亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        基于血清代謝組學(xué)的偏頭痛性別差異研究

        2021-09-08 07:22:58賈元威謝海棠胡容峰
        關(guān)鍵詞:性別差異雌性代謝物

        賈元威,王 萍,謝海棠,沈 杰,胡容峰

        (1.皖南醫(yī)學(xué)院弋磯山醫(yī)院藥物臨床評(píng)價(jià)中心,安徽 蕪湖 241001; 2.安徽中醫(yī)藥大學(xué)新安醫(yī)學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,安徽 合肥 230012)

        偏頭痛流行病學(xué)統(tǒng)計(jì)顯示,偏頭痛的流行病學(xué)、臨床特征和病理生理學(xué)存在顯著性別差異,男女比例約為1 ∶2-1 ∶3,對(duì)女性群體的危害更大[1-5]。血清代謝組學(xué)靈敏度高,檢測(cè)樣本易于獲取,常作為疾病早期小分子代謝物變化的重要檢測(cè)手段[6]。本研究構(gòu)建硝酸甘油型實(shí)驗(yàn)性偏頭痛大鼠模型,基于SCIEX TripleTOF? 5600 LC-Q/TOF-MS分析技術(shù),采用血清代謝組學(xué),探索偏頭痛性別差異機(jī)制。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)Sprague Dawley大鼠,體質(zhì)量(180-220) g,購(gòu)買自濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育有限公司,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(魯)20190003。

        1.1.2 試劑與儀器 硝酸甘油注射液(河南潤(rùn)弘制藥股份有限公司,批準(zhǔn)文號(hào):國(guó)藥準(zhǔn)字 H20057216);SCIEX TripleTOF? 5600 LC-Q/TOF-MS(Foster City, CA)。

        1.2 方法

        1.2.1 硝酸甘油型實(shí)驗(yàn)性偏頭痛大鼠模型構(gòu)建 空白組與模型組,20只大鼠,各包括雌雄兩組。大鼠隔天連續(xù)(d 1、3、5、7、)皮下注射硝酸甘油(10 mg·kg-1, 2 mL·kg-1)。

        1.2.2 樣本采集 3%戊巴比妥鈉(40 mg·kg-1)進(jìn)行麻醉,使用采血針腹主動(dòng)脈采血至5 mL采血管(無(wú)抗凝劑),4 ℃靜置過(guò)夜,8 000 r·min-1離心15 min,取血清分裝于干凈的EP管中,-80 ℃保存待測(cè)。

        1.2.3 樣本預(yù)處理 血清50 μL加入200 μL含有內(nèi)標(biāo) 13C-谷氨酰胺的甲醇溶液(10 mg·L-1),渦旋震蕩5 min,4 ℃,18 000 r·min-1、離心10 min。取上清200 μL于EP管中, 減壓揮干溶劑(3.5 h,不加熱,真空度10,Temp 4 ℃),超純水100 μL復(fù)溶,4 ℃,18 000 r·min-1,離心10 min,取上清20 μL進(jìn)樣。

        1.2.4 LC-Q/TOF-MS分析條件 色譜柱:Amide XBridge HPLC (3.5 μm; 4.6 mm×100 mm; Waters, USA),流動(dòng)相為5 mmol·L-1醋酸銨(pH 9)和5%乙腈,柱溫40 ℃,流速0.4 L·L-1,梯度洗脫。MS檢測(cè)采用正離子和負(fù)離子兩種模式進(jìn)行,ESI源參數(shù):Gas 1,33psi;Gas 2,33psi;CUR,25 psi;離子噴霧電壓-4 500/4 500 V;TEM,500 ℃;CE:-10/10 V。

        1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用 Analyst TF 1.6.1(AB SCIEX,MA,USA)進(jìn)行質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集,使用 AB SCIEX 的PeakView 和 MultiQuant 2.0進(jìn)行數(shù)據(jù)探索和峰面積積分。校正后的數(shù)據(jù)導(dǎo)入SIMCA-P 13.0(Umetrics,Sweden)軟件中進(jìn)行PLS-DA多元變量統(tǒng)計(jì)分析;Metabo Analyst 4.0 (http://www.metaboanalyst.ca)檢索平臺(tái)進(jìn)行代謝通路分析。

        2 結(jié)果

        2.1 模型構(gòu)建與驗(yàn)證與空白組相比,雌雄大鼠模型組行為學(xué)變化(0-120 min撓頭次數(shù))明顯升高、血清中降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)含量明顯升高、血清中五羥色胺(5-HT)含量模型組表明明顯降低,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。模型建立成功。

