楊小峰 閆素月 郭青枝

摘要：本實驗比較黑五類中花青素的含量，采用pH為1.0的甲醇溶液進行花青素的提取，然后用比色法對花青素的含量在513nm的波長處進行定量測定分析。

關鍵詞：黑五類;花青素;含量比較

本研究中的黑五類指的是黑豆、黑小米、黑玉米、黑枸杞和黑瑪卡。黑色食品的功效有：1.幫助人體清掃自由基，加強生理機能。2.增強腎功能，滋陰壯陽。3.降低膽固醇等。同時，我們還可以利用黑色食品在食療、保健等方面的功能，保證黑色食品的營養(yǎng)價值以及商業(yè)價值，進而在黑色食品的藥用價值和美容價值方面進行科學系統(tǒng)的開發(fā)，確保其能夠作為具有較高營養(yǎng)價值的食品得到來自各地用戶的良好評價。黑豆、黑芝麻等黑色食物是很好的益氣活血的補腎食物，它們的抗氧化功能得益于豐富的花青素含量。

1. 材料與方法

1.1實驗材料

黑豆、黑小米、黑玉米、黑枸杞以及黑瑪卡（購自忻州市靜樂縣）。

1.2 主要儀器與試劑

1.2.1主要儀器

UV-2102C型的紫外可見分光光度計，由上海光譜有限公司生產(chǎn);CJM420粉碎機，由濰坊匯鑫環(huán)保粉體設備有限公司生產(chǎn);TD1102型電子天平，原產(chǎn)地為天津市天馬儀器廠;KH-45A型電熱恒溫干燥箱，由康恒儀器有限公司生產(chǎn)。

1.2.2 試劑

甲醇、濃鹽酸、氯化矢車菊素

甲醇標準使用液：取500mL醇溶液置于容量瓶中，加入濃鹽酸（約4-5滴），調(diào)PH值為4.0。

氯化矢車菊素標準液：稱取0.0025g氯化矢車菊素溶于pH值為1.0的甲醇標準使用液中，定容于500mL的容量瓶中。

氯化矢車菊素標準使用液：分別稱取1mL、2mL、3mL、4mL、5m氯化矢車菊素標準液定容于50mL的容量瓶中，得到1.0?g/mL、2.0?g/mL、3.0?g/mL、4.0?g/mL、5.0?g/mL的使用液。

1.3 試驗方法

1.3.1 確定花青素最大吸收波長

取氯化矢車菊素標準10mL，以pH=1.0的甲醇標準使用溶液作為對照液，在500-550nm波長范圍內(nèi)，進行紫外可見分光光度分析。經(jīng)實驗證明，花青素在512nm處具有最大吸收波長。

1.3.2 環(huán)境pH的選擇

黑五類花青素提取液在pH=1.0時，其吸光度會隨著時間的推移而穩(wěn)定，當達到115min以后，其吸光度基本保持不變。

1.3.3 標準曲線的繪制

分別移取1mL、2mL、3mL、4mL、5mL標準液，定容于50mL的容量瓶中，得到1.0?g/mL、2.0?g/mL、3.0?g/mL、4.0?g/mL、5.0?g/mL的氯化矢車菊素溶液，在波長為513nm處測其吸光值（以pH值為1.0的無水乙醇溶液為空白對照），繪制標準曲線。

1.3.4 黑五類中的花青素含量的測定

花青素的提?。河秒娮犹炱蕉糠Q取5g的黑豆，在100℃-105℃的恒溫干燥箱中烘干，用粉碎機粉碎以后過100目的篩，根據(jù)料液1：20的比例再把酸性甲醇溶液加入其中，保持溫度為50℃，將其浸泡過夜，然后將所得浸泡液進行仔細過濾，當黑豆皮的浸提液繼續(xù)過濾得到的液體是無色時停止，在抽濾后用移液管精密吸取1mL的樣品浸提液，滴入到1000mL的棕色容量瓶中，再用1%（體積分數(shù)）的鹽酸甲醇溶液定容到刻度線位置。

樣品中的花青素含量的測定：取花青素樣品溶液1mL滴于50mL的棕色容量瓶中，加入pH為1的甲醇溶液定容至刻度線處。再用移液管從50mL容量瓶中準確量取1mL樣品于比色皿中，按制作標準曲線的步驟進行操作，最后在紫外可見分光光度計513nm處測定其吸光值A。

2. 分析

原花青素自身具有許多的藥理作用，如具有抵抗被外界氧化的特點、酶抑制的活性及保護血管、減輕炎癥等，同時還有降低腫瘤發(fā)病率以及保護神經(jīng)的效果，它對于自由基也有明顯的作用。黑色食物如黑小米、黑豆等，因為含有豐富的花青素，因而它們才呈現(xiàn)黑色，隨著花青素的含量增多，這些食物的顏色也越來越深。生物色素、花青素等一些抗氧化劑含量較多的食品自然載體是正黑色食品，這些食品對人類的健康以及壽命的延伸都有極大的幫助，因而應當被大力推廣。

3. 討論與結(jié)論

3.1討論

在實驗中，所測得的數(shù)據(jù)有一定的偏差，造成這一現(xiàn)象的因素可能是：①與粉碎程度不夠、浸提的時間不夠長、花青素的浸提不充分有關。②準備材料沒能及時進行處理，導致原花青素具有一定程度的氧化損失。

3.2 結(jié)論

據(jù)本文實驗所測定的數(shù)據(jù)可知，文中所說的黑五類花青素含量由高到低為：黑枸杞>黑豆>黑玉米>黑小米>黑瑪卡。