梅妮 李剛 陳一飛

摘 要 隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步和科學(xué)研究的不斷深入，基因修飾細(xì)胞治療作為一種新的治療方式受到社會(huì)各界的廣泛關(guān)注，并成為輔助腫瘤治療的一種新手段。各國(guó)對(duì)于其政策監(jiān)管各有不同。本文對(duì)歐洲藥品管理局（EMA）發(fā)布的關(guān)于基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品的監(jiān)管政策進(jìn)行梳理分析，以期為我國(guó)基因修飾細(xì)胞治療類產(chǎn)品的發(fā)展提供一些啟示與借鑒。

關(guān)鍵詞 基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品 監(jiān)管法規(guī) 歐洲藥品管理局

中圖分類號(hào)：R951 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：C 文章編號(hào)：1006-1533（2021）13-0014-03

Introduction of genetically modified cell therapy products and their regulatory regulations

MEI Ni， LI Gang， CHEN Yifei

（Shanghai Center for Drug Evaluation and Inspection， Shanghai 201203， China）

ABSTRACT In recent years， with the continuous progress of medical technology and the deepening of scientific research， genetically modified cell therapy as a new treatment method has attracted wide attention and become an important method for adjuvant tumor therapy. This article mainly introduces the current situation of the regulatory policies on cell therapy technology and products in European Medicines Agency （EMA） so as to provide some inspiration and reference for the development of genetically modified cell therapy products in China.

KEy WORDS genetically modified cells； regulatory policy； European Medicines Agency

基因修飾細(xì)胞治療既是臨床疾病治療的一種先進(jìn)的個(gè)體化治療技術(shù)，也可以作為藥物大規(guī)模生產(chǎn)，但各國(guó)對(duì)于基因修飾細(xì)胞治療的政策監(jiān)管各有不同。新型基因修飾技術(shù)的介入使得細(xì)胞治療領(lǐng)域更為復(fù)雜，因而也使得針對(duì)這個(gè)領(lǐng)域的管理充滿挑戰(zhàn)。因此，目前各國(guó)對(duì)于基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品均較審慎。近期歐洲藥品管理局（European Medicines Agency，EMA）基于基因修飾細(xì)胞領(lǐng)域的最新發(fā)展對(duì)《含基因修飾細(xì)胞藥品的質(zhì)量、非臨床和臨床研究指南》文件進(jìn)行了修訂，體現(xiàn)了EMA對(duì)該類產(chǎn)品的思考與觀點(diǎn)。因?yàn)榧?xì)胞和基因療法的科學(xué)領(lǐng)域正在發(fā)生巨大變化，新指南草案的評(píng)議者普遍歡迎此次修訂，該修訂文件也受到了行業(yè)的廣泛關(guān)注。我國(guó)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心于2021年2月發(fā)布《基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品非臨床研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》征求意見稿，公開征集意見和建議，也體現(xiàn)了我國(guó)監(jiān)管部門對(duì)此類產(chǎn)品的關(guān)注。

本文對(duì)歐盟基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品的相關(guān)法規(guī)政策框架進(jìn)行簡(jiǎn)要介紹，以期為我國(guó)基因修飾細(xì)胞治療類產(chǎn)品的發(fā)展提供一些啟示與借鑒。

1 基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品簡(jiǎn)介

1.1 產(chǎn)品定義

根據(jù)我國(guó)新發(fā)布的指導(dǎo)原則（征求意見稿），將基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品定義為經(jīng)過基因修飾（如調(diào)節(jié)、修復(fù)、替換、添加或刪除基因序列等）以改變其生物學(xué)特性、擬用于治療人類疾病的活細(xì)胞產(chǎn)品，如基因修飾的免疫細(xì)胞[如T細(xì)胞、自然殺傷（natural killer，NK）細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等]和基因修飾的干細(xì)胞（如造血干細(xì)胞、多能誘導(dǎo)干細(xì)胞等）等[1]。

1.2 產(chǎn)品類型

目前較受關(guān)注的基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品包括嵌合抗原受體T細(xì)胞（chimeric antigen receptor T cell，CAR-T）、T細(xì)胞受體（T cell receptor，TCR）基因工程化的T細(xì)胞（TCR-T）等。

