張 蕊 張 瑾 安 娜

（首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀(jì)壇醫(yī)院婦產(chǎn)科，北京100038）

卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)致死率最高的惡性腫瘤，上皮性卵巢癌（epithelial ovarian carcinoma，EOC）是最常見(jiàn)的病理類(lèi)型[1］。由于卵巢癌發(fā)病隱匿，且早期無(wú)明顯特異性臨床癥狀，故多數(shù)患者就診時(shí)已發(fā)展為中晚期。盡管近年手術(shù)聯(lián)合化療的治療方案顯著提高了臨床療效，但卵巢癌總體療效及預(yù)后仍不理想[2］。半乳糖凝集素-3（galectin-3，Gal-3）是β-糖苷凝聚家族成員，廣泛存在于生物體內(nèi)，參與調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡、胚胎發(fā)育、免疫及腫瘤發(fā)生發(fā)展等多種生理病理過(guò)程[3］。近年研究發(fā)現(xiàn)，Gal-3在乳腺癌、黑色素瘤、肺癌等多種腫瘤中表達(dá)顯著增加[4-6］。研究報(bào)道，Gal-3在EOC腫瘤組織中呈顯著高表達(dá)，且與病理類(lèi)型、化療敏感性及預(yù)后相關(guān)[7-9］。自然殺傷（natural killer，NK）細(xì)胞是先天免疫系統(tǒng)的效應(yīng)淋巴細(xì)胞，也是體內(nèi)抵御腫瘤的第一道防線。NK細(xì)胞主要通過(guò)其表面的激活受體和抑制性受體與靶細(xì)胞表面的相應(yīng)配體結(jié)合，介導(dǎo)活化性或抑制性信號(hào)發(fā)揮其免疫功能[10］。既往研究證實(shí)，EOC患者NK細(xì)胞免疫功能明顯受損，其中激活受體NKp30表達(dá)顯著降低[11］。最新研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌及乳腺癌細(xì)胞中Gal-3可作為NKp30的抑制性配體抑制NK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，從而促進(jìn)腫瘤免疫逃逸[12］。EOC中高表達(dá)的Gal-3能否以同樣的作用機(jī)制調(diào)控NK細(xì)胞功能尚未闡明。本研究通過(guò)檢測(cè)Gal-3在EOC細(xì)胞系中的表達(dá)及分布，探究其對(duì)NK細(xì)胞激活受體NKp30的作用，以闡明其對(duì)NK細(xì)胞免疫功能的影響。

1 材料與方法

1.1 材料 正常卵巢上皮細(xì)胞IOSE80與EOC細(xì)胞系Hey、ES2及與SKOV3（南京凱基生物公司細(xì)胞庫(kù)）；RPMI1640、DMEM/HG、0.25%胰蛋白酶（美國(guó)Hyclone公司）；Trizol試劑（美國(guó)Invitrogen公司）；NK細(xì)胞培養(yǎng)基（美國(guó)Cell Gro公司）；胎牛血清（FBS）、青鏈霉素混合液（100 U/ml，杭州四季青生物公司）；人重組可溶性Gal-3（Gal-3）、NKp30-Fc融合蛋白、Gal-3 ELISA檢測(cè)試盒（美國(guó)R＆D公司）；淋巴細(xì)胞分離液（美國(guó)Sigma公司）；MACS免疫磁珠分選柱、MACS緩沖液、CD56+CD16?磁珠分選試劑盒（德國(guó)Miltenyi biotec公司）；兔抗人CD107a-PerCP cy5.5、兔抗人CD56-FITC、CD3-APC、NKp30-PE、小鼠抗人IgG-FITC（美國(guó)Biolegend）；NK細(xì)胞殺傷活性檢測(cè)試劑盒（美國(guó)Promega公司）；PCR試劑盒（日本TaKaRa）；大鼠抗人NKp30、Gal-3、GAPDH單克隆抗體（美國(guó)Affinity公司）；辣根過(guò)氧化酶（HRP）標(biāo)記的山羊抗大鼠IgG（廣州晶彩生物公司）；PCR引物由上海生工合成，其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 方法

