侯素君，閆秀中，王曉梅，周緒云，焦 玲

山東省日照市中醫(yī)醫(yī)院，山東日照 276800

泌尿系統(tǒng)感染(UTI)是一種常見(jiàn)且多發(fā)的感染性疾病[1-2]，是由病原菌侵犯泌尿系統(tǒng)、引發(fā)炎性反應(yīng)所致，其主要臨床表現(xiàn)為尿頻、尿急、尿痛、尿液渾濁、蛋白尿等。臨床診斷泌尿系統(tǒng)感染的主要方法為實(shí)驗(yàn)室檢查，尿液細(xì)菌培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn)[3-5]，在泌尿系統(tǒng)感染的診斷中應(yīng)用價(jià)值高，但常規(guī)的中段尿細(xì)菌培養(yǎng)需2～3 d才能作出報(bào)告，會(huì)耽誤早期診斷以及治療的最佳時(shí)機(jī)，甚至可能會(huì)出現(xiàn)慢性感染或敗血癥，臨床醫(yī)生往往在尿培養(yǎng)正式報(bào)告之前先經(jīng)驗(yàn)治療。故此，選擇一種快捷且準(zhǔn)確的篩查方式意義重大。本研究將尿液細(xì)菌培養(yǎng)和尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)聯(lián)合尿沉渣白細(xì)胞檢驗(yàn)進(jìn)行對(duì)比分析，旨在促進(jìn)泌尿系統(tǒng)感染診斷準(zhǔn)確率的提高，緩解抗菌藥物濫用情況，滿足臨床快速診斷的需求。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年3月至2020年2月本院收入的疑似泌尿系統(tǒng)感染患者200例為研究對(duì)象，其中男性120例，女性80例，年齡42～75歲，平均(58.5±0.5)歲。

1.2儀器與試劑 Sysmex UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀及配套試劑，質(zhì)控品購(gòu)自伯樂(lè)生物技術(shù)有限公司；VITEK-2 Compact全自動(dòng)微生物分析儀及相應(yīng)鑒定板，質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC 25922、銅綠假單胞菌ATCC2 7853、金黃色葡萄球菌ATCC 25923、肺炎克雷伯菌ATCC 700603、大腸埃希菌ATCC 700323、糞腸球菌ATCC 51299、糞腸球菌ATCC 29212、大腸埃希菌ATCC 35218、腐生葡萄球菌ATCC 750、金黃色葡萄球菌ATCC 29213和白色假絲酵母菌ATCC 90028，均由山東省臨床檢驗(yàn)中心提供。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集 按照文獻(xiàn)[6]參考標(biāo)準(zhǔn)指導(dǎo)患者留取清潔中段尿液20～30 mL,分別裝在兩個(gè)無(wú)菌有蓋容器中，立即送往實(shí)驗(yàn)室，2 h內(nèi)完成尿液細(xì)菌培養(yǎng)接種和尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)。

1.3.2尿液細(xì)菌培養(yǎng)法 使用10 μL無(wú)菌定量接種環(huán)接種血瓊脂平板、麥康凱平板，35 ℃培養(yǎng)18～24 h，有細(xì)菌生長(zhǎng)則對(duì)菌落數(shù)量進(jìn)行計(jì)算，采用法國(guó)生物梅里埃公司VITEK-2 Compact全自動(dòng)微生物分析儀進(jìn)行菌株鑒定，無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)繼續(xù)培養(yǎng)24 h。判斷標(biāo)準(zhǔn)參考文獻(xiàn)[6]：革蘭陰性菌，細(xì)菌數(shù)≥105CFU/mL，說(shuō)明標(biāo)本為感染菌尿；細(xì)菌數(shù)在104～105CFU/mL，表明標(biāo)本為疑似感染菌尿，可結(jié)合臨床癥狀判斷或復(fù)查；細(xì)菌數(shù)低于104CFU/mL，提示臨床意義不大。革蘭陽(yáng)性菌：感染菌尿、無(wú)感染菌尿的標(biāo)準(zhǔn)分別為細(xì)菌數(shù)≥104CFU/mL、<104CFU/mL；真菌：感染菌尿、無(wú)感染菌尿的標(biāo)準(zhǔn)分別為細(xì)菌數(shù)≥104CFU/mL(兩次培養(yǎng)以上)、<104CFU/mL。