1.2.1 CAR-T細(xì)胞技術(shù)產(chǎn)品

在眾多的免疫細(xì)胞療法中，基因修飾的免疫細(xì)胞如CAR-T和CAR-NK細(xì)胞近幾年備受關(guān)注?；蛐揎椀拿庖呒?xì)胞是當(dāng)前腫瘤免疫療法一大主要研究方向，在血液腫瘤以及實(shí)體瘤治療方面具有廣闊的應(yīng)用前景?？茖W(xué)家經(jīng)過多年研究，從癌癥患者體內(nèi)分離、提取免疫細(xì)胞，通過體外培養(yǎng)形成基因修飾的免疫細(xì)胞，再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，達(dá)到治療腫瘤的目的。

CAR-T是指通過基因修飾技術(shù)，將帶有特異性抗原識(shí)別結(jié)構(gòu)域及T細(xì)胞激活信號(hào)的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)入T細(xì)胞，使T細(xì)胞通過直接與腫瘤細(xì)胞表面的特異性抗原相結(jié)合而激活，通過釋放穿孔素、顆粒酶素B等直接殺傷腫瘤細(xì)胞，同時(shí)還通過釋放細(xì)胞因子募集人體內(nèi)源性免疫細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞，從而達(dá)到治療腫瘤的目的，而且還可形成免疫記憶T細(xì)胞從而獲得特異性的抗腫瘤長(zhǎng)效機(jī)制。目前，CAR-T細(xì)胞對(duì)多種血液腫瘤顯示了非常好的臨床效果，對(duì)實(shí)體瘤治療也表現(xiàn)出了非常大的潛力[2]。

CAR-T細(xì)胞免疫治療技術(shù)的開創(chuàng)和成功應(yīng)用為腫瘤的治療甚至治愈帶來了希望。為了提高CAR-T細(xì)胞免疫療法的特異性、安全性和通用性，使用基因編輯技術(shù)改造CAR-T細(xì)胞已變得至關(guān)重要。原代免疫細(xì)胞由于增殖能力有限一定程度上降低了基因編輯效率。

1.2.2 TCR-T

TCR-T細(xì)胞療法是篩選和鑒定能夠特異性結(jié)合、選擇靶點(diǎn)抗原的TCR序列，通過基因工程手段將其轉(zhuǎn)入到患者外周血來源的T細(xì)胞中（或異源T細(xì)胞），再將改造后的T細(xì)胞回輸至患者體內(nèi)，使其特異性地識(shí)別和殺傷表達(dá)抗原的腫瘤細(xì)胞，從而達(dá)到治療腫瘤的目的。與CAR-T細(xì)胞相比，TCR-T細(xì)胞療法近年來被認(rèn)為在實(shí)體瘤治療中具有更大的潛力，主要因?yàn)門CR-T細(xì)胞識(shí)別的抗原是由主要組織相容性復(fù)合物（major histocompatibility complex，MHC）提呈的抗原肽，因而可以靶向更廣泛的抗原，包括胞內(nèi)抗原和膜抗原[3]。

1.2.3 基因修飾干細(xì)胞

干細(xì)胞包括各種具有自我更新和分化特性的細(xì)胞。所涉及的細(xì)胞包括多能體細(xì)胞，如造血干細(xì)胞（HSC）、間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）以及多能干細(xì)胞，如人類胚胎干細(xì)胞（hESC）和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSCs）。ESCs和iPSCs具有無限增殖和分化成其他類型細(xì)胞的能力。將ESCs或iPSCs分化為NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞或T細(xì)胞等免疫細(xì)胞可以為癌癥的細(xì)胞免疫治療提供不竭的細(xì)胞來源。隨著基因修飾技術(shù)的出現(xiàn)，經(jīng)過改造的干細(xì)胞衍生物作為新一代干細(xì)胞，其功能、特異性和反應(yīng)性都比天然細(xì)胞更好。擁有無限增殖能力和T細(xì)胞分化能力的多能干細(xì)胞（PSCs），尤其是不涉及倫理問題的iPSCs成為基因修飾和無限產(chǎn)生T細(xì)胞的理想選擇[4]。

2 歐盟基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品監(jiān)管最新進(jìn)展

2.1 基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品的定義范疇

EMA基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品的定義：用于治療效果（基因治療藥物產(chǎn)品）或用于細(xì)胞治療/組織工程產(chǎn)品開發(fā)的制造目的（例如生成 iPSCs），這些細(xì)胞后來分化為體細(xì)胞或組織工程藥物產(chǎn)品[5]。對(duì)于細(xì)胞的基因改造，新的基因組編輯技術(shù)，如 CRISPR-Cas、鋅指核酸酶（ZFNs）或 TALENs 已被添加到更傳統(tǒng)的基因轉(zhuǎn)移方法中。例如：基因修飾的細(xì)胞，用于單基因遺傳性疾病治療；基因修飾的樹突狀細(xì)胞或細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞用于癌癥免疫治療；基因修飾的自體軟骨細(xì)胞用于軟骨修復(fù)；基因修飾的祖細(xì)胞，用于心血管疾病的治療或體內(nèi)標(biāo)記研究，尤其是體內(nèi)生物分布或體內(nèi)分化分析；基因修飾的成骨細(xì)胞用于骨折修復(fù)；基因修飾的細(xì)胞含有一種特殊的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，可以在在特定條件下激活之后安全使用。

