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        不同品牌和年份普洱茶的主要品質(zhì)成分比較研究

        2021-08-26 10:42:00高熳熳張林奇王曉蕊翁彥如馬立娟杜麗平
        食品研究與開發(fā) 2021年16期
        關(guān)鍵詞:浸出物甲氧基普洱茶

        高熳熳,張林奇,王曉蕊,翁彥如,馬立娟,杜麗平

        (工業(yè)發(fā)酵微生物教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津市工業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院,天津 300457)

        普洱茶(熟茶)是黑茶的典型代表之一,是以云南大葉種的曬青毛茶為原料,經(jīng)渥堆發(fā)酵形成的后發(fā)酵茶,因其獨(dú)特的風(fēng)味與其健康的特性備受國內(nèi)外消費(fèi)者和研究者的關(guān)注[1-2]。普洱茶中的內(nèi)含物質(zhì)在渥堆發(fā)酵過程中經(jīng)濕熱作用及微生物的酶促作用,發(fā)生氧化聚合、轉(zhuǎn)化等反應(yīng),形成了普洱茶醇和回甘的獨(dú)特品質(zhì)[3]。香氣是各種揮發(fā)性、半揮發(fā)性成分以不同濃度組合協(xié)同作用的結(jié)果,給消費(fèi)者帶來的是一種綜合的氣味感知,這種氣味感知難以準(zhǔn)確測定,但對茶葉品質(zhì)以及消費(fèi)者的喜好和選擇起著決定性的作用[4]。

        呂海鵬等[5]采用高效液相色譜(high performance liquid chromatography,HPLC)等方法查明普洱茶中的游離氨基酸總量、兒茶素總量、DL-兒茶素、沒食子兒茶素沒食子酸酯、有機(jī)酸總量、檸檬酸和酒石酸等7種化合物的含量水平是影響普洱茶滋味品質(zhì)得分的最主要因素;QIN等[6]通過分析黑曲霉和煙曲霉發(fā)酵系統(tǒng)中普洱茶的茶多酚和嘌呤生物堿含量發(fā)現(xiàn),兒茶素、酯兒茶素和沒食子酸是發(fā)酵過程中的主要中間產(chǎn)物;XIE等[7]研究發(fā)現(xiàn)普洱熟茶茶葉(干重)中茶黃素、茶紅素和茶褐素的含量分別為0.16%~0.29%、0%~0.99%和8.33%~13.65%;XU等[8]采用頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用法測定普洱茶中揮發(fā)性組分發(fā)現(xiàn),醇、甲氧基苯和酮在成熟的普洱茶的特殊風(fēng)味中起著至關(guān)重要的作用;PANG 等[9]發(fā)現(xiàn)芳樟醇、α-紫羅蘭酮、1,2,4-三甲氧基苯、1,2,3-三甲氧基-5-甲基苯、1,2,3,4-四甲氧基苯和1,2,3-三甲氧基苯可用作普洱生茶和普洱熟茶鑒別的潛在氣味活性標(biāo)記。然而目前普洱茶市場有許多品牌,由于生產(chǎn)廠家所處地理環(huán)境與生產(chǎn)原料、工藝的差異,各品牌的普洱茶具有不同的特點(diǎn)。本研究對3個(gè)品牌、5個(gè)年份的普洱熟茶產(chǎn)品的主要內(nèi)含物質(zhì)與香氣成分進(jìn)行了比較研究,為進(jìn)一步幫助消費(fèi)者了解不同品牌的普洱茶的品質(zhì)提供理論依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        普洱茶(2013年~2017年):品牌1(嘜號(hào)7572),品牌 2(嘜號(hào) 7578),品牌 3(嘜號(hào) 0081)。