1.2.1 NK細(xì)胞分離、純化及鑒定 選取我院體檢科健康體檢者外周靜脈血分離NK細(xì)胞，800 g離心10 min，收集底層沉淀血細(xì)胞。根據(jù)淋巴細(xì)胞分離液說(shuō)明書(shū)，采用Ficoll不連續(xù)密度梯度分離法獲得人外周血單個(gè)核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMC），PBS洗滌，按照NK細(xì)胞免疫磁珠分選系統(tǒng)操作說(shuō)明，PBS重懸，計(jì)數(shù)，取20 μl（約1×107個(gè)）細(xì)胞懸液，加入抗CD3免疫磁珠，4℃孵育15 min，加入2 ml PBS離心洗滌細(xì)胞，定容至500 μl，緩慢過(guò)MACS層析柱，沖洗柱子，收集未結(jié)合細(xì)胞（即CD3?細(xì)胞），PBS洗滌，重復(fù)上述步驟，加入抗CD56免疫磁珠，過(guò)柱，收集結(jié)合于層析柱的細(xì)胞，即為CD3?CD56+NK細(xì)胞，PBS重懸，離心洗滌，計(jì)數(shù)，取部分NK細(xì)胞采用CD56-FITC、CD3-APC流式抗體進(jìn)行鑒定。NK細(xì)胞于NK細(xì)胞培養(yǎng)基中（37℃、5%CO2）培養(yǎng)。

1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染 IOSE80與Hey、ES2及SKOV3細(xì)胞系均采用含10%FBS、1%青鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)液于37℃、5%CO2培養(yǎng)，待細(xì)胞生長(zhǎng)至80%～90%融合時(shí)采用0.25%胰酶消化傳代。轉(zhuǎn)染前24 h，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期SKOV3細(xì)胞進(jìn)行常規(guī)消化，計(jì)數(shù)，以1×106個(gè)/ml接種于6孔板，待細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合，根據(jù)LipofectamineTM3000說(shuō)明書(shū)將si-Gal-3、si-NC轉(zhuǎn)染至SKOV3細(xì)胞，37℃、5%CO2培養(yǎng)8 h，檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.2.3 免疫共沉淀實(shí)驗(yàn) 收集上述分離純化的NK細(xì)胞，采用含蛋白酶抑制的細(xì)胞裂解液RIPA buffer于冰上裂解，4℃、1000 g離心30 min，取50 μl上清（即NK細(xì)胞裂解物，NK lysate）與20 μg/ml Gal-34℃預(yù)處理2 h，制備N(xiāo)K lysate+Gal-3樣品。將終濃度為10 μg/ml的抗NKp30或Gal-3抗體1 μl分別加入NK lysate+Gal-3樣品，4℃孵育過(guò)夜。次日取10 μl protein A瓊脂糖磁珠，RIPA buffer洗滌3次，800 g離心3 min，將其加入與抗體孵育過(guò)夜的NK lysate+Gal-3樣品中，4℃孵育4 h，使抗體與磁珠充分偶聯(lián)。4℃、300 g離心3 min，取底層沉淀磁珠，RIPA buffer充分洗滌，加入20 μl 2×SDS上樣緩沖液，沸水中加熱變性10 min，進(jìn)行Western blot實(shí)驗(yàn)。