1.3.3尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)法 使用UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀(日本sysmex公司生產(chǎn))對(duì)標(biāo)本中的細(xì)菌數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，儀器每天用專用質(zhì)控品(2種濃度級(jí)別)進(jìn)行質(zhì)控監(jiān)測(cè)。細(xì)菌數(shù)>100/μL且白細(xì)胞>10/μL確定為感染菌尿[7-8]；細(xì)菌數(shù)>8/HP、>10/HP分別與尿液細(xì)菌培養(yǎng)中>102CFU/mL、>105CFU/mL相當(dāng)。若患者有泌尿系感染癥狀出現(xiàn)，而細(xì)菌檢驗(yàn)未得出檢測(cè)，提示可能存在衣原體感染。

1.4觀察指標(biāo) 觀察兩種檢測(cè)方法的陽(yáng)性率。觀察尿液細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本中的病原菌分布情況。以尿液細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)法于泌尿系統(tǒng)感染中的診斷效能進(jìn)行評(píng)價(jià)。同時(shí)對(duì)尿沉渣細(xì)菌通道檢測(cè)革蘭陽(yáng)性球菌和革蘭陰性桿菌的結(jié)果進(jìn)行比較。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 將兩組各項(xiàng)觀察指標(biāo)數(shù)據(jù)錄入統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS21.0中進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分率形式表示，總符合率=100%×[(真陽(yáng)性+真陰性)/總標(biāo)本數(shù)]；靈敏度=100%×[真陽(yáng)性/(真陽(yáng)性+假陰性)]；特異度=100%×[真陰性/(真陰性+假陽(yáng)性)]，行χ2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1兩種方法檢測(cè)結(jié)果比較 200例患者的尿液標(biāo)本中，尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)測(cè)定陽(yáng)性129例，陽(yáng)性率64.50%(129/200)；尿液細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性126例，陽(yáng)性率63.00%(126/200)；兩種方法檢測(cè)陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.097,P>0.05)。

2.2尿液細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本中的病原菌分布情況 126例陽(yáng)性患者標(biāo)本中共檢出病原菌126株，革蘭陰性菌、革蘭陽(yáng)性菌、真菌的構(gòu)成比分別為70.63%(89/126)、23.81%(30/126)、5.56%(7/126)；革蘭陰性菌以大腸埃希菌51.59%(65/126)為主，革蘭陽(yáng)性菌以屎腸球菌8.73%(11/126)為主。見(jiàn)表1。

表1 尿液細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本中的病原菌分布情況

2.3尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)在泌尿系感染診斷中的效果評(píng)價(jià) 以尿液細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，將尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)檢測(cè)結(jié)果中的129份陽(yáng)性標(biāo)本和71份陰性標(biāo)本進(jìn)行尿液細(xì)菌培養(yǎng)，對(duì)比評(píng)估兩種方法的符合率。尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)和尿液細(xì)菌培養(yǎng)的陽(yáng)性標(biāo)本符合率為96.90%(125/129)，假陰性率0.31%(4/129)，陰性標(biāo)本符合率為97.18%(69/71)，假陽(yáng)性率0.28%(2/71)；兩種方法符合率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)與尿液細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果比較(n)

2.4尿沉渣細(xì)菌通道檢測(cè)革蘭陽(yáng)性球菌 以尿液細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，尿沉渣細(xì)菌通道檢測(cè)革蘭陽(yáng)性球菌的符合率為88.00%，靈敏度為60.00%(18/30)，特異度為92.94%(158/170)。尿沉渣細(xì)菌通道與尿液細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)革蘭陽(yáng)性球菌結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 兩種檢測(cè)方法檢測(cè)革蘭陽(yáng)性球菌的結(jié)果(n)

2.5尿沉渣細(xì)菌通道檢測(cè)革蘭陰性桿菌 以尿液細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，尿沉渣細(xì)菌通道檢測(cè)革蘭陰性桿菌的符合率為88.50%，靈敏度為77.53%(69/89)，特異度為97.30%(108/111)。尿沉渣細(xì)菌通道與尿液細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)革蘭陰性桿菌結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 兩種檢測(cè)方法檢測(cè)革蘭陰性桿菌的結(jié)果(n)