        沒食子酸(gallic acid,GA)、兒茶素(catechin,C)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)、表兒茶素沒食子酸酯[(-)-epicatechin gallate,ECG]:阿拉丁試劑(上海)有限公司;福林酚:天津大茂化學(xué)試劑廠;濃硫酸(優(yōu)先級(jí))、冰乙酸、苯酚、葡萄糖:北京化工廠;正丁醇、甲醇:天津市化學(xué)試劑一廠;草酸:天津市化學(xué)試劑批發(fā)公司;碳酸氫鈉、無水碳酸鈉、乙腈(色譜純):天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠;無水乙醇(色譜級(jí)):天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所;其他試劑均為分析純。1,2,3-三甲氧基苯、1,2-二甲氧基苯、1,2,4-三甲氧基苯(色譜級(jí)):美國sigma公司;3,4-二甲氧基苯(色譜級(jí)):TCI(上海)化成工業(yè)發(fā)展有限公司。

        1.2 儀器與設(shè)備

        FA2004型電子天平:上海精科科學(xué)儀器有限公司;UV-1200型紫外可見分光光度計(jì):上海美譜儀器有限公司;5804R型高速離心機(jī):eppendorf公司;H1650-W型臺(tái)式高速離心機(jī):湖南湘儀試驗(yàn)儀器有限公司;DH-204型電熱恒溫干燥箱:天津市中環(huán)試驗(yàn)電路有限公司;Hei-VAP Value Digital型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:德國海道夫公司;1260型高效液相色譜儀、7890A-5975C氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS):美國Agilent公司;75 μm CAR/PDMS萃取頭、手動(dòng)固相微萃取進(jìn)樣器:美國Supelco公司;IT-09A5恒溫磁力攪拌器:上海一恒科學(xué)儀器有限公司。

        1.3 試驗(yàn)方法

        1.3.1 普洱茶內(nèi)含物質(zhì)分析

        干物質(zhì)含量測定參照GB/T 8303—2013《茶磨碎試樣的制備及其干物質(zhì)含量測定》[10];水浸出物測定參照GB/T 8305—2013《茶水浸出物測定》[11];茶多酚和沒食子酸含量的測定參照GB/T 8313—2018《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測方法》[12];茶多糖含量的測定采用苯酚-硫酸法[13];茶褐素測定采用系統(tǒng)分析法[14]。

        1.3.2 普洱茶揮發(fā)性化合物分析

        1.3.2.1 頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用(headspace solid phase microextraction gas chromatography mass spectrometry,HS-SPME-GC-MS)條件

        HS-SPME條件:稱取2.00 g茶樣置于20 mL頂空瓶中,樣品瓶置于70℃水浴中、400 r/min條件下平衡10 min后,插入75 μm CAR/PDMS萃取頭,萃取50 min取出固相微萃取儀插入GC-MS進(jìn)樣口250℃解吸附5 min。

        GC 條件:HP-5MS(60 m×0.32 mm×0.25 μm)石英毛細(xì)管柱;進(jìn)樣口溫度250℃,載氣為高純氦氣>99.999%,流速0.8 mL/min;不分流進(jìn)樣;色譜柱升溫程序:初始溫度40℃,保持3min,以4℃/min升至150℃,保持1min,以8℃/min升至250℃,運(yùn)行時(shí)間為51.17min。

        MS條件:離子源為EI源,離子源溫度230℃,電離能量70 eV;四極桿溫度150℃;接口溫度280℃;質(zhì)量掃描m/z為35 amu~500 amu。

        1.3.2.2 甲氧基苯類化合物定量分析

        普洱茶樣品中甲氧基苯類化合物的定量分析參照文獻(xiàn)[15]中的方法進(jìn)行。

        1.3.3 數(shù)據(jù)分析

        通過Microsoft Office Excel 2010軟件分析試驗(yàn)數(shù)據(jù),并繪制相關(guān)圖表,均以3次重復(fù)試驗(yàn)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行結(jié)果分析。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 普洱茶樣品中干物質(zhì)的含量

