李 莎，楊 柳，吳紅洋，蒲道俊，余春梅，范能全△

（1.重慶市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，重慶401121；2.西南藥業(yè)股份有限公司，重慶400038）

藥用包裝材料塑料制品如三層共擠輸液用管等在藥品行業(yè)應(yīng)用十分廣泛，由于塑料的分子結(jié)構(gòu)及靜電積累、物質(zhì)擴(kuò)散和貼合形成真空等，塑料薄膜在生產(chǎn)和使用過(guò)程中存在開口性差等問(wèn)題，加入爽滑劑可減少該現(xiàn)象的發(fā)生[1]。爽滑劑芥酸酰胺能提高聚烯烴薄膜的開口性能[2]，具有優(yōu)異的光滑度和耐黏著力，常作為薄膜的加工助劑[3]。芥酸酰胺能使小鼠行動(dòng)變緩，認(rèn)知能力下降，易水解為芥酸，引起皮膚損傷[4－6]。藥品包裝中的芥酸酰胺通過(guò)溶解和分子熱運(yùn)動(dòng)遷移出來(lái)，其降解產(chǎn)物直接或間接促進(jìn)有色化合物和有害物質(zhì)形成[7]，給藥品帶來(lái)安全風(fēng)險(xiǎn)。目前，芥酸酰胺的檢測(cè)方法主要有氣相色譜(GC)法[8]、氣相色譜－質(zhì)譜（GC－MS）法[9]、紅外光譜法[10]、高效液相色譜（HPLC）法[11]、液相色譜－質(zhì)譜法[12－13]等。由于HPLC法檢測(cè)芥酸酰胺具有良好的穩(wěn)定性和靈敏度[14]，故本研究中建立了測(cè)定三層共擠輸液用管中芥酸酰胺含量的HPLC法?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

安捷倫1260型液相色譜儀（日本Agilent公司）；XSE205型天平（瑞士梅特勒－托利多公司，精度為十萬(wàn)分之一）；ZM200型均質(zhì)器（德國(guó)萊馳公司）；HHS－21－8型水浴鍋（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；Milli－Q Advantage A10型超純水機(jī)（法國(guó)默克密理博公司）。

1.2 試藥

三層共擠輸液用管（企業(yè)A，批號(hào)分別為836LA，836LD，836LF）；芥酸酰胺對(duì)照品（CATO公司，CAS號(hào)為112－84－5，批號(hào)為CCHM700539－1811，規(guī)格為25 g，純度為87.4%）；乙腈（色譜級(jí)，安徽時(shí)聯(lián)特種溶劑股份有限公司）；異丙醇（色譜級(jí)，成都市科隆化學(xué)品有限公司）；試驗(yàn)用水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Agilent Zorbax SB－C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈；流速：1.0 mL／min；柱溫：60℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：200 nm；進(jìn)樣量10 μL。在該色譜條件下，空白樣品溶液和樣品基質(zhì)對(duì)芥酸酰胺的測(cè)定均無(wú)干擾，芥酸酰胺在6.706 min能得到較好分離，表明專屬性較好。詳見圖1。

圖1 高效液相色譜圖1.erucamideA.Reference solution B.Spiked sample solution C.Blank sample solutionFig.1 HPLC chromatograms

2.2 溶液制備

取芥酸酰胺對(duì)照品0.058 57 g，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加異丙醇溶解并定容，得質(zhì)量濃度為500μg／mL的對(duì)照品貯備液。臨用前用異丙醇稀釋成所需濃度的對(duì)照品溶液。取粉碎后的三層共擠輸液用管2.5 g，精密稱定，加25.0 mL異丙醇，用回流裝置回流煮沸2 h，冷卻至室溫，用0.45 μm有機(jī)濾膜濾過(guò)，即得供試品溶液。同法制備缺三層共擠輸液用管的空白樣品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察與檢測(cè)限、定量限確定：分別吸取2.2項(xiàng)下對(duì)照品貯備液0.05，0.10，0.20，0.50，1.00，2.00，3.00 mL，置10 mL容量瓶中，加異丙醇配制成質(zhì)量 濃 度 分 別 為5.12，10.24，20.48，51.19，102.38，204.76，307.14 μg／mL的系列對(duì)照品溶液，按2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)、芥酸酰胺質(zhì)量濃度（X，μg／mL）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程Y＝6.658 62X－3.482 26，R2＝1.000（n＝7）。結(jié)果表明，芥酸酰胺的質(zhì)量濃度在5.12～307.14 μg／mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。將上述對(duì)照品溶液逐級(jí)稀釋，按2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，以信噪比(S／N)為3時(shí)的質(zhì)量濃度為檢測(cè)限，以S／N為10時(shí)的質(zhì)量濃度為定量限。結(jié)果檢測(cè)限為0.16 μg／mL，定量限為0.50 μg／mL。

精密度試驗(yàn)：取線性關(guān)系考察項(xiàng)下質(zhì)量濃度為51.19 μg／mL的對(duì)照品溶液10 μL，按2.1項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果芥酸酰胺峰面積的RSD為0.19%（n＝6），表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取線性關(guān)系考察項(xiàng)下質(zhì)量濃度為102.38 μg／mL的對(duì)照品溶液10 μL，分別于0 h和11 h時(shí)進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果芥酸酰胺峰面積的變化率為5.03%，表明對(duì)照品溶液在11 h內(nèi)穩(wěn)定。

重復(fù)性試驗(yàn)：取樣品（批號(hào)為836LA）適量，精密稱定，依法制備供試品溶液，共6份，按2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，并計(jì)算樣品含量。結(jié)果芥酸酰胺含量的RSD為0.93%（n＝6），表明方法重復(fù)性良好。

加樣回收試驗(yàn)：取樣品（批號(hào)為836LA）2.5 g，精密稱定，共9份，依法制備供試品溶液，分別精密加入混合對(duì)照品溶液（質(zhì)量濃度為1 023.80 μg／mL）2.0，2.5，3.0 mL，平行3份，按2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，并計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 三層共擠輸液用管中芥酸酰胺加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n＝9）Tab.1 Results of the recovery test of erucamide in three－layer co－extrusion infusion tube（n＝9）

2.4 樣品含量測(cè)定

取樣品（批號(hào)分別為836LA，836LD，836LF），依法制備供試品溶液，按2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，并計(jì)算含量。結(jié)果三層共擠輸液用管中芥酸酰胺的含量分別為0.14%，0.09%，0.11%。

3 討論

試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，所測(cè)三層共擠輸液用管提取液中均檢測(cè)出芥酸酰胺，含量為0.09%～0.14%，提示藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)對(duì)三層共擠輸液用管藥包材中的芥酸酰胺進(jìn)行監(jiān)控，綜合考慮選擇適宜的藥品包裝材料。本研究中建立的HPLC法符合三層共擠輸液用管中芥酸酰胺含量的分析要求，為藥品與藥包材相容性研究中芥酸酰胺的分析提供了參考，也對(duì)芥酸酰胺國(guó)內(nèi)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的制訂有一定參考價(jià)值。該方法操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可用于三層共擠輸液用管中芥酸酰胺含量的測(cè)定。