黎龍

廣州檢驗檢測認(rèn)證集團(tuán)有限公司 廣東廣州 510000

食品安全關(guān)鍵在于定量檢測分析食品添加劑。目前食品生產(chǎn)過程中主要添加劑分為防腐劑、甜味劑、色素等種類，其中防腐劑主要包括山梨酸和苯甲酸，甜味劑主要包括糖精鈉和乙?；前匪徕?，色素主要包括檸檬黃、莧菜紅、靛藍(lán)、胭脂紅、日落黃、誘惑紅、亮藍(lán)和赤蘚紅，這十二種添加劑也是目前監(jiān)督抽檢最常檢測的類型。本文主要采用最常用的高效液相色譜法檢測果汁飲料中12種添加劑的含量，不僅操作簡單，而且結(jié)果準(zhǔn)確，能有效檢測多種食品添加劑的含量[1]。

1 材料與方法

1.1 主要材料與試劑

從國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心購置的檸檬黃、莧菜紅、日落黃、胭脂紅、亮藍(lán)、靛藍(lán)、誘惑紅、赤蘚紅、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、乙?；前匪徕浀榷喾N標(biāo)準(zhǔn)液。作為色譜純的甲醛，作為分析純的乙酸銨與氨水，標(biāo)準(zhǔn)為0.45μm的微孔濾膜：聚四氟乙烯。

1.2 主要儀器與設(shè)備

配備有紫外檢測器的高效液相色譜儀Agilent1100，臺式高速離心機(jī)，超聲波清洗儀，旋渦混合器，規(guī)格為6mL/500mg的固相萃取小柱。

1.3 樣品

從超市購買的果汁飲料。

1.4 色譜條件

將色譜柱調(diào)整為4.6mm×250mm，5μm，并將色譜柱溫度調(diào)整到20℃左右。A流動相為甲醇，B流動相為密度為0.02mol/L并添加5%甲醛的乙酸銨溶液，流速保持在1mL/min，進(jìn)樣量為10μL。選擇紫外線為檢測器，檢測波長分別為色素254nm（其中誘惑紅500nm、亮藍(lán)630nm）、山梨酸和苯甲酸230nm、糖精鈉和乙?；前匪徕?14nm。

1.5 樣品處理

量取5g液體樣品置于100ml的容量瓶，添加25ml比例為9：0.5：1的乙醇/氨水/水混合溶液，用渦旋混合器渦旋處理1分鐘后在超聲提取中處理30分鐘，剩余的殘渣重復(fù)進(jìn)行2次提取，將提取液合并后進(jìn)行旋蒸定容，得到10ml，再用濾膜進(jìn)行過濾，取5ml過濾液過OasisWAX柱，先以2%甲酸清洗10mL清洗，再用5%氨水甲醇溶液5mL洗脫，注入氮氣進(jìn)行氮吹，使液體濃縮到1mL后再進(jìn)樣[2]。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線及檢出限

將標(biāo)準(zhǔn)品分別調(diào)配成0.02mg/mL、0.05mg/mL、0.08mg/mL、以及0.1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，對樣品進(jìn)行三次檢測后取平均值，再進(jìn)樣分析，以峰面積為Y軸、時間為X軸，繪制出色譜圖，在得到標(biāo)準(zhǔn)坐標(biāo)后求出線性回歸方程與相關(guān)系數(shù)。檢測色素時選擇254nm，而亮藍(lán)是630nm、誘惑紅為500nm，都選擇的可見波長，這主要是因為兩者在紫外線下表現(xiàn)出的靈敏度不高，在這個波長段有比較高的響應(yīng)值，而為了對檢測方法進(jìn)行簡化，綜合權(quán)衡后適當(dāng)犧牲部分化合物的響應(yīng)值，確定波長為243nm。而在檢測山梨酸、苯甲酸時選擇230nm，檢測糖精鈉、乙?；前匪徕洉r選擇214nm，主要是因為在這個波長段能夠保持基線的平穩(wěn)，檢出限能夠充分滿足檢測的實際需求[3]。

2.2 實際樣品中回收率的測定

取不含本文添加劑的果汁飲料5個進(jìn)行樣品檢測，用本文中的方法取重5g，添加標(biāo)準(zhǔn)品溶液，分別調(diào)制為12種添加劑濃度分別為0.02、0.05、0.80、0.10mg/mL的溶液，以此為加標(biāo)樣品，按照樣品處理方法處理后進(jìn)行檢測，結(jié)果如下表。當(dāng)飲料基質(zhì)比較復(fù)雜時，每一種著色劑都有著自己的性質(zhì)，彼此間差異比較大，無法采用一種方法同時完成提取凈化操作。本文針對果汁飲料的基質(zhì)設(shè)計了前期處理方案，雖然隨著基質(zhì)變化在回收率上存在不同，但是實現(xiàn)了準(zhǔn)確定量，檢測迅速，重現(xiàn)性好。

表1 12種食品添加劑樣品回收率的測定比較結(jié)果

3 結(jié)語

本研究通過合理的前期樣品處理技術(shù)，科學(xué)選擇色譜柱與流動相，不斷優(yōu)化色譜條件，針對果汁飲料中添加劑的檢測建立了系統(tǒng)完整的檢測方法，不僅能夠有效分離飲料中影響添加劑分析的干擾成分，還簡化了前期樣品處理過程，得到的數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確，保證了重現(xiàn)性，不僅回收率高，檢出限也低，能夠有效應(yīng)用到果汁飲料添加劑檢測中去。