向清淋 李軍 丁瑞 高群 伍雅敏 侯澤鑫

石河子大 醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院內(nèi)分泌代謝科，新疆 石河子 832000

糖尿病是一種由多種基因及多種環(huán)境因素共同作用的慢性代謝性疾病[1]，大部分糖尿病患者是2型糖尿病。骨質(zhì)疏松是糖尿病常見的并發(fā)癥。骨質(zhì)疏松及2型糖尿病已經(jīng)越來越成為影響中老年健康的慢性流行性疾病。Wnt信號(hào)通路被認(rèn)為是骨質(zhì)疏松癥和糖尿病共同發(fā)病機(jī)制之一。作為Wnt家族重要成員之一，Wnt3a可以通過多種途徑參與細(xì)胞生理過程，如通過Wnt/β-catenin調(diào)控細(xì)胞的更新和分化。目前已有研究表明Wnt3a基因多態(tài)性與2型糖尿病、骨質(zhì)疏松癥有明顯相關(guān)性[2]。Wnt3a 蛋白升高時(shí)，抑制成骨細(xì)胞增殖，進(jìn)而導(dǎo)致骨量丟失。但不同種族人群基因的作用機(jī)制可能不同，目前Wnt3a基因與我國人群骨密度和骨代謝情況的關(guān)聯(lián)尚缺乏相關(guān)研究；其基因多態(tài)性與絕經(jīng)后T2DM女性骨密度、骨代謝情況的相關(guān)性尚不明確。

本研究通過測定絕經(jīng)后女性外周血Wnt3a基因多態(tài)性并分析與骨密度、骨代謝和血脂代謝的相關(guān)性。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

選取石河子社區(qū)絕經(jīng)后T2DM女性81例，檢測rs708114位點(diǎn)基因多態(tài)性，根據(jù)rs708114位點(diǎn)基因多態(tài)性分為TT組(n=19)和CC/TC組(n=62)。同時(shí)檢測rs752107基因多態(tài)性，根據(jù)s752107基因多態(tài)性分為CC組(n=44)和CT/TT組(n=37)。T2DM的診斷標(biāo)準(zhǔn)符合1999年WHO推薦的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，BMD的判斷標(biāo)準(zhǔn)符合2017年WHO推薦的診斷標(biāo)準(zhǔn)。本研究通過醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，研究對(duì)象均簽署知情同意書。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

①絕經(jīng)后，意識(shí)清楚，語言表達(dá)能力正常；②同意參與本研究。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn)

①1型糖尿病；②妊娠糖尿病；③急慢性的心、肝、腎臟疾病；④惡性腫瘤；⑤先天性骨質(zhì)疏松癥；⑥消化道疾??；⑦長期口服激素或?qū)怯凶饔玫乃幤氛?；⑧甲狀腺功能亢進(jìn)、等內(nèi)分泌代謝疾??；⑨其他疾病引起的絕經(jīng)。

1.4 研究方法

1.4.1一般資料及生化指標(biāo)測定：年齡、絕經(jīng)年限、身高、體重、腰圍、臀圍、計(jì)算腰臀比(WHR)、體質(zhì)指數(shù)(BMI)；使用全自動(dòng)生化分析儀測定空腹血糖(FPG)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血鈣(Ca)、血磷(P)。高壓液相法測糖化血紅蛋白(HbAlc)，雙能X線骨密度儀測股骨頸骨密度(F-BMD)等指標(biāo)。

1.4.2基因多態(tài)性檢測：運(yùn)用飛行時(shí)間質(zhì)譜分析技術(shù)對(duì)Wnt3a基因rs752107、 rs708114位點(diǎn)多態(tài)性進(jìn)行檢測，結(jié)果用Sequenom 軟件進(jìn)行分型。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 TT組、CC/TC組一般臨床資料比較

兩組患者年齡、絕經(jīng)年限、體質(zhì)指數(shù)、腰臀比等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 組間一般基線資料比較Table 1 Comparison of general baseline data between the

2.2 TT組、CC/TC組患者生化指標(biāo)和股骨頸骨密度比較

與CC/TC組比較，TT組患者FPG顯著升高[(8.84±3.65) mmol/L vs (7.10±1.68) mmol/L,P=0.005]；HbA1c顯著升高[(8.11±1.78)% vs (7.15±0.87)%，P=0.002]；血清Ca顯著升高[(2.34±0.20) mmol/L vs (2.24±0.15) mmol/L,P=0.032]。兩組患者TG、HDL-C、LDL-C、血清P差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。TT組ALP、F-BMD有增高趨勢，但差異未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 組間生化指標(biāo)和股骨頸骨密度比較Table 2 Comparison of biochemical indexes and bone mineral density of the femoral neck between the

2.3 CC、TC/TT組一般臨床資料比較

兩組患者年齡、絕經(jīng)年限、體質(zhì)指數(shù)、腰臀比等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 組間一般基線資料比較Table 3 Comparison of general baseline data between CC and TC/TT groups