1.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)NK細(xì)胞表面蛋白表達(dá)收集NK細(xì)胞，分別置于終濃度為10 μg/ml的3%BSA或Gal-34℃孵育30 min，PBS充分洗滌，加入Gal-3-PE或NKp30-FITC 4℃孵育30 min，300目濾膜過(guò)濾，進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)：收集細(xì)胞，采用含1%多聚甲醛、3%BSA的PBS冰上處理30 min，PBS充分洗滌，采用含3%BSA的破膜液4℃孵育30 min，加入終濃度為10 μg/ml的Gal-3-FITC，其余步驟同前。檢測(cè)不同處理?xiàng)l件下NK細(xì)胞殺傷SKOV3細(xì)胞時(shí)NK細(xì)胞表面CD107表達(dá)：預(yù)先將NK細(xì)胞分別置于終濃度為10 μg/ml的3%BSA或Gal-3或Gal-3+NKp30-Fc，4℃孵育30 min，PBS充分洗滌，按一定比例加入SKOV3細(xì)胞進(jìn)行NK細(xì)胞殺傷活性檢測(cè)，收集所有細(xì)胞，計(jì)數(shù)，加入CD3-APC、CD56-FITC與CD107a-PerCP cy5.5，其余步驟同前。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.2.5 ELISA取約5×104個(gè)SKOV3細(xì)胞接種于96孔板，取上清，采用ELISA檢測(cè)試劑盒測(cè)定上清中Gal-3表達(dá)（6 h、12 h、24 h、36 h）。

1.2.6 LDH釋放法檢測(cè)NK細(xì)胞殺傷活性 取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的SKOV3細(xì)胞（靶細(xì)胞），以NK細(xì)胞為效應(yīng)細(xì)胞。按照NK細(xì)胞殺傷活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明進(jìn)行LDH釋放實(shí)驗(yàn)：將分離純化的NK細(xì)胞與SKOV3細(xì)胞分別調(diào)整至5×104個(gè)/孔與1×104個(gè)/孔，接種至96孔板作為實(shí)驗(yàn)孔，設(shè)置分別含1×104個(gè)/孔或5×104個(gè)/孔的靶細(xì)胞或效應(yīng)細(xì)胞作為靶細(xì)胞或效應(yīng)細(xì)胞自發(fā)釋放孔，另設(shè)含1×104個(gè)/孔的靶細(xì)胞培養(yǎng)液（孵育結(jié)束45 min前加入10 μl lysis solution）作為靶細(xì)胞最大釋放孔。上述每孔均含10%FBS RPMI1640培養(yǎng)液100 μl，37℃、5%CO2恒溫培養(yǎng)箱共培養(yǎng)4 h，收集上清。取適量上清，加入底物（1∶1）室溫避光反應(yīng)30 min，加入等體積終止液于490 nm處檢測(cè)各孔吸光度（OD）。以上各組均設(shè)5個(gè)復(fù)孔，NK細(xì)胞殺傷活性（%）=（OD實(shí)驗(yàn)孔?OD效應(yīng)細(xì)胞自發(fā)釋放?OD靶細(xì)胞自發(fā)釋放）/（OD靶細(xì)胞最大釋放?OD靶細(xì)胞自發(fā)釋放）×100%。檢測(cè)封閉NKp30后對(duì)NK細(xì)胞殺傷活性的影響時(shí)，預(yù)先將NK細(xì)胞置于終濃度為10 μg/ml的3%BSA或Gal-3或Gal-3+NKp30-Fc 4℃孵育30 min，再將NK細(xì)胞與靶細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)，按上述方法進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.7 Western blot采用RIPA裂解液及蛋白酶抑制劑于冰上提取待測(cè)細(xì)胞總蛋白，BCA法進(jìn)行蛋白定量，按1∶4向上清中加入5×上樣緩沖液，沸水中加熱變性10 min，取35 μg蛋白進(jìn)行SDS-PAGE電泳，濕轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)至PVDF膜，5%脫脂牛奶室溫封閉2 h，分別加入Gal-3（1∶300）、NKp30（1∶300）、GAPDH（1∶2000）一抗，4℃搖床孵育過(guò)夜，TBST清洗3次，5 min/次，以HRP標(biāo)記的二抗（1∶5000）室溫孵育1 h，TBST清洗3次，5 min/次，在載有蛋白條帶的PVDF膜上均勻滴加ECL發(fā)光液，凝膠成像儀曝光拍照，Image J軟件測(cè)定條帶灰度值，以目的蛋白與內(nèi)參GAPDH比值作為其相對(duì)含量，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以±s表示。多組間比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA），兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Gal-3在EOC細(xì)胞系中的表達(dá) Western blot、流式細(xì)胞術(shù)及ELISA檢測(cè)正常卵巢上皮細(xì)胞IOSE80與EOC細(xì)胞系Hey、ES2及與SKOV3中Gal-3蛋白表達(dá)及分布，結(jié)果顯示，與IOSE80細(xì)胞相比，Gal-3在EOC細(xì)胞系中的表達(dá)均顯著增加（P<0.01，圖1A），取Gal-3蛋白水平較高的SKOV3細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示，Gal-3蛋白主要分布于SKOV3細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)，少量表達(dá)于細(xì)胞膜，ELISA結(jié)果表明，隨細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，Gal-3蛋白含量隨之增加，在24 h時(shí)達(dá)到最高（P<0.05，圖1B、C）。

