劉懷彬，閔婕，潘耀，郝琳

（徐州醫(yī)科大學(xué)附屬徐州兒童醫(yī)院，江蘇 徐州 221000）

0 引言

支氣管哮喘目前是常見發(fā)生在兒童群體中的慢性呼吸道疾病，且臨床發(fā)生率有不斷趨于增加的態(tài)勢。支氣管哮喘的發(fā)病由T淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞等多因素參與，氣道慢性炎癥是主要病變表現(xiàn)，喘息、咳嗽、氣促以及胸悶等癥狀常伴且反復(fù)發(fā)生。據(jù)目前臨床研究，在哮喘疾病的發(fā)生中，T淋巴細(xì)胞活化后的效應(yīng)T細(xì)胞有重要參與，更是啟動、造成氣道廣泛炎癥反應(yīng)的直接原因。可見，T細(xì)胞亞群功能異常與支氣管哮喘疾病發(fā)生有密切關(guān)聯(lián)。輔助性T細(xì)胞有兩個主要亞型：Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞，Th1/Th2細(xì)胞失衡參與支氣管哮喘病程始終[1]。白細(xì)胞介素-12、干擾素γ是Th1細(xì)胞分泌的主要細(xì)胞因子，白細(xì)胞介素-6則是Th2細(xì)胞分泌的主要細(xì)胞因子。本文主要就對支氣管哮喘患兒白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-12、干擾素γ水平與其病情的相關(guān)性展開分析和討論，以期為有關(guān)臨床診治提供參考借鑒。

1 資料與方法

1.1 一般資料。回顧性分析在2018年7月至2020年7月，在徐州醫(yī)科大學(xué)附屬徐州兒童醫(yī)院呼吸科就診的支氣管哮喘患兒臨床資料，篩選以下符合條件：①與《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南》（2008版）中有關(guān)支氣管哮喘診斷內(nèi)容相符合[2]；②均行肺功能檢查；③近兩個月并無激素、抗生素使用史；④患兒家屬知情、同意。排除有以下情況者：①同時患有貧血、佝僂病等影響實(shí)驗(yàn)指標(biāo)觀察的情況；②先天呼吸道急性、肺發(fā)育不良等呼吸系統(tǒng)疾病患兒；③肺部影像提示間質(zhì)性肺疾病或重癥肺炎。納入患兒79例，根據(jù)病情劃歸入組：A組患兒20例，男12例、女8例，年齡2～12歲、平均（7.1±0.7）歲；B組患兒30例，男17例、女13例，年齡3～12歲、平均（7.4±0.8）歲；C組患兒29例，男17例、女12例，年齡3～13歲、平均（7.9±0.9）歲。另以同期我院常規(guī)體檢的健康兒童30例作為對照組，男18例、女12例，年齡2～14歲、平均（8.1±0.9）歲。組間基本資料符合可比性前提（P＞0.05）。

1.2 方法。采集79例患兒及30例健康兒童清晨空腹靜脈血0.5 mL，放入乙二胺四乙酸二鉀真空抗凝管，使用多重微球流式免疫熒光發(fā)光法檢測細(xì)胞因子（含白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-12以及干擾素γ）：向校準(zhǔn)品管中分別加入25 uL基質(zhì)B及25 uL校準(zhǔn)品，向樣本管中加入25 uL試驗(yàn)緩沖液及25 uL樣品，向所有管中加入25 uL捕獲微球抗體（按2.1充分混合均勻），室溫（25±1℃）避光震蕩孵育2小時（400～500 r/min），向所有管中加入25 uL SA-PE，室溫（25±1℃）避光震蕩孵育0.5小時（400-500 r/min），向所有管中加入500 uL 1×洗滌緩沖液，渦旋數(shù)s，300～500 g 離心5 min，緩慢傾倒出液體，倒扣于吸水紙上，根據(jù)流式細(xì)胞儀上樣需求，向每管中加入150-300 uL洗滌緩沖液，渦旋10s將微球重懸，立即上機(jī)檢測，記錄檢測結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析。血清白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-12以及干擾素γ水平檢測數(shù)據(jù)均表達(dá)為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的計量數(shù)據(jù)形式，采用t方法檢驗(yàn)；以檢驗(yàn)結(jié)果P＜0.05作為差異值顯著、有意義的判定依據(jù)。于SPSS 25.0軟件中完成數(shù)據(jù)驗(yàn)算。

2 結(jié)果

與對照組健康體檢兒童比較，A、B、C組支氣管哮喘患兒血清干擾素、白細(xì)胞介素-12明顯更低，白細(xì)胞介素-6明顯更高（P＜0.05）。

A、B、C組支氣管哮喘患兒各細(xì)胞因子比較：干擾素γ、白細(xì)胞介素-12水平從低到高排序?yàn)椋篊組病情中重度＜B組病情輕度＜A組病情間歇；白細(xì)胞介素-6水平從低到高排序?yàn)椋篈組病情間歇＜B組病情輕度＜C組病情中重度；差異比有顯著意義（P＜0.05），見表1。