        對15個(gè)普洱茶樣品中干物質(zhì)含量的分析結(jié)果見表1。

        表1 普洱茶樣品中干物質(zhì)的含量Table 1 The content of dry matter in Pu-erh tea samples %

        由表1可知,所有樣品的干物質(zhì)含量均符合國家標(biāo)準(zhǔn),同一品牌不同年份的普洱茶樣品間干物質(zhì)的含量比較穩(wěn)定。品牌1樣品中干物質(zhì)含量范圍為91.07%~91.74%,品牌2樣品中干物質(zhì)含量范圍為90.59%~91.49%,品牌3樣品中干物質(zhì)含量范圍為88.82%~89.78%。而不同品牌的普洱茶樣品間干物質(zhì)的含量存在著一定的差異,每個(gè)年份3個(gè)品牌的干物質(zhì)含量依次為品牌1>品牌2>品牌3;品牌1和品牌2中干物質(zhì)含量均大于90%,而品牌3中,干物質(zhì)的含量整體低于90%。

        2.2 普洱茶樣品中水浸出物的含量

        水浸出物指茶葉中能溶于熱水的可溶性物質(zhì)的統(tǒng)稱,包括可溶性糖、氨基酸、茶多酚等多種物質(zhì),其含量的高低顯著影響茶葉的品質(zhì)[16-17]。3個(gè)品牌普洱茶樣品中的水浸出物的含量分析結(jié)果見表2。

        表2 普洱茶樣品中茶水浸出物的含量Table 2 The content of tea extract in Pu-erh tea samples %

        由表2可知,同一品牌不同年份的普洱茶樣品間水浸出物的含量基本穩(wěn)定,而不同品牌的普洱茶樣品間水浸出物的含量存在著一定的差異。15個(gè)普洱茶樣品中水浸出物的含量范圍為20.85%~34.41%,且其中2014年~2016年3個(gè)年份中,茶水浸出物的含量為品牌1>品牌2>品牌3;在2013年和2017年中,茶水浸出物的含量則為品牌2>品牌1>品牌3;品牌1與品牌2的差異不大,而品牌3的水浸出物含量明顯低于品牌1和品牌2。

        2.3 普洱茶樣品中茶多酚的含量

        茶多酚是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱,包括黃烷醇類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等,占茶葉干質(zhì)量的15%~30%,表現(xiàn)為茶葉的苦澀味,對茶葉色、香、味的形成有重要作用[18-19]。普洱茶樣品中茶多酚含量的分析結(jié)果見表3。

        表3 普洱茶樣品中茶多酚的含量Table 3 The content of tea polyphenols in Pu-erh tea samples %

        由表3可知,茶多酚含量范圍在6.12%~11.88%之間。品牌1不同年份普洱茶中茶多酚含量較穩(wěn)定,且含量明顯高于品牌2和品牌3;品牌2與品牌3不同年份普洱茶中茶多酚含量不如品牌1穩(wěn)定,其中品牌2中,2015年的普洱茶樣品中茶多酚含量最低(6.85%),2013年的含量最高(8.55%);品牌3中,2014年的普洱茶樣品的茶多酚含量最高為8.24%,2017年的最低(6.12%)。

        2.4 普洱茶樣品中沒食子酸及兒茶素類的含量

        沒食子酸及兒茶素類是茶葉的重要內(nèi)含物質(zhì),其在普洱茶渥堆發(fā)酵過程中發(fā)生了一系列變化[20-21]。本試驗(yàn)對普洱茶樣品中GA及兒茶素類化合物包括C、EGCG、ECG的含量進(jìn)行了分析,結(jié)果見表4。

        表4 普洱茶樣品中GA、C、EGCG及ECG的含量Table 4 The content of GA,C,EGCG and ECG in Pu-erh tea samples