        2.2 多元統(tǒng)計(jì)分析雄性大鼠和雌性大鼠血清樣本 PLS-DA 模型R2Y、Q2分別為 0.839、0.62與0.944、0.651,表明空白組雄性大鼠和雌性大鼠血清樣本與模型組雄性大鼠和雌性大鼠血清樣本能完全分離開,顯示兩組大鼠血清具有明顯的代謝水平差異。

        Tab 1 Serum metabolism biomarkers in migraine model and healthy control group

        2.3 大鼠偏頭痛差異代謝物篩選與鑒定通過(guò)SPSS 18.0軟件對(duì)空白組大鼠和模型組大鼠進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),以P<0.05為標(biāo)準(zhǔn)初步篩選出差異代謝物,通過(guò)Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)差異代謝物進(jìn)行鑒定。最終篩選出與偏頭痛有關(guān)的差異代謝物雄性大鼠23個(gè),雌性大鼠9個(gè)(Tab 1)。

        3 討論

        應(yīng)用Metabo Analyst 4.0在線工具對(duì)雌雄大鼠體內(nèi)差異代謝物進(jìn)行富集拓?fù)浞治?,雄性大鼠主要涉及代謝通路為:氨?;?tRNA生物合成、嘧啶代謝、精氨酸生物合成、乙醛酸和二羧酸代謝、磷酸戊糖途徑、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝、甘氨酸、絲氨酸和蘇氨酸代謝、精氨酸和脯氨酸代謝、谷胱甘肽代謝、酮體的合成與降解。雌性大鼠主要涉及代謝通路:氨?;?tRNA生物合成、乙醛酸和二羧酸代謝、半胱氨酸和蛋氨酸代謝、甘氨酸、絲氨酸和蘇氨酸代謝、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成。本研究為偏頭痛性別差異血清代謝組學(xué)的首次報(bào)道。

        猜你喜歡
        性別差異雌性代謝物
        阿爾茨海默病血清代謝物的核磁共振氫譜技術(shù)分析
        連續(xù)超促排卵致腎精不足伴生育力低下雌性小鼠模型制備和比較研究
        河南一種雌性蚜蠅首次記述
        柱前衍生化結(jié)合LC-MSn分析人尿中茶堿及其代謝物
        慢性焦慮刺激對(duì)成年雌性大鼠性激素水平的影響
        性別差異對(duì)TWA的影響
        中國(guó)缺血性腦卒中急性期抑郁障礙的性別差異
        HPLC-MS/MS法分析乙酰甲喹在海參中的主要代謝物
        45歲以下急性心肌梗死患者冠狀動(dòng)脈介入治療預(yù)后的性別差異
        雙酚A對(duì)雌性生殖器官的影響及作用機(jī)制
        波多野结衣免费一区视频| 国语淫秽一区二区三区四区| 国产免费观看黄av片| 天码人妻一区二区三区| 久久天天爽夜夜摸| 一本一道久久a久久精品综合蜜桃 成年女人18毛片毛片免费 | 国产精品无码久久久久久久久作品| 久久久亚洲一区二区三区| 亚洲熟妇av一区二区三区| 成人区人妻精品一熟女| 免费观看一区二区| 亚洲中文乱码在线观看| 亚洲av综合一区二区在线观看| 亚洲精品欧美二区三区中文字幕 | 中国丰满大乳乳液| 国产伦码精品一区二区| 国产黄色一区二区在线看| 波多野结衣久久精品99e| 亚洲综合色丁香婷婷六月图片| 超级少妇一区二区三区| 很黄很色的女同视频一区二区| 午夜福利av无码一区二区| 国产午夜福利不卡在线观看视频| 最新日韩人妻中文字幕一区| 青青草骚视频在线观看| 国产精品亚洲一区二区三区在线| 亚洲国产另类久久久精品小说| 亚洲一区免费视频看看| 97se亚洲国产综合自在线观看| 韩国19禁主播深夜福利视频| 加勒比东京热综合久久| 亚洲精品第一页在线观看| 国产精品久久久久久久久岛| 国产AV国片精品有毛| 九九久久精品一区二区三区av| 精品国产乱码久久久久久郑州公司 | 人妻在线有码中文字幕| 欧美日韩精品久久久免费观看| 无码的精品免费不卡在线| 国内激情一区二区视频| 国产av熟女一区二区三区|