王希 幸為斌 賀淑丹 李紅林

摘要：目的 對2019-2020年我院皮膚科分離的淋球菌進行七種藥物的耐藥性監(jiān)測分析。方法 選取2019-2020年于我院皮膚科性病門診就診的119例患者為研究對象，從患者泌尿生殖道分泌物中分離收集淋球菌，所有菌株經(jīng)分離培養(yǎng)、純化和鑒定后傳代于脫脂牛奶中，并置于液氮低溫保存?zhèn)溆?。使用微量肉湯稀釋法測定各菌株對青霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星、大觀霉素、頭孢曲松、阿奇霉素和頭孢克肟的最小抑菌濃度（MIC）和敏感性，使用紙片酸度法測定菌株是否產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶（PPNG）。結果 青霉素、環(huán)丙沙星、大觀霉素、頭孢曲松、阿奇霉素和頭孢克肟的耐藥率分別為69.75%、100.00%、0.00%、0.00%、15.97%、0.00%，PPNG陽性菌占60.50%，TRNG陽性菌占40.34%。結論 重慶市淋球菌對大觀霉素、頭孢曲松和頭孢克肟耐藥性為0%，可推薦為本地區(qū)臨床治療的一線藥物使用。

關鍵詞：淋球菌;MIC;PPNG;TRNG;耐藥性監(jiān)測

淋球菌是一種嚴格的人體寄生菌，據(jù)世界衛(wèi)生組織報告顯示[1]，是引起全球性性傳染疾病第二位的淋病的病原體。隨著抗菌藥物的廣泛應用，淋球菌的耐藥目前已經(jīng)是一個嚴重的公共衛(wèi)生問題，影響了全球淋病的管理和控制。淋球菌耐藥的持續(xù)監(jiān)測不僅對臨床用藥有指導性意義，且能掌握目前流行菌株的耐藥情況，及時發(fā)現(xiàn)多重耐藥菌并有效控制其傳播。

1.材料與方法

1.1材料

1.1一般資料

選取2019-2020年于我院皮膚科性病門診就診的119例患者為研究對象，其中，男性患者113例，女性患者6例，患者平均年齡35.43歲。

1.2研究方法

從患者泌尿生殖道分泌物中分離收集淋球菌119株，所有菌株經(jīng)分離培養(yǎng)、純化和鑒定后傳代于脫脂牛奶中，并置于液氮罐內(nèi)保存?zhèn)溆谩Ｊ褂酶牧己笪⒘咳鉁♂尫╗2]（相應試劑于珠海金標醫(yī)學檢驗公司購買）測定各菌株對青霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星、大觀霉素、頭孢曲松、阿奇霉素和頭孢克肟的最小抑菌濃度和敏感性，使用紙片酸度法測定菌株是否產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶。

1.2.1微量肉湯稀釋法

挑取純培養(yǎng)單個菌落于稀釋液瓶中研磨，將菌懸液濃度調(diào)至0.5麥氏單位。按照試劑說明書進行相應加樣到淋球菌MIC檢測板中，蓋上蓋蓋子后，置于二氧化碳培養(yǎng)箱35-37℃孵育20-24h后進行判讀。每批次實驗均采用淋球菌耐藥檢測WHO西太區(qū)規(guī)劃標準。

1.3質(zhì)控菌株

WHO G、WHO K、WHO L、WHO P、WHO V、WHO X株6株標準淋球菌菌株由中國醫(yī)學科學院皮膚病研究所檢測實驗室性病參比實驗室提供。

2.結果

2.1 PPNG及TRNG結果

2019年69株淋球菌中檢出PPNG陽性菌株42株，陽性率為61%，檢出TRNG陽性株有23株，陽性率為33%。2020年50株淋球菌中檢出PPNG陽性菌株為30株，陽性率為60%，檢出TRNG陽性株有25株，陽性率為50%。

2.2 MIC結果分布

7種抗生素對119株淋球菌的MIC分布結果，其中，青霉素和環(huán)丙沙星MIC高于1 mg/L時記為耐藥耐藥率分別為69.75%、100%;四環(huán)素MIC濃度高于16 mg/L時記為高度耐藥（TRNG）;大觀霉素MIC濃度低于32 mg/L時記為藥物敏感，介于31-128 mg/L之間時記為中敏，高于128 mg/L時記為耐藥，發(fā)現(xiàn)中敏菌株一株;頭孢曲松MIC濃度小于等于0.125 mg/L時記為藥物敏感，介于0.125-0.5 mg/L之間時記為中敏，高于1 mg/L時記為耐藥，發(fā)現(xiàn)中敏菌株一株;阿奇霉素MIC濃度介于0.5-1.0 mg/L之間時記為中敏，大于等于1 mg/L時記為耐藥，發(fā)現(xiàn)中敏菌24株（占20.2%），發(fā)現(xiàn)耐藥菌19株（占16.0%）;頭孢克肟MIC濃度低于0.25 mg/L時記為藥物敏感，高于0.25 mg/L時記為耐藥，發(fā)現(xiàn)中敏菌株3株。

2.3 ?7種抗生素對119株淋球菌的抗菌活性

7種抗生素對119株淋球菌的抗菌活性結果表明，青霉素、環(huán)丙沙星、大觀霉素、頭孢曲松、阿奇霉素和頭孢克肟的耐藥率分別為69.75%、100.00%、0.00%、0.00%、15.97%、0.00%，PPNG陽性菌占60.50%，TRNG陽性菌占40.34%。

2.4 ?多重耐藥情況分析

119株淋球菌對環(huán)丙沙星、青霉素、四環(huán)素三重耐藥菌株有26株（26/119），多重耐藥率達到21.8%;對環(huán)丙沙星、阿奇霉素、四環(huán)素三重耐藥菌株有5株（5/119），多重耐藥率達到4.2%;對環(huán)丙沙星、青霉素、四環(huán)素、阿奇霉素四重耐藥菌株有6株（6/119），多重耐藥率達到5.0%。

3討論

隨著新版本的《世界衛(wèi)生組織基本用藥清單》中，將淋球菌被列到需謹慎使用的清單當中，其相關耐藥監(jiān)測將越來越被全國乃至全世界所重視。

地域的差異會引起淋球菌各種藥物MIC值的差異顯著，如本市檢出青霉素的耐藥率為69.75%，這與廣東?。?3%）、浙江（90%）有明顯差異; 對于多耐藥菌的，這兩年尚未發(fā)現(xiàn)對青霉素、阿奇霉素、四環(huán)素三重耐藥的菌株這與2017-2018年江蘇省多重耐藥中相應三重耐藥菌株占8.92%結果有一定差異。

本文對2019-2020年重慶市淋球菌對七種藥物的耐藥性進行監(jiān)測分析，結果發(fā)現(xiàn)，本市內(nèi)淋球菌對青霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星和阿奇霉素均有較強的耐藥性，而對大觀霉素、頭孢1曲松和頭孢克肟的耐藥性為0%，因此可推薦為本地區(qū)臨床治療的一線藥物使用。

參考文獻

[1]楊波，胡麗華，趙建妹.德清地區(qū)2013-2016年淋球菌耐藥監(jiān)測結果分析[J].中國公共衛(wèi)生管理，2018，34（4）：497-499.

[2]盧靜，周瑩，張之，等.2017-2018年江蘇省淋球菌藥物敏感分析[J].江蘇預防醫(yī)學雜志，2020，31（4）：368-370.