為了改善食品的顏色或外觀，從而有利于產品銷售，著色劑在食品工業(yè)中得到了很廣泛的應用。與天然色素相比，合成著色劑的著色力強、色澤鮮艷、不易褪色、穩(wěn)定性好、易溶解、易調色、成本低，但安全性低，所以國家對合成著色劑的監(jiān)管很嚴格。

根據GB 2760-2014《食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》的規(guī)定，果醬（食品分類號04.01.02.05）產品允許使用合成著色劑，限值為：檸檬黃0.5g/kg、日落黃0.5g/kg、莧菜紅0.3g/kg、胭脂紅0.5g/kg、亮藍0.5g/kg。不過，GB 5009.35-2016《食品安全國家標準 食品中合成著色劑的測定》只適用于巧克力豆、硬糖、著色糖衣制品、蜜餞、配制酒、飲料、淀粉軟糖等7種產品的測定，對于允許而且經常使用合成著色劑的果醬產品，則不在適用范圍內。

本文通過檢出限、回收率和精密度等檢驗數據，驗證GB 5009.35-2016《食品安全國家標準 食品中合成著色劑的測定》的檢測方法是否適用于果醬產品的檢測，從而解決實驗室選擇測試方法的問題。

一、實驗材料

1 .試劑及配制方法。甲醇：色譜純。乙酸銨（CH3COONH4）溶液（0.02mol/L）：稱量乙酸銨1.54g，加水至1L，后經微孔濾膜（0.45μm）過濾。檸檬酸（C6H8O7·H2O）溶液（20g/100mL水），用該濃度的檸檬酸溶液把水調到pH6和pH4。氨水溶液：氨水含量要求20%-25%，把2mL的氨水加水稀釋至100mL。甲醇-甲酸溶液：把甲醇、甲酸按體積比（6+4）混勻。無水乙醇-氨水-水溶液：把無水乙醇、氨水溶液、水按體積比（7+2+1）混勻。聚酰胺粉（尼龍6）：過200μm（目）篩。無水乙醇（CH3CH2OH），乙酸（CH3COOH）。

2.標準品。檸檬黃（CAS︰1934-21-0）；莧菜紅（CAS︰915-67-3）；胭脂紅（CAS︰2611-82- 7）；日落黃（CAS︰2783-94-0）；亮藍（CAS︰3844-45-9）。

3.標準溶液配制。購買濃度為0.500mg/L合成著色劑標準溶液，吸取2.0mL標準溶液，加pH6的水定容至10.0mL，配成濃度為0.100mg/mL的標準使用液。分別吸取濃度為0.100mg/mL標準溶液0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mL加pH6的水定容至10.0mL，配成每毫升相當1.0μg、2.0μg、5.0μg、10.0μg、20.0μg的合成著色劑。

二、儀器和設備

配有紫外可見光檢測器的LC-2010AHT高效液相色譜儀，日本島津公司。電子天平，美國賽多利斯丹佛，型號TP-213，感量為0.001g。HWS-12恒溫水浴鍋，上海一恒科學儀器有限公司。G3垂融漏斗。

三、實驗方法

1.試樣制備。稱取果醬產品3-5g（精確至0.001g），放入100mL的小燒杯中，加入約30mL水，攪拌溶解（不溶解的樣品可以適當延長時間或提升溫度至全部溶解）。如果溶解后的樣品溶液pH較高，可用檸檬酸溶液把樣品溶液的酸堿度調成pH6。

2.色素提取。果醬產品的色素提取選用聚酰胺吸附法，試驗過程要注意溶液的溫度和pH值。先稱量1g聚酰胺粉于小燒杯中，加少許水調成粥狀備用；再把樣品溶液加熱到60℃，趁熱把準備好的聚酰胺粉倒入樣品溶液中，攪拌1分鐘后，用G3垂融漏斗對樣品溶液進行抽濾；將大約20mL的水（pH為4，溫度為60℃）倒入燒杯進行洗滌，并把洗滌水倒入G3垂融漏斗中抽濾；上述洗滌操作重復3-5次，然后用甲醇-甲酸溶液洗滌3-5次，再用水洗滌至樣品溶液為中性。換一個接收瓶，用乙醇-氨水-水混合溶液進行解吸，重復3-5次，直到聚酰胺粉上的色素被完全解吸出來；收集全部解吸液，加入乙酸中和，水浴加熱蒸發(fā)至近干，加水溶解，定容到10mL；經0.45μm微孔濾膜過濾后，上機分析。根據保留時間定性，以外標峰面積法定量。

3.液相色譜條件。色譜柱為SHIMSEN Ankylo C18（250mm×4.6mm，5μm），檢測波長為254nm，柱溫控制在35℃，流速為1.0mL/min，進樣量為10μL。其中，流動相A為乙酸銨溶液，流動相B為甲醇（色譜純），梯度洗脫程序詳見表1。

四、結果計算

試樣中著色劑含量的計算公式如下：

其中，X為樣品著色劑含量，g/kg；m為樣品質量，g；v為試樣稀釋總體積，mL；1000為換算系數。

五、檢出限、回收率和精密度

1.檢出限。將濃度為1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL的標準溶液分別上機測定得出峰面積數據，以色素的含量（μg/mL）為橫坐標X，以峰面積為縱坐標Y，繪制坐標圖，進行線性回歸分析，回歸方程如表2所示。

2.回收率。在相同基質的空白樣品中加入6個目標色素（加標量1mL，濃度為20μg/mL），加標后進行前處理，上機測定，經計算得出加標回收率及相對標準偏差，詳見表3。

六、綜述

根據GB 5009.35-2016《食品安全國家標準 食品中合成著色劑的測定》規(guī)定，檸檬黃、日落黃、莧菜紅、胭脂紅的方法檢出限為0.5mg/kg，亮藍為1.0mg/kg。在上述檢出限驗證試驗中，色素線性回歸方程的相關系數R2達到0.999以上，說明方法檢出限滿足標準要求。果醬產品中目標色素的回收率在83.1%-100.7%之間，對于樣品前處理經過吸附、解析再上機測定的實驗過程來說，回收率已經滿足要求?；厥章?次試驗的相對標準偏差RSD在3.3%-5.3%之間，均在6%以內，數據穩(wěn)定。目標色素在重復條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值占算術平均值的百分比在3.4%-8.9%之間，符合國家標準不超過10%的規(guī)定。

綜上所述，果醬產品中檸檬黃、日落黃、莧菜紅、胭脂紅、亮藍的測定可參照GB 5009.35-2016《食品安全國家標準 食品中合成著色劑的測定》執(zhí)行，其檢出限、回收率和精密度均滿足該標準規(guī)定。

作者簡介：劉少梅（1980-），女，漢族，質量工程師，大學本科，研究方向為質量管理、食品檢驗。