圖1 Gal-3在EOC細(xì)胞系中的表達(dá)Fig.1 Expression of Gal-3 in EOC cell lines

2.2 Gal-3特異性結(jié)合于NK細(xì)胞NKp30受體 流式細(xì)胞術(shù)鑒定分離所得NK細(xì)胞純度，結(jié)果顯示，CD3?CD56+NK細(xì)胞純度達(dá)80%以上（圖2A）；流式細(xì)胞術(shù)與免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與BSA處理的NK細(xì)胞相比，加入Gal-3蛋白可顯著降低NK細(xì)胞表面NKp30受體表達(dá)（P<0.05），且Gal-3可與NK細(xì)胞表面NKp30受體特異性結(jié)合（圖2B、C）。

圖2 Gal-3與NK細(xì)胞表面NKp30受體特異性結(jié)合Fig.2 Specific binding of GAL-3 to NKp30 receptor on NK cell surface

2.3 Gal-3通過(guò)NKp30影響NK細(xì)胞對(duì)EOC細(xì)胞的殺傷作用 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同處理情況NK細(xì)胞膜表面CD107a表達(dá)，結(jié)果顯示，Gal-3處理后，NK細(xì)胞表面CD107a表達(dá)較BSA與Gal-3+NKp30-Fc處理后顯著降低（P<0.05），BSA與Gal-3+NKP30-Fc組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。NK細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)結(jié)果同樣證實(shí)Gal-3預(yù)處理后，NK細(xì)胞殺傷活性較BSA與Gal-3+NKp30-Fc處理后的NK細(xì)胞顯著降低（P<0.05），BSA組與Gal-3+NKp30組細(xì)胞殺傷活性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05，圖3A、B）。

圖3 Gal-3抑制NKp30介導(dǎo)的NK細(xì)胞對(duì)EOC細(xì)胞的殺傷作用Fig.3 Gal-3 inhibits NK cells mediated by NKp30 to kill EOC cells

2.4 Gal-3作為抑制配體阻斷NK細(xì)胞對(duì)EOC細(xì)胞的殺傷活性 siRNA沉默SKOV3細(xì)胞Gal-3表達(dá)，Western blot結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染si-Gal-3后SKOV3細(xì)胞Gal-3蛋白表達(dá)顯著降低（P<0.05，圖4A）。NK細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與轉(zhuǎn)染si-NC的SKOV3細(xì)胞相比，沉默Gal-3蛋白后NK細(xì)胞對(duì)其殺傷能力明顯增強(qiáng)（P<0.05，圖4B）。

圖4 抑制EOC細(xì)胞中Gal-3表達(dá)顯著促進(jìn)NK細(xì)胞對(duì)其殺傷活性Fig.4 Inhibition of Gal-3 expression in EOC cell signifi?cantly promoted NK cells'cytotoxic activity against EOC cellNote：A.Gal-3 protein expression in SKOV3 cells detected by Western blot；B.NK cells cytotoxicity to SKOV3 cells transfected with si-Gal-3 detected by LDH release method.Compared with si-NC group，*.P<0.05.

