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        茶樹油研究進(jìn)展以及在豬生產(chǎn)中的應(yīng)用

        2021-08-10 08:08:20楊培川馬吉飛
        豬業(yè)科學(xué) 2021年7期
        關(guān)鍵詞:精油豬只毒性

        楊培川,馬吉飛

        (天津農(nóng)學(xué)院動物科學(xué)與動物醫(yī)學(xué)學(xué)院,天津 300384)

        抗生素是預(yù)防和控制豬只疾病的主要手段之一,但長期使用或不當(dāng)添加會降低藥物的敏感性并產(chǎn)生耐藥性,隨著抗生素類飼料添加劑被限制,新型替抗飼料添加劑成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。近年來,植物精油作為天然抗菌物質(zhì)在醫(yī)藥和飼料方面應(yīng)用增多,其中茶樹油具有良好的廣譜殺菌保健及防蟲驅(qū)蚊作用,并有宜人香氣,是公認(rèn)優(yōu)良的天然芳香劑、抗菌劑和防腐劑,在日化、醫(yī)藥及食品等行業(yè)中都得到了廣泛應(yīng)用。文章對茶樹油的研究進(jìn)展以及在豬只生產(chǎn)中的應(yīng)用進(jìn)行了綜述,旨在為茶樹油的推廣與開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

        1 茶樹油的簡介

        1.1 茶樹油的來源

        茶 樹 油(Tea tree oil,TTO)是桃金娘科(Melaleuca)白千層屬(Melaleuca)灌木樹種——互葉白千層(Melaleuca alternifolia)的新鮮枝葉經(jīng)水蒸氣蒸餾得到的芳香精油,產(chǎn)油率為1%~3%(v/w),也可以通過減壓精餾、分子蒸餾、溶劑萃取等方法分離并精制。互葉白千層原生于澳大利亞,主產(chǎn)于澳大利亞東南沿海,因此該精油又稱“澳洲茶樹油”。澳大利亞年產(chǎn)量大約為500 t。我國也在生產(chǎn)茶樹油,我國的主要產(chǎn)區(qū)在廣西、廣東和云南等地,年產(chǎn)量約為數(shù)十噸,主要用于出口。

        1.2 茶樹油的成分

        茶樹油是一種淡黃綠色或幾乎無色的可流動液體,具有溫暖芳香氣息,其中萜烯和松油醇的香氣更突出。茶樹油含有100多種成分,主要為單萜類、蓓半單萜類及其衍生物,以松油烯-4-醇、γ-萜品烯和α-萜品烯為主,占總量的70%。根據(jù)茶樹油的主要成分和用途,將澳洲茶樹油分為3個生化類型:4-松油醇型(含 4-松油醇在 30% 以上)、1,8-桉葉素型(含 1,8-桉葉素在60% 以上)、混合型(含有4 -松油醇和1,8 -桉葉素);前兩種茶樹油的應(yīng)用較為廣泛,而混合型的茶樹油目前利用較少,一般與1,8-桉葉素型搭配在農(nóng)藥中或重整精油使用。

        1.3 茶樹油的安全性和標(biāo)準(zhǔn)

        1.3.1 茶樹油的毒性

        茶樹油具有一定的毒性,若使用方法不當(dāng),對于人和動物可以產(chǎn)生毒性損害,尤其在茶樹油被氧化后,其單萜烯可以轉(zhuǎn)化形成毒性和過敏性物質(zhì),應(yīng)引起重視。常見的毒性反應(yīng)如下。

        1)神經(jīng)系統(tǒng)毒性反應(yīng)

        茶樹油使用不當(dāng)或被誤食是有害的,若兒童誤食10~25 mL,會導(dǎo)致其發(fā)生共濟(jì)失調(diào)、嗜睡、定向障礙、半意識狀態(tài)、出現(xiàn)幻覺或無法行走的情況。 在大鼠食入≤1.5 g/kg后,大鼠表現(xiàn)為嗜睡和共濟(jì)失調(diào),SD大鼠空腹灌胃后,在4 640 mg/kg(b.wt.)劑量下10 min 后出現(xiàn)興奮,30 min萎靡;喂毒4 h后在1 000 ~ 4 640 mg/kg(b.wt.)劑量下,部分SD大鼠出現(xiàn)倒伏現(xiàn)象,24 h后部分死亡,但存活大鼠4 d后恢復(fù)正常;在雄性鳳尾鸚鵡羽翼皮膚上直接滴入3滴茶樹油后會出現(xiàn)嚴(yán)重的抑郁癥狀。

