羅婕妤 (湛江市第二人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 湛江 524003)

人乳頭瘤病毒(Human Papilloma Virus,HPV)是一種球形DNA病毒，隸屬于乳多空病毒科-乳頭瘤空泡病毒A屬，可穿透人體表皮及黏膜上皮細胞，引發(fā)各類良惡性病變，以尋常疣、生殖器疣、鼻咽癌、子宮頸癌前病變及宮頸癌等多見[1]。此外，妊娠期HPV感染也較為多見，可使孕婦本身、胎兒及新生兒產(chǎn)生不良結(jié)局，引起學者們關注[2]。宮頸分泌物基因芯片HPV DNA分型檢測是目前孕婦HPV篩查的主要方式，是一種侵入性檢查方式，部分孕婦對此持懷疑態(tài)度，不愿意進行該項檢查，造成漏診，威脅母嬰健康[3]。因此，尋找一種安全、有效的檢測方法及指標顯得十分重要。微小RNA(microRNA,miRNA)是一種長約22 nt的非編碼RNA，廣泛分布于從病毒到人類的各種生物中，主要通過與信使RNA(mRNA)結(jié)合發(fā)揮作用從而參與疾病的發(fā)生發(fā)展，可在人血清中豐富、穩(wěn)定表達，大部分研究提示血清miRNA檢測是目前臨床(包括良惡性疾病及孕期檢測等)新起的一種無創(chuàng)檢查方式，前景可觀[4]。有研究顯示miRNA-34a在HPV持續(xù)感染型宮頸癌中異常表達，提示miRNA-34a可能與HPV感染相關[5]。但關于其與HPV感染孕婦的報道較為少見。本研究對HPV陰性和HPV陽性不同妊娠期孕婦血清miRNA-34a表達進行探討?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取2016年3月～2018年3月于本院產(chǎn)檢進行HPV篩查的320例孕婦作為研究對象，根據(jù)HPV檢測結(jié)果不同將其分為HPV陽性組(n=120)和HPV陰性組(n=200)。納入標準：①B超顯示活胎，單個妊娠；②均行宮頸分泌物基因芯片HPV DNA分型檢測者；③臨床資料完整且依從性良好者。排除標準：①患妊娠期合并癥或并發(fā)癥者；②合并宮頸上皮內(nèi)瘤變疾病或?qū)m頸癌者；③有不良妊娠結(jié)局或新生兒結(jié)局者；④人工受孕者；⑤有精神病病史或家族史者。HPV陽性組：平均年齡(31.34±5.62)歲；產(chǎn)婦類型：初產(chǎn)婦74例，經(jīng)產(chǎn)婦46例；妊娠期：早期49例，中期52期，晚期19例；HPV陰性組：平均年齡(30.94±5.49)歲；產(chǎn)婦類型：初產(chǎn)婦120例，經(jīng)產(chǎn)婦80例；妊娠期：早期78例，中期84期，晚期38例；兩組在年齡、產(chǎn)婦類型及妊娠期等臨床資料上比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。同時選取年齡匹配的50例健康非孕女性作為健康對照組。所有研究對象均簽署知情同意書，本次研究經(jīng)過本院醫(yī)學倫理委員會批準同意。

廣義的教育大數(shù)據(jù)是指來源于日常教育活動中學生們的行為以及學習數(shù)據(jù)。而狹義的教育大數(shù)據(jù)指的是學生在線學習平臺、管理系統(tǒng)以及課程管理平臺等。

1.2方法

1.2.1HPV檢測[6]：①標本收集：囑孕婦平躺取截石位，以窺陰器暴露宮頸，用無菌棉簽擦去宮頸口分泌物，用HPV專用刷在宮頸管內(nèi)順時輕柔旋轉(zhuǎn)5圈并停留1min進行取樣，后將置入專用管中保存及運送；②基因芯片HPV DNA分型檢測：本研究用廣東凱普生物科技股份有限公司HPV分型檢測試劑盒對分泌物進行DNA提取、擴增及導流雜交，最后獲得檢測結(jié)果，共有21種基因型，清晰可見的藍紫色圖點被認為陽性，根據(jù)條膜HPV分布圖判斷HPV感染基因型。

總之，新時代黨的建設理論的新發(fā)展，展示了以習近平為核心的黨中央高超的政治智慧和巨大的政治勇氣，昭示了中國共產(chǎn)黨在黨的建設理論上的新境界、新方向，極大地豐富和發(fā)展了馬克思主義政黨建設理論和中國共產(chǎn)黨的建設理論，成為指導今后中國共產(chǎn)黨全面推進政治建設、思想建設、組織建設、作風建設、紀律建設和制度建設的新綱領、新指南，也將有助于世界各國政黨加強自身建設和處理執(zhí)政過程中的各種問題。

