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        生活飲用水檢驗(yàn)中兩種微生物檢驗(yàn)方法的比較分析

        2021-10-06 13:25:34劉柳影廣東省普寧市疾病預(yù)防控制中心廣東普寧515300
        首都食品與醫(yī)藥 2021年18期
        關(guān)鍵詞:合格率生活

        劉柳影(廣東省普寧市疾病預(yù)防控制中心,廣東 普寧 515300)

        水是人體所需必不可少的一部分,維持人類正常生活所需。水的含量在人體中可達(dá)到70%以上,對(duì)人體起著重要作用,水調(diào)節(jié)著人體血液循環(huán)、新陳代謝以及酸堿平衡。對(duì)于地球上的其他生物而言,水也是不可或缺的[1]。由于水具有流動(dòng)性,局部地區(qū)水源污染會(huì)導(dǎo)致其他地方的水污染,而水污染的擴(kuò)散又影響著人們正常的生產(chǎn)生活。所以,水中微生物安全檢驗(yàn)顯得十分重要。目前,我國(guó)飲用水的處理方法有過(guò)濾、沉淀、添加氯進(jìn)行再處理[2],這些處理方法可以有效減少水污染中的雜質(zhì)和沉淀物,但是水中微生物含量還需要進(jìn)一步檢驗(yàn)?,F(xiàn)對(duì)2019年1-12月收集的400份飲用水樣品和未處理的水樣采取回顧性分析,比較多管發(fā)酵檢驗(yàn)和濾膜檢驗(yàn)方法的檢驗(yàn)結(jié)果,詳細(xì)報(bào)告如下。

        1 一般資料和方法

        1.1 一般資料 將2019年1-12月從不同水廠收集的生活飲用水和未處理水樣400份作為本次研究對(duì)象,每份飲用水各100mL,生活飲用水200份,未處理用水200份,分別用濾膜檢驗(yàn)和多管發(fā)酵檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)水樣細(xì)菌情況,對(duì)比兩組檢查方法檢查水樣中細(xì)菌情況和水樣合格率情況。

        1.2 方法

        1.2.1 濾膜檢驗(yàn) 準(zhǔn)備檢測(cè)用品:試劑(乳糖蛋白)、鑷子、過(guò)濾儀器、培養(yǎng)基(品紅亞硫酸鈉)。將待檢測(cè)生活飲用水放入到微孔濾膜中進(jìn)行過(guò)濾,微孔濾膜孔徑0.45微米,再將過(guò)濾完畢的濾膜紙放置在含有乳糖的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)溫度37℃,培養(yǎng)時(shí)間2d。具體操作方法:首先,將生活飲用水樣本進(jìn)行殺菌處理,用無(wú)菌鑷子將過(guò)濾完畢的濾膜放置在裝有蒸餾水的燒杯中,蒸餾水煮至沸騰,進(jìn)行3次沸煮,每次時(shí)間15min,將前兩次煮沸后的水及時(shí)清理,避免留下殘留物,保證被測(cè)樣本無(wú)其他雜質(zhì)干擾。其次,樣本過(guò)濾,用無(wú)菌鑷子夾住濾膜放置于儀器的無(wú)菌濾床上,濾膜粗糙的一面放置在上方,加固過(guò)濾器,將100mL生活飲用水放入過(guò)濾器,打開閘門,氣壓0.05設(shè)定,進(jìn)行抽濾。最后,將過(guò)濾完畢的濾膜取出,無(wú)菌鑷子夾住濾膜邊緣,保證被測(cè)菌落的完整性,放置入含有品紅硫酸鈉的培養(yǎng)皿中,濾膜平整放入培養(yǎng)皿中,避免氣泡產(chǎn)生,培養(yǎng)皿倒置放入設(shè)定恒溫37℃的培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)時(shí)間2d左右。檢驗(yàn)完生活飲用水水樣后,再對(duì)未處理的水樣進(jìn)行濾膜檢驗(yàn),按照上述步驟進(jìn)行。