        2)皮膚毒性反應(yīng)

        約有3.4%的人接觸濃度為100%茶樹油會發(fā)生過敏性接觸性皮炎,但是接觸低于25%濃度的茶樹油很少有人發(fā)生過敏;豚鼠皮膚過敏反應(yīng)試驗(yàn)顯示,在皮膚的涂藥區(qū)可見紅斑、水腫,皮膚致敏率分別為66.67%、86.67%,致敏強(qiáng)度為強(qiáng)致敏;茶樹油對兔的一次或多次皮膚刺激試驗(yàn)中,可見高濃度茶樹油組對兔皮膚有輕度刺激反應(yīng)。對鼠急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)中表現(xiàn)出低毒性,其LD50(半數(shù)致死量)均大于3 000 mg/kg(b.wt.)。

        3)眼毒性反應(yīng)

        在兔的急性眼刺激試驗(yàn)中,如果不沖洗,初期表現(xiàn)為中度刺激,隨著時間的延長,刺激強(qiáng)度降低,7 d 后恢復(fù)為無刺激性;如果通過4~30 s的水沖洗后,茶樹油表現(xiàn)出無刺激性至輕度刺激性。也有報道對兔急性眼刺激試驗(yàn)中,觀察到茶樹油對角膜和虹膜均沒有刺激性,對結(jié)膜有輕度刺激,會造成結(jié)膜充血,但癥狀可在48 h后恢復(fù);如果當(dāng)1,8-桉葉油素在空氣中的濃度達(dá)到為175 mg/L時會刺激人的眼睛,與眼睛接觸時會造成嚴(yán)重的疼痛和眼瞼痙攣,還有可能造成角膜上皮結(jié)膜充血和輕微的短暫性損傷。

        4)激素樣作用

        有報道稱,茶樹油精油具有雌激素(雌激素樣)和抗雄激素(睪酮阻斷)的作用,但是尚未找到與青春期前的女性乳房發(fā)育和兒童早熟有關(guān)的依據(jù)。

        5)內(nèi)臟器官毒性

        幼兒、孕婦或哺乳期婦女以及患有嚴(yán)重肝腎疾病的婦女使用茶樹油的安全性尚未確定。秦文文等(2018)在茶樹油的亞慢性毒性試驗(yàn)表明,高濃度的茶樹油對大鼠的肝、腎、脾會產(chǎn)生一定的毒性,可能導(dǎo)致貧血,對心臟、肺的毒性作用不明顯。

        6)致死性

        董活波等(2013)采用大、小鼠經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)結(jié)果顯示,茶樹油皮膚消毒液的LD50均大于5 000 mg/kg(b.wt.),屬實(shí)際無毒級;對雌、雄SD大鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)的LD50均超過1 400 mg/kg(b.wt.),急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)LD50均大于3 000 mg/kg(b.wt.)表現(xiàn)出低毒性。

        以上研究說明高濃度茶樹油雖有一定的毒性作用,但是表現(xiàn)出低毒安全及無刺激性等優(yōu)點(diǎn),有必要控制TTO用量和使用途徑,以確保產(chǎn)品品質(zhì)和安全性。

        1.3.2 茶樹油的標(biāo)準(zhǔn)