2.6尿沉渣細(xì)菌通道檢測(cè)革蘭陽(yáng)性球菌與革蘭陰性桿菌結(jié)果比較 以尿液細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，尿沉渣細(xì)菌通道檢測(cè)革蘭陽(yáng)性球菌與革蘭陰性桿菌的符合率、靈敏度和特異度，革蘭陰性桿菌檢測(cè)結(jié)果均優(yōu)于革蘭陽(yáng)性球菌。見(jiàn)表5。

表5 尿沉渣細(xì)菌通道檢測(cè)革蘭陽(yáng)性球菌與革蘭陰性桿菌結(jié)果比較(%)

3 討 論

95%以上的泌尿系統(tǒng)感染是由單一細(xì)菌引起的，主要病原菌為大腸埃希菌，其次是腸球菌[9-10]。泌尿系統(tǒng)感染的早期癥狀不明顯，若未得到及時(shí)的診斷和治療，病情會(huì)向菌血癥或敗血癥進(jìn)展[4,11]，因此早期診斷泌尿系統(tǒng)感染十分重要。尿液細(xì)菌培養(yǎng)與尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)檢測(cè)的意義在于檢測(cè)人體泌尿系統(tǒng)是否有病原菌存在，對(duì)于存在細(xì)菌感染的患者，均進(jìn)行抗菌藥物敏感試驗(yàn)，從而為臨床醫(yī)生選擇合理的抗菌藥物提供參考[12]。

尿液作為機(jī)體的排泄物之一，可對(duì)腎臟器官的病理變化情況進(jìn)行反映[13]。正常尿液無(wú)菌，而人體泌尿生殖道外存在細(xì)菌，且女性陰道內(nèi)一般情況下無(wú)致病菌存在，但存在條件致病菌。pH值的改變會(huì)導(dǎo)致正常菌群狀況失衡，因此進(jìn)行尿培養(yǎng)時(shí)應(yīng)注意排除外界細(xì)菌干擾。尿液細(xì)菌培養(yǎng)是泌尿系統(tǒng)感染的診斷金標(biāo)準(zhǔn)，其過(guò)程步驟較多，檢查耗時(shí)長(zhǎng)，陽(yáng)性率低，不利于患者盡早接受治療，因此，需要采用更加便捷、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法。尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)是一種全自動(dòng)尿沉渣分析儀進(jìn)行細(xì)菌檢測(cè)的方法，具有設(shè)備簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，在基層醫(yī)療單位以及大規(guī)模篩查中具有顯著作用[14-16]。

尿沉渣是尿液中的有形成分，是原尿經(jīng)過(guò)離心后形成的沉渣，也是尿液有形成分質(zhì)和量的組合。尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)能夠?qū)γ谀蛳到y(tǒng)疾病進(jìn)行診斷、鑒別、定位，其能夠監(jiān)測(cè)藥物治療效果；另外尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)檢測(cè)包括多種技術(shù)，半導(dǎo)體激光、特異性核酸熒光染色和流式細(xì)胞技術(shù)，細(xì)菌檢測(cè)使用專用通道和特異性染液，最大限度地消除干擾物質(zhì)對(duì)細(xì)菌檢測(cè)的影響，其能夠利用激光將細(xì)胞及有形成分激發(fā)，促使散射光、熒光等光信號(hào)產(chǎn)生[17-18]，再將其向電信號(hào)轉(zhuǎn)化，有助于對(duì)各種有形成分進(jìn)行定量分析，因此具有較高的檢測(cè)準(zhǔn)確率，且及時(shí)高效，大量的尿液標(biāo)本篩查采用尿沉渣細(xì)菌計(jì)數(shù)比較合適。尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)采用UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)尿液標(biāo)本，該分析儀配有專用的細(xì)菌檢測(cè)通道，由紅色半導(dǎo)體激光發(fā)射紅褐色激光、照射經(jīng)過(guò)核酸染色后在鞘流貫流分析池中形成鞘流標(biāo)本，對(duì)尿中各個(gè)粒子進(jìn)行多角度散射光和不同級(jí)別的熒光檢測(cè)，能夠?qū)⒛蛞褐衅渌⑿〕煞值挠绊憸p輕[19]，從而獲得高精密、高可信度的分析數(shù)據(jù)，細(xì)菌檢驗(yàn)的特異度可得到提高。