表1 各組血清干擾素γ、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-12比較（±s，pg/mL）

表1 各組血清干擾素γ、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-12比較（±s，pg/mL）

注：與A、B、C組比較，★P＜0.05；與A、B組比較，★★P＜0.05；與A組比較，#P＜0.05。

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3 討論

在兒科常見病中，支氣管哮喘的發(fā)生率愈漸提高，作為慢性、呼吸系統(tǒng)疾病，該病的發(fā)生病理機(jī)制復(fù)雜，可能與支氣管炎性細(xì)胞浸潤、黏膜纖毛功能障礙、支氣管平滑肌痙攣、氣道黏膜水腫等相關(guān)，且涉及多種炎癥介質(zhì)與細(xì)胞因子[4-5]。

在由干擾素γ、白細(xì)胞介素-2、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-12等構(gòu)成的復(fù)雜細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)中，它們互為誘導(dǎo)、制約、影響或協(xié)同，通過與炎性細(xì)胞的互為作用，參與氣道炎癥的調(diào)節(jié)，在支氣管哮喘疾病的發(fā)生和進(jìn)展中全程參與[6]。

Th1、Th2分屬于Th不同的兩個群，其中Th1主要是通過分泌Ⅰ型細(xì)胞因子（如干擾素γ、白細(xì)胞介素-12等）參與到由細(xì)胞毒性T細(xì)胞所介導(dǎo)的細(xì)胞免疫反應(yīng)當(dāng)中，起到抵抗細(xì)胞感染的作用；而Th2分泌的Ⅱ型細(xì)胞因子（如白細(xì)胞介素-6等）則是參與介導(dǎo)體液免疫。Th1/Th2失衡與支氣管哮喘疾病發(fā)生有密切關(guān)聯(lián)。

干擾素γ作為Th1細(xì)胞分泌的代表性細(xì)胞因子，上文研究發(fā)現(xiàn)，與健康的兒童相比，支氣管哮喘患兒干擾素γ水平明顯降低，同時隨著病情程度的嚴(yán)重，患兒干擾素γ水平愈漸降低；當(dāng)Ⅰ型細(xì)胞因子的代表干擾素γ水平降低時，便會造成Th2向Th1細(xì)胞類型分化轉(zhuǎn)化減弱，隨著干擾素γ分泌不足，Th2優(yōu)勢被激活，具體表現(xiàn)在Th2分泌的Ⅱ型細(xì)胞因子-白細(xì)胞介素-6細(xì)胞因子過度上升，造成Th1/Th2失衡。上文研究發(fā)現(xiàn)，與健康的兒童相比，支氣管哮喘患兒白細(xì)胞介素-6均更高，且隨著病情程度的嚴(yán)重，病情中重度者白細(xì)胞介素-6更高于輕度者、間歇病情者；白細(xì)胞介素-6致炎癥反應(yīng)發(fā)生的原因可能是在Th2細(xì)胞分化過程中會刺激白細(xì)胞介素-4的活化與增殖，分泌大量的炎癥介質(zhì)。白細(xì)胞介素-12是具有生物活性的細(xì)胞因子，對T細(xì)胞分化成Th1細(xì)胞因子能產(chǎn)生促進(jìn)作用，起到抑制Th1細(xì)胞因子的作用；哮喘疾病狀態(tài)下，隨著白細(xì)胞介素-10與前列腺素E2水平的升高，能通過下調(diào)白細(xì)胞介素-12水平而促進(jìn)Th2應(yīng)答；上文研究結(jié)果表明，患支氣管哮喘疾病的三組患兒白細(xì)胞介素-12水平皆要更低于對照組健康兒童，且隨著病情的趨于嚴(yán)重，白細(xì)胞介素-12水平愈低。提示隨著干擾素γ、白細(xì)胞介素-12水平的降低，Ⅱ型細(xì)胞因子功能變強(qiáng)，發(fā)生慢性氣道炎性反應(yīng)[3]。

通過以上對支氣管哮喘患兒細(xì)胞因子參數(shù)的分析可知，支氣管哮喘患[7-8]兒以分泌白細(xì)胞介素-6的Th2細(xì)胞功能活動為主，而分泌白細(xì)胞介素-12、干擾素γ的Th1細(xì)胞則相對不足。Th1與Th2細(xì)胞失衡而致哮喘疾病發(fā)生，同時隨著白細(xì)胞介素-12、干擾素γ水平越低、白細(xì)胞介素-6水平越高，患兒病情相應(yīng)就越嚴(yán)重?？梢娡ㄟ^檢測白細(xì)胞介素-12、干擾素γ、白細(xì)胞介素-6水平可用于評估支氣管哮喘病情。

綜上所述，支氣管哮喘患兒血清白細(xì)胞介素-6水平的增加，白細(xì)胞介素-12、干擾素γ降低，可作為評估病情的嚴(yán)重程度的依據(jù)。