張若冰,陳福軍,郝武常,武 易
(1. 陜西省新藥審評(píng)中心,陜西 西安 710065; 2. 遼寧省檢驗(yàn)檢測(cè)認(rèn)證中心認(rèn)證審評(píng)院,遼寧 沈陽(yáng) 110003;3. 中國(guó)人民解放軍空軍第986 醫(yī)院檢驗(yàn)科,陜西 西安 710054)
抗著絲點(diǎn)抗體(ACA)為針對(duì)著絲粒蛋白(Cen P)抗原的自身抗體。自1980 年被發(fā)現(xiàn)以來,一直認(rèn)為ACA 是治療系統(tǒng)性動(dòng)脈硬化癥的特異性抗體,尤其是局限型系統(tǒng)性CREST 綜合征診斷的標(biāo)志性抗體[1]。隨著臨床研究的深入,發(fā)現(xiàn)在其他多種自身免疫性疾病中也出現(xiàn)ACA 陽(yáng)性,如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等[2-3],但大部分研究著重探討的是 ACA 在某種自身免疫性疾病中的表達(dá)情況和臨床意義。本研究中回顧性分析了ACA 陽(yáng)性患者的臨床資料,總結(jié)了ACA 的疾病分布,以及與其他自身抗體的關(guān)系?,F(xiàn)報(bào)道如下。
選取中國(guó)人民解放軍第986 醫(yī)院檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)中2012 年3 月至2018 年3 月收治的抗核抗體(ANA)和 ACA 均呈陽(yáng)性的患者 146 例。其中,男10 例,平均年齡 (56.42 ± 7.33)歲;女 136 例,平均年齡(52.71 ±10.25)歲。所有患者臨床診斷均符合標(biāo)準(zhǔn),均簽署知情同意書,一般臨床資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05),具有可比性。
采集患者血清,采用線性免疫印跡(LIA)法測(cè)定ACA 活性,同時(shí)檢測(cè)抗組蛋白、抗核小體、抗RNP/Sm、抗 Ro(SSA)抗體、抗 La(SSB)抗體、抗 Scl-70、抗 Jo-l、抗AMA 抗體、抗 AECA 抗體和抗 Ro52 抗體活性。以 LIA 法和酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定,檢測(cè)試劑盒購(gòu)于歐蒙醫(yī)學(xué)診斷(中國(guó))有限公司。檢測(cè)步驟嚴(yán)格按試劑盒使用說明書進(jìn)行。以免疫比濁法檢測(cè)類風(fēng)濕因子(RF)水平,以酶聯(lián)免疫吸附半定量法檢測(cè)抗雙鏈DNA 抗體(dsDNA)活性,操作步驟同ACA 活性檢測(cè)。采用邁瑞B(yǎng)C-6800 型血細(xì)胞分析儀進(jìn)行ACA 陽(yáng)性患者血常規(guī)分析,以及邁瑞B(yǎng)S-600型全自動(dòng)分析儀檢測(cè)ACA 陽(yáng)性患者丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)水平,儀器均購(gòu)自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司;采用XC-A30 型全自動(dòng)血沉動(dòng)態(tài)分析儀(深圳市凱特生物醫(yī)療電子科技有限公司)檢測(cè)ACA 陽(yáng)性患者紅細(xì)胞沉降率(簡(jiǎn)稱血沉)。
采用SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析。正態(tài)分布的連續(xù)變量采用表示,行 t 檢驗(yàn)(正態(tài)分布)或 Mann -Whitney U 檢驗(yàn)(非正態(tài)分布);分類變量采用率(%)表示,行 χ2檢驗(yàn)或 Fisher 精確檢驗(yàn)。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
146 例ACA 陽(yáng)性患者中,自身免疫性疾病患者83例(56.85%),非自身免疫性疾病患者63 例。詳見表1。
表1 146 例ACA 陽(yáng)性患者疾病分布(n =146)Tab.1 The disease distribution of 146 ACA -positive patients(n =146)
146 例ACA 陽(yáng)性患者中,同時(shí)伴有SSA 陽(yáng)性、AMA陽(yáng)性、Ro52 陽(yáng)性、RF 陽(yáng)性、Sm 陽(yáng)性的情況見表 2。
表2 146 例ACA 陽(yáng)性患者中其他抗體陽(yáng)性檢出情況(n =146)Tab.2 Positive rate of other antibodies in 146 ACA -positive patients(n = 146)
146 例 ACA 陽(yáng)性患者中,貧血癥患者 80 例(54.79%),肝功能異常(主要是 ALT 和 AST 異常)患者 62 例(42.47%),血沉異?;颊?44 例(30.14%)。
ACA 是人類抗核抗體的一種,是針對(duì)著絲點(diǎn)結(jié)構(gòu)抗原而產(chǎn)生的自身靶定位抗體,其靶定位抗原為著絲點(diǎn)結(jié)構(gòu)的相關(guān)蛋白,其結(jié)構(gòu)可細(xì)分為3 種不同的靶定位蛋白質(zhì):CenP-A (著絲點(diǎn)分子量 17 000)、CenP-B(著絲點(diǎn)分子量 80 000)、CenP-C(著絲點(diǎn)分子量140 000),其中主要靶定位抗原是CenP-B,它能與血液中含有各種著絲點(diǎn)結(jié)構(gòu)抗體的血清相互反應(yīng)[4-5]。