3 討論

半乳糖凝集素家族是一類(lèi)對(duì)β-半乳糖糖苷具有特殊親和力，且在碳水化合物識(shí)別區(qū)域具有相似氨基酸序列的蛋白，而Gal-3是該家族中唯一的嵌合型代表，不僅具有相似的碳水化合物識(shí)別區(qū)域，還具有1個(gè)富含脯氨酸與甘氨酸的NH2端[3］。由于Gal-3上述特殊結(jié)構(gòu)，研究者對(duì)其分子作用尤為重視。既往研究發(fā)現(xiàn)，Gal-3廣泛存在于肺、腎臟、乳腺、皮膚、前列腺及卵巢等多種器官與組織中，且Gal-3在人體多個(gè)系統(tǒng)腫瘤中均呈異常高表達(dá)，進(jìn)一步研究證實(shí)，Gal-3與非小細(xì)胞肺癌、乳腺癌、黑色瘤等腫瘤細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移及患者預(yù)后密切相關(guān)[7-9］。KIM等[7］研究發(fā)現(xiàn)，Gal-3在EOC組織中顯著高表達(dá)，且免疫組織化學(xué)染色證實(shí)其主要表達(dá)于癌細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)，同時(shí)EOC患者高表達(dá)Gal-3與更短的無(wú)進(jìn)展生存期（progression-free survival，PFS）相關(guān)。Gal-3在EOC中的表達(dá)較正常卵巢癌組織明顯增加，且與患者病理類(lèi)型、鉑敏感性相關(guān)，同時(shí)患者分期越晚，Gal-3表達(dá)越高，提示Gal-3可能參與EOC發(fā)生發(fā)展，進(jìn)一步體外研究發(fā)現(xiàn)，下調(diào)EOC細(xì)胞系中Gal-3表達(dá)可通過(guò)調(diào)控細(xì)胞周期蛋白CyclinD1、基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-9及E-鈣黏蛋白表達(dá)抑制癌細(xì)胞增殖、遷移及侵襲[8-9，13］。

