(xiàn)了相同的顏色的斑點。薄層圖譜見圖1。

圖1 4批染色樣品薄層圖譜

3.2.4 測定法 將供試品溶液和對照品溶液各10 μl，注入液相色譜儀。

按照《中華人民共和國藥典》2020年版一部[1]酸棗仁項下的檢測方法，測定了36批酸棗仁的酸棗仁皂苷A和斯皮諾素的含量。從液相測定結(jié)果看有9批偽品酸棗仁皂苷A未出峰或峰值很小，結(jié)果不合格，有4批正品酸棗仁斯皮諾素含量不合格。結(jié)合樣品性狀，該9批不合格品性均為炮制理棗仁或染色理棗仁。理棗仁和酸棗仁雖然都有酸棗仁皂苷A和酸棗仁皂苷B兩種成分，但理棗仁這兩種成分含量極低，大部分樣品檢測不出。對4批斯皮諾素不合格的酸棗仁進行認真分析，該4批正品中普遍存在著種仁癟，摻雜非藥用部位棗殼多，這與酸棗仁的黃酮類成分斯皮諾素均在種仁胚乳內(nèi)，種仁癟者胚乳有的為空，再加上其非藥用部位棗殼多，故斯皮諾素含量不合格，為酸棗仁劣質(zhì)品?？赡芘c采收早，種仁不飽滿，導致種仁中的黃酮類成分斯皮諾素減少。出現(xiàn)低于標準的情況。見表3。

3.2 樣品染色液相分析

取1、34號樣品，參照五味子補充檢驗方法[7]，照高效液相色譜法測定，進一步確定兩個樣品染色物為酸性紅73。

3.1.3 方法 照薄層色譜法《中華人民共和國藥典》2020年版四部0502）試驗，吸取供試品溶液和對照品溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水（1∶3∶3∶1∶1）為展開劑，展開，取出，晾干。在可見光下檢視。

表4 梯度洗脫程序

《中華人民共和國藥典》2010年版一部增補本酸棗仁標準項下對酸棗仁粉末顏色描述為棕紅色[5]。本研究在實驗過程中,發(fā)現(xiàn)質(zhì)量好的酸棗仁粉末多為黃白色，有的為棕紅色，隨著炮制品程度加深粉末顏色變深棕褐色。查閱文獻有的描述酸棗仁粉末顏色為黃白色或棕紅色[6]。有的描述為棕紅色、棕褐色、紫褐色[7]。故酸棗仁多為淺黃白色或棕紅色或棕褐色。實驗中觀察到樣品1、3、22、34號酸棗仁粉末多呈明顯的粉紅色。 參照五味子染色補充檢驗方法[8]，對4個樣品進行了薄層層析和高效液相定性分析。因五味子染色補充檢驗方法為通用的檢查染色方法，故無須陰性對照。具體實驗如下。

3.2.3 對照品溶液的制備 取3.1.2項下的酸性紅73對照品溶液，作為對照品溶液。

從圖1可以看出酸棗仁的染色情況，1號和34號樣品為酸性紅73染色，其余兩個未知。

3.1.2 對照品溶液的制備 另取對照品胭脂紅、赤蘚紅和酸性紅73適量，分別加70%乙醇溶解并制成每毫升含0.1 mg的溶液作為對照品溶液。

3.2.5 測定結(jié)果 供試品色譜中出現(xiàn)與對照品相同的色譜峰，采用二級陣列檢測器比較相應色譜峰的紫外-可見吸收光譜，吸收光譜也相同。見圖2～7。

圖2 酸性紅73對照品液相

圖3 酸性紅73紫外光譜圖

圖4 1號樣品

圖5 1號樣品

圖6 34號樣品

圖7 34號樣品

從圖2～7可以看出，1號和34號樣品確系酸性紅73染色。

4 討論

通過對36批樣品分析，經(jīng)鑒定，9批為理棗仁，不合格率高達25%，反映發(fā)現(xiàn)山東地區(qū)酸棗仁偽品只有理棗仁一種，但冒充現(xiàn)象嚴重，酸棗仁與理棗仁屬于同科不同屬，二者在大小、形態(tài)、結(jié)構(gòu)上的高度相似，直觀顏色略有差異，不法商家主要通過對理棗仁樣品染色方法，使偽品從顏色上更接近正品，給辨別真?zhèn)嗡釛椚试黾恿穗y度。