2.2 含基因修飾細(xì)胞藥品的質(zhì)量、非臨床和臨床研究指南

2020年11月3日EMA更新了《含基因修飾細(xì)胞的醫(yī)用產(chǎn)品的質(zhì)量、非臨床和臨床研究指南》（Guideline on quality， non-clinical and clinical aspects of medicinal products containing genetically modified cells）文件[5]。該指南涵蓋了基因修飾細(xì)胞治療藥物相關(guān)的質(zhì)量、非臨床和臨床以及藥物警戒和環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的建議，將于2021年6月1日生效 ， 屆時(shí)將取代2012年版本的指南。

這次修訂是基于EMA在包括CAR-T細(xì)胞、誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞和基因編輯等新技術(shù)方面的經(jīng)驗(yàn)。EMA在新指南中表示：“EMA已經(jīng)認(rèn)識(shí)到，這是一個(gè)不斷發(fā)展的領(lǐng)域，該指南應(yīng)可以在合適的情況下應(yīng)用于該領(lǐng)域的任何新產(chǎn)品?！?/p>

2.2.1 指南簡(jiǎn)介

該指南定義了基因修飾細(xì)胞，并為開發(fā)和評(píng)估含有基因修飾細(xì)胞的藥物產(chǎn)品提供了指導(dǎo)。它的重點(diǎn)是基因修飾細(xì)胞的質(zhì)量，非臨床研究，安全性和功效要求。質(zhì)量部分主要針對(duì)目標(biāo)細(xì)胞群體的基因修飾過程和基因修飾的細(xì)胞產(chǎn)品工業(yè)化的質(zhì)量要求。非臨床部分涉及評(píng)估該產(chǎn)品的治療效果驗(yàn)證和組織分布，識(shí)別潛在的靶器官毒性并獲得有關(guān)臨床給藥途徑、劑量選擇等信息。臨床部分進(jìn)一步論述了產(chǎn)品的安全性評(píng)估，隨訪原則和藥物警戒性要求。

該指南的第一個(gè)修訂版總體上包括了基因修飾細(xì)胞領(lǐng)域的最新發(fā)展。質(zhì)量部分已更新，重點(diǎn)是起始物料（特別考慮到基因修飾試劑/工具的影響），可比性和驗(yàn)證。非臨床部分補(bǔ)充了當(dāng)前對(duì)進(jìn)行非臨床研究的要求的考量，增加了針對(duì)CAR-T細(xì)胞、TCR產(chǎn)品以及誘導(dǎo)多能干細(xì)胞等的科學(xué)原理和指導(dǎo)部分。

2.2.2 適用范圍

該指南的范圍涉及基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品。它的重點(diǎn)是集中在基因修飾細(xì)胞的質(zhì)量控制、非臨床和臨床研究方面。無論是否出于治療或其他目的進(jìn)行了基因修飾，都包括了所有基因修飾細(xì)胞案例?；蛐揎椏赏ㄟ^多種方法獲得（例如病毒和非病毒載體，mRNA，基因組編輯工具）?；蛐揎椀募?xì)胞可以是人類來源的（自體或同種異體）或動(dòng)物來源的（異種細(xì)胞），既可以是原代細(xì)胞系也可以是已建立的細(xì)胞系。

本指南的范圍不包括微生物來源的基因修飾細(xì)胞。在實(shí)際治療方案中，基因修飾的細(xì)胞可以單獨(dú)使用，也可以與醫(yī)療設(shè)備結(jié)合使用。

2.2.3 歐盟關(guān)于基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品監(jiān)管的法律文件

該指南應(yīng)與歐盟2001/83/EC指令（曾被2009/120 EC指令修訂）中附件Ⅰ的前言、一般原則和第Ⅳ部分以及《先進(jìn)治療藥物產(chǎn)品》（EC） No 1394/2007相結(jié)合使用。