本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),146 例ACA 陽(yáng)性患者中,女性患者顯著多于同齡男性,且發(fā)病年齡較輕。其原因可能與機(jī)體雌激素分泌水平降低,對(duì)長(zhǎng)期處于大范圍絕經(jīng)期婦女的神經(jīng)刺激抑制作用減弱,使女性疾病的發(fā)展較慢有關(guān)[5]。多數(shù)女性疾病患者在絕經(jīng)期病情穩(wěn)定,較易得到控制,是預(yù)后良好的重要原因之一[6-7]。
ACA 被認(rèn)為是自身系統(tǒng)性動(dòng)脈硬化病CREST 亞型的特異性抗體,與雷諾綜合征的臨床診斷和治療關(guān)系密切[8-9]。本研究中發(fā)現(xiàn),ACA 陽(yáng)性患者患雷諾綜合征僅1 例,且雷諾綜合征占自身免疫性疾病患者死亡總?cè)藬?shù)的1.20%。83 例ACA 陽(yáng)性的自身免疫性疾病患者中,患自身免疫性乙型肝炎的人數(shù)最多(40.96%),其次為混合肝病和結(jié)締組織性疾?。?8.07%)。ACA 在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等多種自身免疫性疾病中均呈高表達(dá),但上述疾病的陽(yáng)性患者平均人數(shù)無顯著差異(P > 0.5),與文獻(xiàn)[2,10]報(bào)道結(jié)果基本一致。可見,證明ACA 為某一種疾病的患者具有特征性抗體尚缺乏統(tǒng)計(jì)學(xué)依據(jù)。此外,自身免疫性疾病患者的人數(shù)顯著高于非自身免疫性疾病的患者(P < 0.01),說明 ACA 雖然同時(shí)可在多種疾病中顯陽(yáng)性,但對(duì)自身免疫性特征性疾病中的分布差異顯著。63 例非自身免疫性疾病患者中,患有血液系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)疾病陽(yáng)性患者的人數(shù)相對(duì)較多,尤其是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化等多發(fā)性心臟病患者多達(dá)29 例,占非自身抗體免疫感染性疾病肺癌患者數(shù)的22.22%,但尚未見具體機(jī)制的報(bào)道。此外,值得注意的是,ACA 陽(yáng)性非自身抗體免疫感染患者中,出現(xiàn)了某些惡性腫瘤患者,包括原發(fā)性白血病、肺癌、鼻咽癌。其具體作用機(jī)制可能與生物腫瘤抗體細(xì)胞的無限合成和增殖特性有關(guān),提示生物抗體合成及增殖過程中靶抗原可能是自身抗體細(xì)胞中相應(yīng)的靶抗原[11-12]。
146 例ACA 陽(yáng)性患者中,同時(shí)伴有抗SSA 抗體患者34 例,抗AMA 抗體患者33 例,抗Ro52 抗體患者30例,RF 患者 21 例,抗 Sm 患者抗體 12 例,抗 RNP 抗體患者11 例,抗AECA 抗體患者9 例,提示ACA 可能與多種其他自身抗體同時(shí)出現(xiàn)。
與核膜型ACA 同時(shí)出現(xiàn)的陰性抗AMA 陽(yáng)性患者的人數(shù)相對(duì)較多,且其中AMA 可能是原發(fā)性肝硬化的重要標(biāo)志性抗體[13]。ACA 在肝硬化患者血液中的熒光檢出陽(yáng)性率一般為10% ~50%,其熒光檢測(cè)模式多見著絲點(diǎn)型、核膜型和陰性核點(diǎn)型[14]。由表 1 可知,ACA陽(yáng)性自身免疫性疾病的患者中,自身免疫性肝病核點(diǎn)型患者的人數(shù)最多。進(jìn)一步分析了肝硬化患者抗體AMA 與核膜型ACA 的相關(guān)性。結(jié)果顯示,核膜型ACA 滴度與核膜型AMA 抗體滴度之間無明顯相關(guān)性。隨后,選取22 例本研究中發(fā)現(xiàn)的ACA 陽(yáng)性患者和AMA 陰性經(jīng)臨床病理學(xué)診斷確診的ACA 陽(yáng)性和肝硬化患者,發(fā)現(xiàn)其自身的抗體以核膜型ACA 為主,少數(shù)患者伴有陽(yáng)性核膜型和陰性核點(diǎn)型。結(jié)果顯示,ACA 可能對(duì)AMA 陰性的肝硬化患者具有一定的病理學(xué)診斷意義,但還需深入研究。經(jīng)常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢查發(fā)現(xiàn),部分高滴度ACA 陽(yáng)性患者可能伴有急性貧血、肝功異常及血沉升高的臨床癥狀。結(jié)合高滴度ACA 的肝臟功能疾病類型分布,發(fā)現(xiàn)具有以下特點(diǎn):1)ACA 陽(yáng)性患者可同時(shí)出現(xiàn)在多種肝病中,其中在病毒性肝炎、酒精性肝病、藥物性肝損傷等多種肝病中均可同時(shí)檢出;2)高滴度ACA 表現(xiàn)陽(yáng)性的患者中,肝硬化期陽(yáng)性患者的比例更高,高滴度ACA 表現(xiàn)陽(yáng)性患者多見于肝硬化期,包括高滴度肝硬化患者在內(nèi)的由于各種原因肝炎引起的病毒性肝硬化患者。推測(cè)貧血現(xiàn)象可能與ACA 陽(yáng)性患者肝硬化有關(guān),導(dǎo)致血沉升高,但其具體作用機(jī)制尚不清楚。
綜上所述,ACA 對(duì)自身免疫功能性疾病的臨床診斷和治療均有一定特異性,且與自身免疫性肝病聯(lián)系緊密。但ACA 與自身免疫性肝病的相關(guān)性,仍需大量臨床數(shù)據(jù)進(jìn)行深入研究。