盧 佩, 丁振若, 鄭善鑾, 劉海波
(1. 空軍軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院檢驗(yàn)科,陜西 西安 710032;2. 陜西省中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科,陜西 西安 710003)
通過(guò)多年對(duì)尿液中紅細(xì)胞形態(tài)的觀察,我們發(fā)現(xiàn)在不同泌尿系疾病中紅細(xì)胞形態(tài)會(huì)有所不同,并對(duì)臨床診斷有一定提示價(jià)值。本研究主要介紹在尿沉渣中發(fā)現(xiàn)的一種由小紅細(xì)胞緊密聚集成團(tuán)的特殊細(xì)胞,我們將其命名為紅細(xì)胞免疫球;并探討檢出紅細(xì)胞免疫球?qū)δI小球腎炎等泌尿系疾病進(jìn)行鑒別診斷與定位診斷的臨床價(jià)值。
選取2017年1月—2018年11月空軍軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院腎內(nèi)科、泌尿外科住院患者260例(實(shí)驗(yàn)組),其中男135例、女125例,年齡(37±2)歲。260例患者中,腎盂腎炎患者50例,經(jīng)X線腎盂造影顯示異常改變;腎小球腎炎患者140例,其中IgA腎病患者32例、紫癜性腎小球腎炎患者40例、隱匿型腎小球腎炎患者38例,且均通過(guò)腎活檢確診,另有慢性腎小球腎炎患者30例;尿路感染患者60例,其中膀胱炎患者22例、尿道炎患者38例均有尿急、尿頻、尿痛等尿路刺激癥狀,膀胱鏡、尿道鏡和細(xì)菌培養(yǎng)異常;膀胱腫瘤患者10例,經(jīng)膀胱鏡、電子計(jì)算機(jī)斷層掃描、磁共振成像檢查確診。以同期100名體檢健康者作為對(duì)照組,其中男52名、女48名,年齡(39±2)歲,對(duì)照者X線腎盂造影均無(wú)異常改變,腎功能檢查、B超等各項(xiàng)檢查均正常。
收集所有研究對(duì)象新鮮中段晨尿10 mL,430×g離心5 min,棄上清液,留取0.2 mL沉淀,混勻后取0.1 mL沉渣涂片,用高倍鏡全片檢查尋找紅細(xì)胞免疫球,檢測(cè)要求2 h內(nèi)完成。全片發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞免疫球≥1個(gè)按陽(yáng)性計(jì)算,并通過(guò)免疫熒光染色對(duì)比試驗(yàn)確定;采用兔抗人免疫球蛋白熒光抗體的方法進(jìn)行熒光素細(xì)胞染色[1]。檢測(cè)多型紅細(xì)胞百分比,記錄>75%的例數(shù)。EURostarⅢplus熒光顯微鏡、熒光染液購(gòu)自歐蒙醫(yī)學(xué)診斷(中國(guó))有限公司。BX53顯微鏡購(gòu)自日本OLYMPUS公司。
采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率表示,比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
在高倍鏡下,紅細(xì)胞免疫球是一群小紅細(xì)胞黏附聚集成的團(tuán)狀物,常有絲狀物纏繞,也可有膜狀物包裹,形態(tài)不規(guī)則,可呈圓形或橢圓形,每個(gè)細(xì)胞之間結(jié)合緊密,看不到膜間隔,有部分已融合在一起,見圖1。加熒光標(biāo)記兔抗人免疫球蛋白熒光抗體后,出現(xiàn)明顯黃綠色熒光。紅細(xì)胞免疫球經(jīng)兔抗人免疫球蛋白熒光染色后可呈明亮黃綠色熒光,單個(gè)紅細(xì)胞已融成一體,看不到單個(gè)紅細(xì)胞胞界,見圖2。
圖1 濕片中紅細(xì)胞免疫球形態(tài)(×400)
圖2 熒光染色后紅細(xì)胞免疫球形態(tài)(×400)