        由表4可知,普洱茶樣品中沒食子酸的含量范圍為2.39 mg/g~9.79 mg/g,其中品牌1的平均含量大于品牌2和品牌3。兒茶素的含量范圍為0.39 mg/g~0.95 mg/g,3個(gè)品牌的平均含量差別不大;兒茶素沒食子酸酯含量范圍為0.42 mg/g~2.26 mg/g,品牌1的平均含量明顯大于品牌2和品牌3;表兒茶素沒食子酸酯的含量范圍為0.91 mg/g~3.09 mg/g,其中品牌1的平均含量大于品牌2和品牌3。在普洱茶的生產(chǎn)過程中,兒茶素類化合物隨著發(fā)酵時(shí)間的延長發(fā)生一系列的氧化作用,此外兒茶素類化合物的氧化衍生會(huì)形成茶色素進(jìn)而使得其含量減少。

        2.5 普洱茶樣品中茶多糖的含量

        茶多糖是一種酸性糖蛋白,是由茶葉中糖類、果膠、蛋白質(zhì)等組成的一類復(fù)合物,其含量的高低與普洱茶的品質(zhì)好壞密切相關(guān)[22]。普洱茶樣品中茶多糖含量的分析結(jié)果見表5。

        表5 普洱茶樣品中茶多糖的含量Table 5 The content of tea polysaccharides in Pu-erh tea samples %

        由表5可知,在所測普洱茶樣品中,茶多糖的含量范圍為4.91%~8.57%。其中2013年普洱茶中茶多糖含量從高到低依次為品牌1>品牌2>品牌3;2016年和2017年的普洱茶中茶多糖的含量從高到低依次為品牌2>品牌3>品牌1;2015年普洱茶中茶多糖的含量從高到低依次為品牌2>品牌1>品牌3。普洱茶中茶多糖含量的差異可能是由原料的差異導(dǎo)致的。

        2.6 普洱茶樣品中茶褐素的含量

        茶褐素通常被認(rèn)為是茶多酚、茶黃素、茶紅素的氧化聚合產(chǎn)物[23],是造成茶湯發(fā)暗、無收斂性的主要原因,其含量與茶葉品質(zhì)呈負(fù)相關(guān)。表6為普洱茶樣品中茶褐素含量的分析結(jié)果。

        由表6可知,不同品牌的普洱茶樣品間茶褐素的含量存在著一定的差異,在2013年和2014年中,普洱茶中茶褐素的含量依次為品牌2>品牌1>品牌3;2015年~2017年中,普洱茶中茶褐素的含量依次為品牌1>品牌2>品牌3。而同一品牌在不同年份中茶褐素的含量差異也較大,其中品牌1普洱茶樣品中茶褐素的含量最低為10.62%,最高達(dá)到15.78%;品牌2普洱茶樣品中茶褐素的含量最低為10.55%,最高達(dá)到13.51%;品牌3普洱茶樣品中茶褐素的含量最低為9.16%,最高為10.36%,含量差異明顯。

        2.7 普洱茶香氣成分比較

        普洱茶樣品中香氣化合物的類型及含量見圖1。

        圖1 普洱茶樣品中香氣化合物的類型及含量Fig.1 Types and contents of aroma compounds in Pu-erh tea samples

        如圖1所示,采用HS-SPME-GC-MS方法對2015年的3個(gè)品牌的普洱茶香氣進(jìn)行定性分析,檢測出的化合物包括醛類、醇類、酮類、甲氧基苯類、碳?xì)漕?、酚類、酯類和含氮類?大類化合物。品牌1的香氣成分中各類物質(zhì)含量分別為醛類6.47%、醇類17.01%、酮類5.03%、甲氧基苯類37.32%、碳?xì)漕?.53%、酚類2.24%、酯類5.57%和含氮類3.63%;品牌2的香氣成分中各類物質(zhì)含量分別為醛類2.34%、醇類12.81%、酮類4.65%、甲氧基苯類37.46%、碳?xì)漕?.58%、酚類1.57%、酯類7.23%和含氮類6.30%;品牌3的香氣成分中各物質(zhì)含量分別為醛類3.78%、醇類10.85%、酮類9.12%、甲氧基苯類32.20%、碳?xì)漕?.96%、酯類8.18%和含氮類6.51%。甲氧基苯類物質(zhì)在3個(gè)品牌普洱茶中的含量均較高,品牌1普洱茶的醛類、醇類和碳?xì)漕惢衔锏南鄬扛哂谄渌鼉蓚€(gè)品牌的普洱茶,品牌3普洱茶的酮類、酯類和含氮類化合物的相對含量高于其它兩個(gè)品牌,而甲氧基苯類化合物的相對含量是最低的。