        1.2.2 多管發(fā)酵檢驗(yàn) 準(zhǔn)備檢測(cè)用品:培養(yǎng)皿、天平、載玻片、顯微鏡、導(dǎo)管、分度吸管。多管發(fā)酵檢驗(yàn)原理,大腸桿菌經(jīng)過(guò)放置發(fā)酵產(chǎn)生酸和氣體,按照其原理進(jìn)行檢驗(yàn)試驗(yàn)。具體操作如下,取1mL水樣分別放于10mL的單料乳糖蛋白胨和9mL的生理鹽水中,充分混勻后各自取出1mL分別放入5份稀釋濃度不同的水樣中。再?gòu)牟煌瑵舛鹊乃畼又腥〕?mL分別接種到雙料培養(yǎng)基上放入培養(yǎng)箱,溫度35℃-37℃,時(shí)間2天。判定標(biāo)準(zhǔn),培養(yǎng)過(guò)程中,如果未出現(xiàn)酸和氣體,則樣品中大腸桿菌為陰性;如果產(chǎn)生酸和氣體,則大腸桿菌為陽(yáng)性,還需將樣品再檢驗(yàn)。將樣品放置在伊紅美藍(lán)瓊脂板上放入培養(yǎng)箱,溫度35℃-37℃,時(shí)間在1d內(nèi),不低于18h,定時(shí)觀察瓊脂板情況,將菌落完整的瓊脂板進(jìn)行革蘭氏染色,用顯微鏡觀察瓊脂板。生活用水水樣檢驗(yàn)完畢后,再對(duì)未處理水樣進(jìn)行多管發(fā)酵檢驗(yàn),操作步驟如上所述。

        1.2.3 微生物檢測(cè)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 我國(guó)現(xiàn)行飲用水標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定細(xì)菌總數(shù)在100個(gè)/mL內(nèi),因?yàn)楝F(xiàn)在使用的日常用水往往經(jīng)過(guò)物理處理和化學(xué)處理后再使用,但是水中還是殘存一定數(shù)量的細(xì)菌菌落數(shù),存在飲用水微生物不達(dá)標(biāo)或者水質(zhì)較渾濁的現(xiàn)象時(shí),水中大腸桿菌數(shù)量不符合既定標(biāo)準(zhǔn)。此外,飲用水處理過(guò)程中,還存在其他原因?qū)е绿幚砗蟮乃俅卧馐芪廴?,如供水管管壁破裂,或者供水管使用時(shí)間較長(zhǎng)導(dǎo)致管壁微生物滋生等。所以,對(duì)飲用水做好檢驗(yàn)和抽查就顯得非常重要了。

        1.3 觀察指標(biāo) 根據(jù)國(guó)家飲用水標(biāo)準(zhǔn),每毫升水細(xì)菌總數(shù)不超過(guò)100個(gè),檢測(cè)指標(biāo)有大腸桿菌、雜菌、耐熱大腸桿菌、大腸埃希氏菌,計(jì)算出檢測(cè)樣本結(jié)果,比較兩組水樣的合格率。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 研究數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS20.0軟件進(jìn)行處理,計(jì)數(shù)資料以n(%)表示,行χ2檢驗(yàn),計(jì)量資料以(±s)表示,行t檢驗(yàn),P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組水樣檢驗(yàn)合格情況比較 對(duì)200份生活飲用水檢測(cè)中,多管發(fā)酵檢驗(yàn)水樣總合格195份,合格率97.5%,而濾膜檢驗(yàn)水樣總合格169份,合格率84.5%,多管發(fā)酵檢驗(yàn)合格率顯著高于濾膜檢驗(yàn)合格率(P<0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見表1。

        表1 兩組水樣檢驗(yàn)合格率結(jié)果

        2.2 兩組水樣中細(xì)菌指數(shù)比較 在對(duì)未處理水樣的檢測(cè)中,多管發(fā)酵檢驗(yàn)大腸桿菌、雜菌、耐熱大腸菌群、大腸埃希菌檢出率均顯著高于濾膜檢驗(yàn)檢出率(P<0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見表2。