1）在BIM平臺中建立的信息化模型能夠?qū)鹘y(tǒng)民居的每一個構(gòu)件進行分類匯總，無論是它們的數(shù)據(jù)還是材質(zhì)都可明確直觀的通過明細表的形式表達，減少了數(shù)據(jù)分析的工作時間，可以隨時對傳統(tǒng)民居進行環(huán)境模擬，直觀地對建筑室內(nèi)外環(huán)境進行合理的分析并調(diào)整相關方案。既提高了相關工作的準確性，也減少了統(tǒng)計分析的工作量，提高了整體的工作效率。

1.2.2血清miRNA-34a檢測[7]：①標本收集：采集5 ml空腹靜脈血于黃色血清管中，輕柔混勻，4 000 r/min離心5 min，留取血清于EP管，并于-80℃冰箱中保存待檢測；②血清miRNA-34a檢測：本研究分別用北京天根生化科技公司總RNA提取試劑盒和美國Thermo Fisher Scientific公司逆轉(zhuǎn)錄試劑盒+實時熒光定量聚合酶鏈式反應(Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)試劑盒對血清標本進行RNA提取、cDNA合成及FQ-PCR檢測，以2-ΔΔCt法表示miRNA-34a相對表達水平。

2 結(jié)果

2.5HPV陽性組新生兒不良結(jié)局與血清miRNA-34a的關系:HPV陽性組新生兒均出生，其中早產(chǎn)者和呼吸窘迫綜合征者分別為6例和8例，其血清miRNA-34a分別為4.92±0.83和5.13±0.98；非早產(chǎn)者和非呼吸窘迫綜合征者分別為114例和112例，其血清miRNA-34a分別為4.02±0.27和3.75±0.62；早產(chǎn)者和呼吸窘迫綜合征者血清miRNA-34a分別高于非早產(chǎn)者和非呼吸窘迫綜合征者，且差異有統(tǒng)計學意義(t=6.829、P=0.000；t=5.829、P=0.000)。

那陣子，在我按市專家的處方每天上、下午到小區(qū)的西醫(yī)診所各點一組頭孢后，我的癥狀明顯減輕了。其中最顯著的例子就是晚上能睡個安穩(wěn)覺了。雖說睡夢中還是難免不時地咳上幾聲，但絕不會咳醒。這還是老婆告訴我的。正因如此，市專家囑我半月后回市醫(yī)院復診，我都沒去，而是聽從了小區(qū)西醫(yī)診所中那位小護士的建議，停止滴流后繼續(xù)口服頭孢及化痰藥。

圖1 不同組別血清miRNA-34a比較

2.4影響HPV感染孕婦妊娠不良結(jié)局的多因素Logistic回歸分析：經(jīng)多因素Logistic回歸分析得知，HPV高危型、HPV高危型種數(shù)及血清miRNA-34a是導致HPV感染孕婦妊娠不良結(jié)局發(fā)生的關鍵因素(P=0.014；P=0.001；P=0.000)。見表1。

圖2 HPV陽性組不同妊娠期孕婦血清miRNA-34a比較

2.3HPV陽性組孕婦妊娠結(jié)局與血清miRNA-34a的關系：HPV陽性組中剖宮產(chǎn)者30例、產(chǎn)后出血者9例、胎膜早破者8例和產(chǎn)褥感染者4例，其血清miRNA-34a分別為5.37±0.91、5.17±0.69、5.07±1.31和5.35±0.67；順產(chǎn)者90例、產(chǎn)后未出血者111例、無胎膜早破者112例和無產(chǎn)褥感染者116例，其血清miRNA-34a分別為3.85±0.57、4.02±0.72、4.12±0.34和3.88±0.55；剖宮產(chǎn)者、產(chǎn)后出血者、胎膜早破者和產(chǎn)褥感染者血清miRNA-34a分別高于順產(chǎn)者、產(chǎn)后未出血者、無胎膜早破者和無產(chǎn)褥感染者，且差異有統(tǒng)計學意義(t=9.349、P=0.000；t=4.621、P=0.000；t=5.657、P=0.000；t=5.224、P=0.000)。

1.3隨訪：對320例孕婦進行隨訪直至其分娩后1個月，記錄孕婦分娩方式、產(chǎn)后并發(fā)癥及新生兒不良結(jié)局發(fā)生情況。所有孕婦均在訪，無失訪。

2.2HPV陽性組不同妊娠期孕婦血清miRNA-34a比較：HPV陽性組中早期妊娠、中期妊娠和晚期妊娠孕婦血清miRNA-34a分別為4.61±0.75、4.59±0.72和4.73±0.65，三者比較差異無統(tǒng)計學意義(F=0.246,P=0.782)。見圖2。

表1 影響HPV感染孕婦妊娠不良結(jié)局的多因素Logistic回歸分析

2.1不同組別血清miRNA-34a比較：HPV陽性組、HPV陰性組和健康對照組血清miRNA-34a分別為4.58±0.74、1.09±0.44和0.98±0.26，三組比較差異有統(tǒng)計學意義(F=1744.049,P=0.000)。見圖1。