本研究中，對(duì)尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)檢測(cè)結(jié)果與臨床診斷金標(biāo)準(zhǔn)尿液細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，200例中段尿標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果顯示，陽(yáng)性率為63.00%，尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)顯示，陽(yáng)性率為64.50%，兩種檢測(cè)方法的陽(yáng)性率相近，說(shuō)明了尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性較高。200例中段尿檢測(cè)標(biāo)本中，尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)與尿液細(xì)菌培養(yǎng)的陽(yáng)性標(biāo)本符合率為96.90%，陰性標(biāo)本符合率為97.18%；假陰性率0.31%，假陽(yáng)性率0.28%；陽(yáng)性及陰性標(biāo)本的符合率均高達(dá)95%以上，說(shuō)明了兩種檢測(cè)方法應(yīng)用在泌尿系統(tǒng)感染診斷中均具有較高的價(jià)值。分析本研究中出現(xiàn)假陰性結(jié)果的原因可能與檢測(cè)前使用抗菌藥物和抗菌藥物濫用有關(guān)，以及與尿液殘存低濃度的抗菌藥物抑制細(xì)菌生長(zhǎng)、檢測(cè)前大量飲水、留取尿液前使用消毒液清洗尿道等因素有關(guān)；而假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn)則與留取尿液時(shí)被污染相關(guān)。使用UF-1000i細(xì)菌計(jì)數(shù)則受抗菌藥物和培養(yǎng)方法干擾較小，可以彌補(bǔ)金標(biāo)準(zhǔn)尿液培養(yǎng)結(jié)果陽(yáng)性率較低的不足。

同時(shí)UF-1000i尿沉渣分析儀可以提供直觀的細(xì)菌檢測(cè)散點(diǎn)圖和泌尿系感染診斷信息，通過(guò)圖形分析可以初步判斷檢出細(xì)菌為陽(yáng)性球菌、陰性桿菌或混合細(xì)菌感染[9]。本研究結(jié)果顯示UF-1000i的細(xì)菌通道與金標(biāo)準(zhǔn)尿液細(xì)菌培養(yǎng)相比，革蘭陽(yáng)性球菌和革蘭陰性桿菌的符合率、特異度均較高，說(shuō)明UF-1000i尿沉渣分析儀在鑒別診斷泌尿系感染患者是革蘭陽(yáng)性球菌感染還是革蘭陰性桿菌感染方面準(zhǔn)確率較高，臨床醫(yī)生可以根據(jù)UF-1000i報(bào)告的革蘭陽(yáng)性球菌或革蘭陰性桿菌，再結(jié)合泌尿系感染常見(jiàn)病原菌的臨床分布情況和耐藥情況，指導(dǎo)尿液細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果不明情況下的臨床經(jīng)驗(yàn)治療用藥，輔助臨床醫(yī)師選擇合理有效的抗菌藥物，減輕患者病痛和降低診療費(fèi)用。UF-1000i尿沉渣細(xì)菌通道檢測(cè)革蘭陽(yáng)性球菌與革蘭陰性桿菌結(jié)果相比較，符合率、靈敏度、特異度，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說(shuō)明UF-1000i對(duì)于革蘭陰性桿菌的檢測(cè)能力優(yōu)于革蘭陽(yáng)性球菌，泌尿系感染的主要病原菌為革蘭陰性桿菌[9-10]，這種優(yōu)勢(shì)檢測(cè)能力對(duì)臨床醫(yī)師經(jīng)驗(yàn)治療起到了良好指導(dǎo)作用。

總而言之，尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)同尿液細(xì)菌培養(yǎng)相比，陽(yáng)性率相近，陽(yáng)性率較高；陽(yáng)性標(biāo)本及陰性標(biāo)本符合率均較高；設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便，篩查速度快，可以作為臨床診斷泌尿系感染的參考依據(jù)，更適合應(yīng)用在基層篩查泌尿系統(tǒng)感染中。同時(shí)尿沉渣細(xì)菌通道在泌尿系感染患者的早期針對(duì)性選擇抗菌藥物方面有較好的參考價(jià)值，特別是革蘭陰性桿菌引起的泌尿系感染，有更高的參考價(jià)值。