        表2 兩組水樣中細(xì)菌檢出率結(jié)果

        3 討論

        生活用水事關(guān)民生,通過(guò)檢驗(yàn)生活用水中的微生物,可判斷生活用水合格情況[3-4],保障用水安全。通過(guò)實(shí)驗(yàn)中回顧性方法研究,在200份未處理被測(cè)樣品水中,多管發(fā)酵檢驗(yàn)檢出大腸桿菌174份、雜菌168份、耐熱大腸桿菌182份、大腸埃希菌190份,檢出率93.5%;而濾膜檢驗(yàn)檢出大腸桿菌148份、雜菌144份、耐熱大腸桿菌158份、大腸埃希菌168份,檢出率78%,多管發(fā)酵檢驗(yàn)細(xì)菌菌落檢出率顯著高于濾膜檢驗(yàn)(P<0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。濾膜檢驗(yàn)出廠水合格水樣69份,管網(wǎng)末梢水合格水樣70份,二次供水合格水樣30份,總合格水樣份數(shù)169份,合格率84.5%;而多管發(fā)酵檢驗(yàn)出廠水合格水樣78份,管網(wǎng)末梢水合格水樣79份,二次供水合格水樣38分,總合格水樣195份,合格率97.5%。多管發(fā)酵檢驗(yàn)總合格率顯著高于濾膜檢驗(yàn)(P<0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,對(duì)比兩種方法的檢驗(yàn)原理,多管發(fā)酵檢驗(yàn)將樣本水樣稀釋后進(jìn)行菌落培養(yǎng),按照不同的稀釋濃度分別進(jìn)行菌落觀察,觀察各個(gè)稀釋度菌落的單位體積數(shù)[5]。而濾膜檢驗(yàn)將樣品水樣經(jīng)過(guò)過(guò)濾器過(guò)濾,把濾膜放置于培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),觀察培養(yǎng)基上濾膜大腸桿菌單位體積[6]。兩種方法各有優(yōu)點(diǎn),多管發(fā)酵檢驗(yàn)較濾膜檢驗(yàn)水樣合格率較高,而濾膜檢驗(yàn)操作簡(jiǎn)便,檢驗(yàn)結(jié)果較快,兩種方法均可適用。不過(guò),對(duì)比檢驗(yàn)結(jié)果,未處理的水樣檢測(cè)中,多管發(fā)酵檢驗(yàn)細(xì)菌檢出率高于濾膜檢驗(yàn),而生活飲用水檢測(cè)中,多管發(fā)酵檢驗(yàn)的水質(zhì)合格率高于濾膜檢驗(yàn)水質(zhì)合格率。說(shuō)明多管發(fā)酵檢驗(yàn)有較高的靈敏度,能夠準(zhǔn)確檢驗(yàn)出細(xì)菌菌落,經(jīng)過(guò)多管發(fā)酵檢驗(yàn)的水樣,其合格率較濾膜檢驗(yàn)較高。

        生活中存在各種細(xì)菌,這些細(xì)菌以生活用水為載體,人們食用這些細(xì)菌含量超標(biāo)的飲用水容易導(dǎo)致各種疾病滋生。由于細(xì)菌引起的各種疾病成為人們研究的重點(diǎn),水資源的污染,嚴(yán)重影響人們的生命健康。從而加強(qiáng)水質(zhì)檢驗(yàn)尤為重要,涉及公共衛(wèi)生安全,國(guó)家相關(guān)部門應(yīng)加大對(duì)水質(zhì)檢驗(yàn)的抽樣檢查[7],環(huán)保部門加大對(duì)水源污染的監(jiān)管,基層加大對(duì)水資源保護(hù)的宣傳和保護(hù),將水源保護(hù)放在首位,減少水源垃圾污染、供水管道破壞污染水源等。全社會(huì)共同營(yíng)造保護(hù)水資源,愛護(hù)水資源,減少水污染的意識(shí),相關(guān)部門加大對(duì)生活用水相關(guān)知識(shí)的科普,定期抽查檢驗(yàn),保障群眾用水安全。

        綜上所述,在水樣檢驗(yàn)中,多管發(fā)酵檢驗(yàn)較濾膜檢驗(yàn)更好[8-9],具有較高的細(xì)菌檢出率,值得推廣應(yīng)用。

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