2.6影響HPV感染孕婦新生兒結(jié)局的多因素Logistic回歸分析：經(jīng)多因素Logistic回歸分析得知，HPV高危型種數(shù)和血清miRNA-34a是導致HPV感染新生兒不良結(jié)局發(fā)生的關鍵因素(P=0.000；P=0.027)。見表2。

表2 影響HPV感染孕婦新生兒結(jié)局的多因素Logistic回歸分析

3 討論

與其他女性相比，妊娠期女性更容易被HPV感染，這是因為孕婦雌孕激素明顯升高，其他內(nèi)分泌激素也隨之改變，機體免疫力有所下降，皮膚及黏膜固有免疫和細胞免疫均被破壞，HPV侵襲入機體[8]。此外，有研究發(fā)現(xiàn)機體雌孕激素、人絨毛膜促性腺激素、催乳素及腎上腺素等免疫抑制激素上升，HPV感染妊娠期女性后宮頸相關病變進程加快，因此明確是否存在妊娠期HPV感染對孕婦產(chǎn)后預后十分重要[9]。宮頸分泌物基因芯片HPV DNA分型檢測是目前診斷HPV感染的主要方法，受標本本身、運送及保存等多種因素影響敏感性和特異性并非十分理想，因此尋找有效血液學指標進行聯(lián)合檢測迫在眉睫[10]。與mRNA比較，miRNA更為穩(wěn)定，既可耐受長期保存和反復凍融等物理因素，又可耐受核糖核酸酶等生物因素，為其成為臨床疾病檢測的重要指標提供理論依據(jù)[11]。miRNA-34家族在哺乳動物中廣泛存在，包括miRNA-34a、miRNA-34b和miRNA-34c三個成員，均有高度保守性[12]。目前關于miRNA-34a研究較多且多與腫瘤相關，有學者發(fā)現(xiàn)miRNA-34a在診斷乳腺癌中敏感性和特異性均較高，且從細胞水平肯定了其在乳腺癌中的治療前景[13]。陳貝貝等則在通過對60例HPV感染者宮頸脫落細胞研究發(fā)現(xiàn)miRNA-34a與HPV持續(xù)感染密切相關[5]，肯定了其作為HPV持續(xù)感染在宮頸癌早期篩查和臨床診療的探討價值。

貴州省平塘縣水稻田75%以上常年發(fā)生水稻稻縱卷葉螟和稻飛虱，發(fā)生程度在3級以上，危害重的年份稻縱卷葉螟、稻飛虱和福壽螺發(fā)生程度達5級。如2008年稻飛虱、稻縱卷葉螟均為5級發(fā)生，福壽螺為3級發(fā)生；2009年水稻白背飛虱為5級發(fā)生、稻縱卷葉螟第3代為5級發(fā)生，第4代為3級發(fā)生，福壽螺為5級發(fā)生；2010年水稻白背飛虱為4級發(fā)生、稻縱卷葉螟第3代為4級發(fā)生，第4代為3級發(fā)生，福壽螺為4級發(fā)生；2011年稻飛虱為4級發(fā)生、稻縱卷葉螟為3級發(fā)生。害蟲的嚴重發(fā)生導致全縣水稻年損失量在300萬公斤以上，大發(fā)生年份全縣水稻減產(chǎn)達20%～30%。

本研究中，選取120例HPV感染孕婦和200例無HPV感染孕婦作為研究對象，探討 miRNA-34a在孕婦HPV感染中的診斷價值，發(fā)現(xiàn)HPV陽性組血清miRNA-34a明顯高于HPV陰性組，提示血清miRNA-34a在孕婦HPV感染鑒別診斷中的臨床價值，此外，本研究還選取50例健康非孕女性作為對照以排除女性因受孕導致血清miRNA-34a干擾。本研究還發(fā)現(xiàn)HPV陽性組中早期妊娠、中期妊娠和晚期妊娠三者孕婦血清miRNA-34a比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，提示血清miRNA-34a與HPV感染孕婦妊娠期無明顯相關，可能與樣本量及分布情況相關，可后續(xù)擴大樣本量、優(yōu)化分布情況繼續(xù)探討。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)HPV感染孕婦發(fā)生妊娠不良結(jié)局者和新生兒不良結(jié)局者血清miRNA-34a均明顯高于無上述情況發(fā)生者，提示血清miRNA-34a在HPV感染孕婦妊娠結(jié)局和新生兒結(jié)局預測中的臨床價值。最后，本研究經(jīng)多因素Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)HPV高危型種數(shù)和血清miRNA-34a是導致HPV感染孕婦母嬰不良結(jié)局的關鍵因素，再次肯定血清miRNA-34a在HPV感染孕婦診斷及預后估測中的價值，并提示臨床工作者應明確HPV感染孕婦HPV分型情況，對HPV高危型者多予關注，警惕不良結(jié)局發(fā)生或在不良結(jié)局發(fā)生時及時處理，減少傷害。

綜上所述，血清miRNA-34a在HPV感染孕婦中明顯升高，與妊娠期無明顯關系，是導致妊娠不良結(jié)局和新生兒不良結(jié)局發(fā)生的關鍵因素，有一定臨床指導價值。