        普洱茶獨(dú)特的陳香風(fēng)味是其品質(zhì)較好判定的主要因子,也是影響普洱茶市場價(jià)值和消費(fèi)者選擇的決定性指標(biāo),而甲氧基苯類化合物及其衍生物是普洱茶中含量最多的化合物,對普洱茶的陳香味起主要作用[24]。普洱茶樣品中甲氧基苯的含量分析結(jié)果見表7。

        表7 不同品牌普洱茶樣品中甲氧基苯的含量Table 7 The content of methoxybenzene in Pu-erh tea samples μg/g

        續(xù)表7 不同品牌普洱茶樣品中甲氧基苯的含量Continue table 7 The content of methoxybenzene in Pu-erh tea samples μg/g

        由表7可知,1,2-二甲氧基苯的含量范圍為4.94 μg/g ~14.64 μg/g,3,4-二甲氧基苯的含量范圍為2.30 μg/g ~11.73 μg/g,1,2,3-三甲氧基苯的含量范圍為 8.24 μg/g ~23.38 μg/g,1,2,4-三甲氧基苯的含量范圍為 8.97 μg/g ~26.23 μg/g。在品牌 1 中 2013 年的普洱茶樣品中除3,4-二甲氧基苯外,其余3種物質(zhì)的含量均為最低;在品牌2中2013年的普洱茶樣品中除3,4-二甲氧基苯外,其余3種物質(zhì)的含量均為最高;在品牌3的不同年份中1,2,4-三甲氧基苯的含量均為最高。這可能是由于原料及加工工藝不同造成的。

        3 結(jié)論

        普洱茶的內(nèi)含物質(zhì)和香氣成分是評價(jià)普洱茶風(fēng)格特征的重要指標(biāo)。本研究對3個(gè)品牌(分別來自勐海、昆明和普洱產(chǎn)區(qū))、5個(gè)年份普洱茶的內(nèi)含物質(zhì)和香氣成分分析表明,不同品牌普洱茶差異明顯,同一品牌不同年份(除個(gè)別年份外)普洱茶品質(zhì)基本穩(wěn)定。從內(nèi)含物質(zhì)結(jié)果來看,品牌1中的干物質(zhì)含量、茶多酚、表沒食子兒茶素和表兒茶素沒食子酸酯的含量最高;品牌2中的兒茶素含量顯著低于其他兩個(gè)品牌;品牌3的茶水浸出物、沒食子酸和茶褐素的含量較低。從香氣成分結(jié)果來看,共鑒定出醛類、醇類、酮類、甲氧基苯類、碳?xì)漕?、酚類、酯類和含氮類?大類化合物,其中使普洱茶具有陳香特征的甲氧基苯類香氣化合物相對含量均最高。品牌1的醛類、醇類和碳?xì)浠衔锏南鄬扛哂谄渌鼉蓚€(gè)品牌的普洱茶,品牌2普洱茶樣品中甲氧基苯類化合物相對含量最高,品牌1僅次之,品牌3普洱茶的酮類、酯類和含氮化合物的相對含量是最高的。

        隨著普洱茶消費(fèi)市場的擴(kuò)大,普洱茶的品質(zhì)特征也成為消費(fèi)者關(guān)心的話題,而茶葉的特有品質(zhì)與多種因素有關(guān),本研究對3個(gè)品牌的普洱茶特征品質(zhì)進(jìn)行了初步研究,有必要對影響普洱茶品質(zhì)特征的各種因素進(jìn)行深入研究,探明其品質(zhì)形成機(jī)制,進(jìn)而支持普洱茶市場的健康發(fā)展,為消費(fèi)者的選擇提供理論依據(jù)。

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