在高倍鏡下觀察非紅細(xì)胞免疫球紅細(xì)胞聚集現(xiàn)象,可見每個(gè)紅細(xì)胞之間結(jié)合較松散,一般是由黏液絲黏附在一起,形狀不規(guī)則,表面沒有膜狀物包裹,見圖3。單純紅細(xì)胞聚集現(xiàn)象表現(xiàn)為熒光染色后可見紅細(xì)胞松散結(jié)合,可見單個(gè)紅細(xì)胞胞界,沒有融合,也沒有包膜包裹,見圖4。
圖3 濕片中紅細(xì)胞聚集形態(tài)(×400)
圖4 熒光染色后紅細(xì)胞聚集形態(tài)(×400)
尿液中紅細(xì)胞免疫球多見于IgA腎病,以及由微生物、內(nèi)毒素引起的急性腎小球腎炎、過(guò)敏性腎小球腎炎、隱匿型腎小球腎炎,多出現(xiàn)在早期未經(jīng)治療患者的尿液中;多型紅細(xì)胞常見于IgA腎病、紫癜性腎小球腎炎、慢性腎小球腎炎等疾病,多型紅細(xì)胞>75%為腎性紅細(xì)胞。見表1。
表1 不同泌尿系疾病患者尿液中紅細(xì)胞免疫球和多型紅細(xì)胞觀察結(jié)果
紅細(xì)胞免疫球在尿沉渣濕片中為圓形、橢圓形紅細(xì)胞團(tuán)塊,是數(shù)個(gè)小紅細(xì)胞黏附聚集在一起形成的成團(tuán)單個(gè)紅細(xì)胞,間隔不清晰,相互融合,不易解離。紅細(xì)胞免疫球周邊光滑,用兔抗人免疫球蛋白熒光抗體染色后,呈明亮黃綠色,有熒光[2],說(shuō)明表面被免疫球蛋白覆蓋。已有研究證實(shí),在腎小球、腎小管病變患者尿中免疫球蛋白數(shù)量有所增加[3-4],借此可區(qū)分是腎性紅細(xì)胞,還是非腎性紅細(xì)胞。而一般紅細(xì)胞聚集形態(tài)不規(guī)則,紅細(xì)胞間結(jié)合松散。單個(gè)紅細(xì)胞胞界清晰,無(wú)融合現(xiàn)象。熒光染色后呈黃綠色熒光,但結(jié)合疏松,形態(tài)多樣,周邊不光滑。本研究結(jié)果顯示,IgA腎病、紫癜性腎小球腎炎、隱匿型腎小球腎炎患者尿沉渣中均能檢出紅細(xì)胞免疫球,且陽(yáng)性率較高;慢性腎小球腎炎紅細(xì)胞免疫球陽(yáng)性率不高。觀察尿沉渣中紅細(xì)胞免疫球有助于鑒別紅細(xì)胞來(lái)源,有利于泌尿系統(tǒng)疾病的鑒別診斷與定位診斷。
紅細(xì)胞免疫球在腎小球腎炎初期未經(jīng)治療患者尿中出現(xiàn)率較高,患者紅細(xì)胞形態(tài)也較差[5],多出現(xiàn)在急性期。本研究結(jié)果顯示,紅細(xì)胞免疫球在IgA腎病中檢出率最高,陽(yáng)性率為93.7%;在紫癜性腎小球腎炎中檢出率也較高,陽(yáng)性率為87.5%;隱匿型腎小球腎炎患者的陽(yáng)性率為65.8%;慢性腎小球腎炎的陽(yáng)性率為16.7%。紅細(xì)胞免疫球在免疫因素介導(dǎo)的急性腎小球腎炎中檢出率較高,而在慢性腎小球腎炎中檢出率較低,在尿路感染和泌尿系腫瘤患者尿液中沒有發(fā)現(xiàn)。提示通過(guò)檢測(cè)紅細(xì)胞免疫球陽(yáng)性率,可鑒別腎小球腎炎種類,結(jié)合紅細(xì)胞形態(tài)可鑒別紅細(xì)胞來(lái)源是腎性紅細(xì)胞,還是非腎性紅細(xì)胞。紅細(xì)胞免疫球的形成可能由免疫反應(yīng)介導(dǎo),但具體形成機(jī)制還需進(jìn)一步研究。
尿液紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)作為血尿來(lái)源定位初篩試驗(yàn)[6],患者留取標(biāo)本簡(jiǎn)單,且無(wú)創(chuàng)傷性,能較為準(zhǔn)確地判斷血尿來(lái)源。多型紅細(xì)胞指紅細(xì)胞大小不等,形態(tài)呈2種及以上多型性變化,顯微鏡下根據(jù)尿液中多型紅細(xì)胞的百分比來(lái)判斷是否為腎源性血尿,與病理學(xué)診斷的符合率高,能快速鑒別尿液中紅細(xì)胞是否來(lái)源于腎臟,已越來(lái)越廣泛地被應(yīng)用于臨床腎病篩查。尿液中紅細(xì)胞免疫球和紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)聯(lián)合應(yīng)用,對(duì)腎臟疾病,特別是腎小球腎炎有重要提示作用。