陳自洪 李春苑 楊 華 鄒 彥 吳 卓 周 玲 丘 映 許常龍

(廣西南寧市第二人民醫(yī)院生殖中心，南寧市 530031，電子郵箱：chenzihong1979@foxmail.com)

經(jīng)過40多年的發(fā)展，輔助生殖技術(shù)得到了長足的發(fā)展，是治療人類不孕不育癥的有效手段。然而，整個輔助生殖治療過程時間長、環(huán)節(jié)多，每一個細(xì)節(jié)都有可能影響整個治療周期的臨床效果。胚胎移植作為其中的一個重要步驟，對治療成功率的影響不容忽視。有研究表明，經(jīng)胚胎膠處理后再行胚胎移植，能顯著地提高治療的臨床結(jié)局[1-8]。但也有研究顯示，胚胎膠對促進(jìn)胚胎移植臨床治療的效果有限[9-11]。為此，本研究回顧分析我中心實(shí)施的670個囊胚期胚胎冷凍解凍移植周期的臨床資料，探討囊胚冷凍解凍移植中使用胚胎膠與常規(guī)使用G2培養(yǎng)液作為胚胎移植液的臨床效果是否有差異。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集我中心2017年4月至2018年8月實(shí)施的670個囊胚玻璃化冷凍解凍移植周期的臨床資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡≤37歲；胚胎移植日子宮內(nèi)膜為A型或B型，且厚度≥8.0 mm；移植周期≤3個；解凍移植優(yōu)質(zhì)囊胚≤2個。剔除子宮肌瘤、子宮畸形、子宮內(nèi)膜息肉、輸卵管積水、子宮內(nèi)膜異位癥等疾病患者。其中，350個周期使用胚胎膠(瑞典Vitrolife公司)作為移植液(試驗(yàn)組)，320個周期使用G2培養(yǎng)液(瑞典Vitrolife公司)作為移植液(對照組)。

1.2 治療方法

1.2.1 子宮內(nèi)膜準(zhǔn)備：常規(guī)方法進(jìn)行內(nèi)膜準(zhǔn)備[12]。

1.2.2 囊胚解凍與移植：囊胚玻璃化冷凍與解凍均采用加拿大捷鷹公司的試劑盒，操作嚴(yán)格遵循說明書進(jìn)行。解凍后用G2培養(yǎng)液培養(yǎng)2 h，如果囊胚腔恢復(fù)>50%評估為復(fù)蘇成功，可以移植。正式移植前30 min將囊胚轉(zhuǎn)移到含有G2培養(yǎng)液或胚胎膠的移植皿，然后在B超引導(dǎo)下進(jìn)行移植。胚胎移植管為COOK公司生產(chǎn)。

1.2.3 臨床妊娠標(biāo)準(zhǔn)[12]：囊胚解凍移植后的第14天，尿檢或抽血檢查人絨毛膜促性腺激素陽性，并在移植后第28天超聲檢查顯示宮內(nèi)有妊囊和原始心管搏動。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計量資料以(x±s)表示，組間比較采用t′檢驗(yàn)；計數(shù)資料以例數(shù)(百分比)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

兩組女方年齡、助孕次數(shù)、內(nèi)膜厚度和移植胚胎數(shù)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)；試驗(yàn)組的臨床妊娠率和種植率雖略高于對照組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。見表1。

表1 兩組臨床資料及臨床結(jié)局的比較

3 討 論

為了提高不孕癥治療的成功率，各國科研人員和醫(yī)療工作者進(jìn)行了很多研究，而用于胚胎移植的培養(yǎng)液是其中的一個焦點(diǎn)問題。在胚胎移植液中加入黏附成分的目的是提高胚胎在子宮中種植的概率，從而提高妊娠率和健康嬰兒出生率。透明質(zhì)酸是D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺組成的雙糖單位玻尿酸，又稱糖醛酸，基本結(jié)構(gòu)是由兩個雙糖單位D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺組成的大型多糖類，是哺乳類動物卵泡、輸卵管及子宮液中的一種正常成分[13]。透明質(zhì)酸提高細(xì)胞與細(xì)胞或細(xì)胞與間質(zhì)之間的粘連，研究表明在小鼠中胚胎著床時透明質(zhì)酸合成急劇增加，第2天降低近基礎(chǔ)水平[14]。在小鼠模型中，Gardner等[15]發(fā)現(xiàn)使用富含透明質(zhì)酸的移植液可以提高胚胎的種植率和胎兒的發(fā)育水平。2002年，Schoolcraft等[1]首先報告了提高培養(yǎng)液中的透明質(zhì)酸能提高種植率。Urman等[2]開展了大樣本臨床研究，發(fā)現(xiàn)第3天和第5天新鮮胚胎經(jīng)高濃度透明質(zhì)酸培養(yǎng)液處理后，臨床妊娠率和種植率顯著提高，特別是對于35歲以上患者和之前治療失敗的患者效果更明顯。有研究表明，對于反復(fù)種植失敗的不孕患者，使用富含透明質(zhì)酸的胚胎膠有助于提高臨床妊娠率和種植率[16]。在新鮮周期、自然周期凍融胚胎移植或激素替代準(zhǔn)周期凍融胚胎移植中，使用富含透明質(zhì)酸的胚胎膠移植液較不使用胚胎膠的移植液可明顯地提高妊娠率(37.5%、10.9%；31.4%、10.0%；41.2%、15.7%)[17]。然而，也有不少文獻(xiàn)表明，胚胎膠提高臨床妊娠率的效果并不明顯。Safari等[18]認(rèn)為，常規(guī)使用胚胎膠作為移植液對改善卵裂期胚胎移植的臨床效果沒有幫助。劉輝等[11]使用G1、G2培養(yǎng)液作為胚胎移植液同樣可獲得較好的臨床結(jié)局，并認(rèn)為與胚胎膠相比，G2培養(yǎng)液作為D3胚胎移植液在提高胚胎活產(chǎn)率方面更具有優(yōu)勢。此外，對于反復(fù)種植失敗患者，使用胚胎膠移植載體對妊娠結(jié)局的影響可能也不大[10]。本研究結(jié)果表明，在囊胚冷凍解凍移植周期中，使用胚胎膠作為移植液的患者臨床妊娠率和種植率較對照組患者雖然略有增高，但差異并無統(tǒng)計學(xué)意義。其中可能的原因?yàn)椋耗遗咂诘呐咛ヅc子宮的生理環(huán)境更為同步，囊胚移植較D3卵裂期胚胎更容易著床，高濃度的透明質(zhì)酸是非必需的。劉輝等[11]的研究結(jié)果也表明，D5囊胚移植時，G2培養(yǎng)液與胚胎膠作為移植液的妊娠結(jié)局差異并無統(tǒng)計學(xué)意義。

綜上所述，以胚胎膠作為移植液對提高囊胚冷凍解凍移植的臨床效果還存在爭議，其可能對提高卵裂期的胚胎移植有較好作用，而對改善囊胚期胚胎移植的效果卻是有限的。胚胎膠在囊胚冷凍解凍移植中的作用究竟如何，還需更深入研究。