免疫系統(tǒng)中，最初發(fā)現(xiàn)Gal-3可表達(dá)于巨噬細(xì)胞，隨著研究深入，Gal-3已被證實(shí)在樹(shù)突狀細(xì)胞、肥大細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞及NK細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞中表達(dá)，進(jìn)一步研究表明其在先天性免疫與適應(yīng)性免疫調(diào)控中具有重要地位[14］。大量研究表明，免疫細(xì)胞中Gal-3可與不同分子相互作用調(diào)控免疫細(xì)胞黏附、活化、凋亡、趨化及細(xì)胞因子分泌等多個(gè)生理病理過(guò)程[15］。NK細(xì)胞是先天免疫應(yīng)答系統(tǒng)中的重要功能執(zhí)行細(xì)胞，發(fā)揮類(lèi)似CD8+細(xì)胞毒性T細(xì)胞功能，可直接殺傷感染病原體細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞，而NK細(xì)胞無(wú)需抗原提呈，通過(guò)自身表面激活或抑制性受體識(shí)別環(huán)境中的可溶性配體，如細(xì)胞因子或細(xì)胞在病理?xiàng)l件下呈現(xiàn)的表面抗原分子，并通過(guò)整合所接受到的活化及抑制性信號(hào)發(fā)揮相應(yīng)免疫功能[16］。NKp30是由位于人類(lèi)6號(hào)染色體的1C7基因所編碼的分子量為30 kD的蛋白，作為激活性受體選擇性地表達(dá)于所有NK細(xì)胞表面[17］。最新研究表明，宮頸癌Hela細(xì)胞及乳腺癌MDA-MB-435細(xì)胞中Gal-3可作為NKp30的可溶性抑制性配體阻礙NK細(xì)胞免疫功能，采用慢病毒過(guò)表達(dá)或下調(diào)這2種腫瘤細(xì)胞中Gal-3表達(dá)可促進(jìn)或抑制NK細(xì)胞對(duì)其的殺傷作用，且在裸鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)[12］。本研究通過(guò)Western blot檢測(cè)Gal-3在EOC細(xì)胞系Hey、ES2及與SKOV3中的表達(dá)，結(jié)果表明其在EOC細(xì)胞系的表達(dá)較正常卵巢上皮細(xì)胞顯著增加，選擇EOC細(xì)胞系中表達(dá)水平較高的SKOV3細(xì)胞進(jìn)行研究。既往研究證實(shí)，Gal-3蛋白主要分布于EOC細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)，且EOC患者血清中Gal-3表達(dá)顯著增加，提示在卵巢癌細(xì)胞中高表達(dá)的Gal-3可能以外分泌方式釋放至周?chē)h(huán)境[13］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果同樣證實(shí)Gal-3主要表達(dá)于SKOV3細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)，且能夠以外分泌方式釋放至周?chē)h(huán)境。分離純化正常人外周血中NK細(xì)胞，鑒定純度后，采用人重組可溶性Gal-3蛋白處理NK細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)及免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)Gal-3可與NK細(xì)胞表面NKp30受體結(jié)合。課題組進(jìn)一步采用Gal-3或Gal-3與NKp30-Fc處理NK細(xì)胞觀察Gal-3是否能夠通過(guò)NKp30影響NK細(xì)胞對(duì)SKOV3細(xì)胞的殺傷作用，結(jié)果表明，Gal-3預(yù)處理后，NK細(xì)胞CD107a表達(dá)及對(duì)SKOV3細(xì)胞的殺傷作用顯著降低，預(yù)先采用NKp30-Fc融合蛋白封閉Gal-3，NK細(xì)胞CD107a表達(dá)及殺傷功能則不受影響。CD107a是NK細(xì)胞或T細(xì)胞被抗原特異性細(xì)胞活化后所表達(dá)的與脫顆粒過(guò)程密切相關(guān)的分子表型，脫顆粒則是穿孔素、顆粒酶依賴(lài)性靶細(xì)胞殺傷過(guò)程中的關(guān)鍵步驟，故CD107a常作為NK細(xì)胞脫顆粒的標(biāo)記分子[18］。進(jìn)一步采用siRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)沉默SKOV3細(xì)胞Gal-3表達(dá)，并檢測(cè)NK細(xì)胞對(duì)轉(zhuǎn)染后的卵巢癌細(xì)胞殺傷活性，結(jié)果顯示，下調(diào)癌細(xì)胞Gal-3表達(dá)可顯著促進(jìn)NK細(xì)胞對(duì)其的殺傷能力，進(jìn)一步證實(shí)Gal-3可作為抑制性配體下調(diào)NKp30所介導(dǎo)的NK細(xì)胞對(duì)卵巢癌細(xì)胞的免疫作用。

綜上，本研究發(fā)現(xiàn)，高表達(dá)于卵巢癌細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中的Gal-3能夠以外分泌方式被釋放至周?chē)h(huán)境，并作為NK細(xì)胞表面受體NKp30的抑制性配體抑制NK細(xì)胞免疫功能，從而促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞免疫逃逸。本研究為Gal-3在卵巢癌免疫調(diào)節(jié)中的作用機(jī)制提供了新見(jiàn)解，Gal-3是否通過(guò)其他途徑調(diào)控免疫系統(tǒng)有待進(jìn)一步研究。