通過研究和參考多篇與酸棗仁質(zhì)量控制和研究相關(guān)的文獻報道[9-11]，文章極少有關(guān)于酸棗仁染色的報道。本文參考五味子染色補充檢驗方法，嘗試對酸棗仁染色物進行了分析，染色鑒別試驗發(fā)現(xiàn)山東地區(qū)酸棗仁存在兩種染色物染色，但本研究僅篩選出酸性紅73一種染色物，目前，本研究對于另外一種染色物具體為哪一種目前尚不能確定，今后繼續(xù)加強這方面的研究。

山東地區(qū)36批酸棗仁中有效成分的含量測定發(fā)現(xiàn)，正品共27批，有4批次酸棗仁中斯皮諾素含量不合格，不合格率達14.8%，而9批理棗仁中雖然都有酸棗仁皂苷A和酸棗仁皂苷B兩種成分，但這兩種成分含量極低，大部分樣品檢測不出或峰值很小，不合格率100%；筆者又將有效成分含量含量與性狀相關(guān)聯(lián)發(fā)現(xiàn)，4批正品中普遍存在著種仁癟，摻雜非藥用部位棗殼多，酸棗仁的黃酮類成分斯皮諾素均在種仁胚乳內(nèi)，故斯皮諾素含量不合格，為酸棗仁劣質(zhì)品[12-13]?？赡芘c采收早，種仁不飽滿，導致種仁中的黃酮類成分斯皮諾素減少[14-15]；本研究鑒定為理棗仁的樣品，其含量測定均不合格。

結(jié)合嬰幼兒配方乳粉進口貿(mào)易的具體情況，參考前人的研究成果，本文認為可能影響嬰幼兒配方乳粉進口的因素主要有國內(nèi)市場規(guī)模、國內(nèi)產(chǎn)量、進口平均價格、匯率水平以及國產(chǎn)產(chǎn)品和進口產(chǎn)品的質(zhì)量安全水平等因素。

體育本身又是最具兼容性的生活方式，是人類緊張關(guān)系的調(diào)和劑。體育是一個沒有年齡、沒有性別、沒有國界之分的全民活動，在人人平等的社會環(huán)境下，人在他人的肯定中，得到了作為一個主體的尊重。在體育的競技場中，不論勝負與強弱，每個人都以主體面貌在展現(xiàn)本真的自我。體育對身體行為的嚴格要求，賦予人類頑強拼搏的精神；體育對個性發(fā)展的不拘一格，賦予人類爽朗的性格與開闊的胸襟；體育對參與人員的海納百川，賦予人類追求自由的權(quán)利。

關(guān)于酸棗仁粉末顏色，通過多批樣品觀察和有關(guān)文獻報道，酸棗仁經(jīng)炒制顏色會加深，但其顏色的深淺程度又與炒制的火候、經(jīng)驗有著直接關(guān)系，標準中粉末的顏色描述“棕紅色”過于局限，故筆者在大量實踐積累中建議將酸棗仁修改為“黃白色或棕紅色”更確切。酸棗仁用量隨著其藥理作用的顯著在逐年遞增，無論從其價格還是使用量上酸棗仁無疑會成為用途廣大的一味中藥。通過以上分析，酸棗仁質(zhì)量存在著一定問題。

本文對山東各地市搜集的覆蓋本品種的生產(chǎn)、經(jīng)營和使用單位酸棗仁樣品36批，進行了性狀分析，酸棗仁皂苷A和斯皮諾素含量測定并進行了染色液相分析，通過一系列的分析，發(fā)現(xiàn)了酸棗仁偽品并存在染色現(xiàn)象。本研究提示酸棗仁制劑質(zhì)量管理者，從來源上把關(guān)尤為關(guān)鍵，更不能放松其他可能的不法手段，只有好的質(zhì)量才有好的療效。希望本研究能夠為藥品監(jiān)督管理和控制酸棗仁藥材質(zhì)量提供參考依據(jù)。