該指南同時(shí)也應(yīng)遵循以下總體指導(dǎo)原則：凡是涉及基因修飾細(xì)胞相關(guān)的所有細(xì)胞問題，都應(yīng)符合《關(guān)于基于人類細(xì)胞的藥品的指南》（EMEA/ CHMP/410869/2006）；《含基因修飾細(xì)胞藥品的質(zhì)量、非臨床和臨床研究指南》（EMA/CAT/80183/2014）。

此外，人源細(xì)胞的捐贈(zèng)、采購(gòu)和測(cè)試必須符合指令2004/23/EC以及指令2006/17/EC和2006/86/EC中的技術(shù)指導(dǎo)原則。如果使用人體血液中的成分作為起始物料，人體血液和血細(xì)胞的收集、測(cè)試、加工、儲(chǔ)存和分配必須符合指令2002/98/EC。

EMA對(duì)基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品的監(jiān)管法規(guī)主要包括《人體細(xì)胞藥物產(chǎn)品指南》（EMEA/CHMP/410869/2006）、《含基因修飾細(xì)胞藥品的質(zhì)量、非臨床和臨床研究指南》（EMA/CAT/80183/2014）、《異種細(xì)胞藥物指南》（EMEA/ CHMP/CPWP/83508/2009）、《關(guān)于干細(xì)胞醫(yī)用產(chǎn)品的思考》（EMA/CAT/571134/2009）、《臨床試驗(yàn)中研究性先進(jìn)治療醫(yī)用產(chǎn)品的質(zhì)量、非臨床和臨床要求指南（草案）》（EMA/CAT/852602/2018）、《根據(jù)適用于ATMPs的指令2001/83/EC（EMA/CAT/CPWP/686637/2011）第四部分附錄Ⅰ，關(guān)于基于風(fēng)險(xiǎn)的方法指南》、《由基因修飾生物組成或含有基因修飾生物的醫(yī)用產(chǎn)品環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估指南》（EMEA/CHMP/BWP/473191/2006-Corr）、《基因治療醫(yī)用產(chǎn)品環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估科學(xué)要求指南》（EMEA/CHMP/ GTWP/125491/2006）以及《針對(duì)先進(jìn)治療醫(yī)用產(chǎn)品的良好臨床實(shí)踐指南》。

3 討論

截至2021年4月，在國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心（Center for Drug Evaluation，CDE）官網(wǎng)上，以“CAR-T”為關(guān)鍵詞，檢索到17個(gè)正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)的產(chǎn)品；以“基因修飾”為關(guān)鍵詞，正在進(jìn)行的臨床試驗(yàn)的產(chǎn)品為：靶向CD30嵌合抗原受體基因修飾的自體T細(xì)胞注射液（申辦方為：武漢波睿達(dá)生物科技有限公司，登記號(hào)為：CTR20202394），適應(yīng)證為霍奇金淋巴瘤、間變大細(xì)胞淋巴瘤、CD30+復(fù)發(fā)/難治性血液腫瘤患者。

近年來，隨著基因修飾細(xì)胞技術(shù)等理論、技術(shù)和臨床醫(yī)療探索研究的發(fā)展和日益完善，基因修飾細(xì)胞治療擬作為藥品研發(fā)已成為熱點(diǎn)。

我國(guó)針對(duì)包括基因修飾在內(nèi)的細(xì)胞治療產(chǎn)品的監(jiān)管發(fā)布了一系列文件，包括《CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品質(zhì)量控制檢測(cè)研究及非臨床研究考慮要點(diǎn)》《細(xì)胞治療產(chǎn)品研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》（試行）、《人的體細(xì)胞治療及基因治療臨床研究質(zhì)控要點(diǎn)》等。2021年，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心發(fā)布了《基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品非臨床研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》（試行）征求意見稿，國(guó)內(nèi)基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品上市的道路逐漸打通。

由于基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品的物質(zhì)組成和作用方式與一般的化學(xué)藥品和生物制品存在明顯不同，基因修飾細(xì)胞技術(shù)仍然可能存在長(zhǎng)遠(yuǎn)和不可預(yù)期的風(fēng)險(xiǎn)，并且還可能隨著技術(shù)的持續(xù)發(fā)展而發(fā)生變化。伴隨合成生物學(xué)和基因修飾技術(shù)的進(jìn)步，圍繞罕見病和重大、難治疾病等展開的醫(yī)學(xué)實(shí)踐不斷探索著基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品的療效。相信通過研發(fā)者和監(jiān)管方的共同努力，基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品將為罹患復(fù)雜難治疾病的患者帶來新的希望。

參考文獻(xiàn)

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