2.4 CC、TC/TT組生化指標(biāo)比較

CC組和TC/TT組患者HbA1c、TG、HDL-C、LDL-C、血清Ca、血清P、ALP和F-BMD等指標(biāo)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。CC組FPG有增高趨勢，但差異未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

表4 CC、TC/TT組生化指標(biāo)比較Table 4 Comparison of biochemical indexes between CC and TC/TT group

3 討論

糖尿病是骨密度降低和骨代謝異常的危險(xiǎn)因素[3]，因?yàn)楦哐菚?huì)導(dǎo)致成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞活性降低，嚴(yán)重者可導(dǎo)致成骨細(xì)胞凋亡、損傷骨細(xì)胞外基質(zhì)[4-6]。絕經(jīng)后，卵巢功能逐漸衰退，女性體內(nèi)雌激素逐漸降低，抑制成骨作用而促進(jìn)破骨活動(dòng)，因此容易出現(xiàn)骨質(zhì)疏松。Wnt 家族調(diào)控了骨組織的生長發(fā)育[7]，Wnt3a是其激活經(jīng)典通路。相關(guān)研究[8-9]發(fā)現(xiàn)，Wnt3a 蛋白升高時(shí)，抑制成骨細(xì)胞增殖，進(jìn)而導(dǎo)致骨量丟失。

本研究探討了Wnt3a基因rs752107位點(diǎn)、rs708114 位點(diǎn)與絕經(jīng)后T2DM女性骨代謝的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)rs708114 位點(diǎn)與骨密度和骨代謝指標(biāo)無明顯相關(guān)性。提示本人群rs752107位點(diǎn)不是T2DM女性骨代謝異常的易感基因。但國外Rafael等[2]研究顯示rs752107位點(diǎn)與骨代謝有關(guān)，與本研究不一致。這一差異可能是由于rs752107位點(diǎn)多態(tài)性對(duì)骨量的作用本身也受環(huán)境、地域、種族的影響，不同人種間具有不同的遺傳背景，同時(shí)2型糖尿病及骨質(zhì)疏松也是多基因、多位點(diǎn)、多環(huán)境危險(xiǎn)因素共同影響的疾病[10-12]。本研究發(fā)現(xiàn)rs708114 位點(diǎn)基因多態(tài)性分布與血清Ca水平有關(guān)，與骨密度、血清P等無明顯相關(guān)性，血清Ca水平是骨代謝的重要指標(biāo)[13]。研究顯示rs708114位點(diǎn)基因多態(tài)性與先天性脊柱側(cè)凸遺傳易感性有關(guān)[14]。rs708114位點(diǎn)基因多態(tài)性與2 型糖尿病、骨密度是否相關(guān)尚缺乏相關(guān)研究。但由于本研究僅觀察到rs708114位點(diǎn)與血清Ca水平有關(guān)，因此需要進(jìn)一步研究證實(shí)二者相關(guān)性。且P1NP、CTX及OCN也是骨代謝的重要指標(biāo)，但本研究未檢測，為其中一個(gè)不足之處。

本研究探討了Wnt3a基因rs752107位點(diǎn)、rs708114 位點(diǎn)與絕經(jīng)后T2DM女性血糖代謝的相關(guān)性，顯示W(wǎng)nt3a基因rs752107位點(diǎn)與血糖代謝無關(guān)。而rs708114 位點(diǎn)與FPG、HbA1c明顯相關(guān)。FPG、HbA1c是絕經(jīng)后T2DM患者血糖代謝的重要指標(biāo)，F(xiàn)PG反映當(dāng)前血糖控制情況，而HbA1c則反映一段時(shí)間內(nèi)患者血糖控制情況[15-19]。FPG、HbA1c水平升高，說明患者血糖控制不理想，病情嚴(yán)重，更容易發(fā)生心腦血管不良事件，是T2DM患者預(yù)后不良的獨(dú)立預(yù)測指標(biāo)。說明Wnt3a基因rs708114 位點(diǎn)突變與T2DM的易感性有關(guān)，且與患者病情嚴(yán)重度有一定關(guān)聯(lián)。本研究還探討了Wnt3a基因rs752107位點(diǎn)、rs708114 位點(diǎn)與絕經(jīng)后T2DM女性血脂代謝的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Wnt3a基因rs752107位點(diǎn)、rs708114 位點(diǎn)與血脂代謝無明顯相關(guān)性。

綜上所述，新疆石河子地區(qū)絕經(jīng)后2型糖尿病女性Wnt3a基因rs708114位點(diǎn)基因突變與血糖代謝有關(guān)。新疆石河子地區(qū)絕經(jīng)后2型糖尿病女性Wnt3a基因rs708114位點(diǎn)基因突變可能與骨代謝有關(guān)，但尚需要進(jìn)一步臨床研究證實(shí)。新疆石河子地區(qū)絕經(jīng)后2型糖尿病女性Wnt3a基因rs752107位點(diǎn)與骨代謝、糖代謝均無明顯相關(guān)性。新疆石河子地區(qū)絕經(jīng)后2型糖尿病女性Wnt3a基因rs752107位點(diǎn)、rs708114 位點(diǎn)與血脂代謝均無明顯相關(guān)性。