        最早的茶樹油(松油烯-4-醇型)國外標(biāo)準(zhǔn)有澳大利亞標(biāo)準(zhǔn)( 2782—1985)、美國精油協(xié)會(EOA)標(biāo)準(zhǔn)和國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO) 標(biāo) 準(zhǔn)( IS04730.1996), 這些標(biāo)準(zhǔn)對(精)油中的生物活性主成分松油烯醇-4和1,8-桉葉油素等規(guī)定存在較大差異。我國從引進(jìn)種植到茶樹油生產(chǎn)過程中,參照國外標(biāo)準(zhǔn)建立了1個地方標(biāo)準(zhǔn)和3個國家標(biāo)準(zhǔn)(見表1),這些標(biāo)準(zhǔn)體系的建立推動了國內(nèi)茶樹油產(chǎn)業(yè)的進(jìn)一步標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)?;l(fā)展。

        表1 澳大利亞、美國、國際化標(biāo)準(zhǔn)組織以及國家標(biāo)準(zhǔn)的互葉白千層(精油)主要成分對比 %

        2 茶樹油的生理功能及機(jī)理

        2.1 抗菌作用

        研究表明,茶樹油對枯草桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、白色念珠菌、黑曲霉素、皮膚癬菌、絲狀真菌、支原體、馬鏈球菌等多種病原微生物的生長有抑制作用,其殺菌和抑菌能力是苯酚的11~13倍。TTO以一種膜破壞劑的形式發(fā)揮殺菌作用,通過破壞膜結(jié)構(gòu),使細(xì)胞內(nèi)鉀離子泄漏,抑制細(xì)胞呼吸,刺激細(xì)胞自溶,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)電子密度物質(zhì)損失,從而改變細(xì)胞形態(tài)學(xué)。Zió?kowska-Klinkosz M等(2016)觀察到茶樹油對臨床分離的193株無芽孢厭氧菌中的革蘭氏陽性菌抑制效果高于革蘭氏陰性菌。

        2.2 抗病毒作用

        研究表明,TTO對多種病毒引起的疾病有較好的抑制作用。

        1)流感病毒。Garozzo等(2010)觀察到茶樹油具有抑制甲型流感病毒的作用;Fahim FA等(1999)發(fā)現(xiàn)茶樹油可以與溶酶體室酸化干擾,抑制流感病毒脫殼,從而抑制病毒的復(fù)制。 Li X(2013)發(fā)現(xiàn)0.010%茶樹油能夠干擾正常的病毒膜融合過程,防止流感病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞。Usachev等(2016)發(fā)現(xiàn)TTO對甲型流感病毒的抗病毒活性優(yōu)于桉樹油,125 μg/L TTO對0.5×107PFU/mL甲型流感病毒處理5 min時,致死率高于99%。王璞(2014)采用澳洲茶樹油與水、維生素E混合制成添加劑,作為雛雞和仔豬飲水劑,可以提高動物免疫力,預(yù)防禽流感、感冒和其他疾病。

        2)皰疹病毒。 Schnitzler P等(2011)研究發(fā)現(xiàn),茶樹油和薄荷油有體外顯著抗皰疹病毒的活性,具有抗炎、止痛的特性,可以加速唇皰疹愈合過程。

        3)口蹄疫病毒。含有茶樹油的中藥制劑,以清熱解毒、涼血消癰、活血祛瘀為主,可以用于抗口蹄疫病毒感染。

        4)脊髓灰質(zhì)炎病毒。0.5%~1.0%茶樹油對懸液中的脊髓灰質(zhì)炎病毒(poliovirus,PV)有明顯的殺滅作用。

        2.3 抗真菌作用

        2009年Van Vuuren SF研究表明茶樹油、百里香油、迷迭香油結(jié)合兩性霉素對白色念珠菌有抑制作 用。Francisconi RS等(2020) 通過細(xì)胞增殖試驗(yàn)表明松油醇與TTO均可抑制白色念珠菌的生長,17.92 mg/mL的TTO和8.86 mg/mL的松油烯-4-醇作用60 s能干擾白色念珠菌生物膜的形成。Lis-Balchin M等(2000)通過透射電子顯微鏡觀察到TTO能穿透真菌的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞后穿透細(xì)胞器膜,以達(dá)到抑菌效果,并研究了茶樹油對白色念珠菌的最低殺菌濃度。2015年Di Vito M發(fā)現(xiàn) 100%、75%、50%、25%、10%、5%、1%的茶樹油對于來自傷口的真菌均有明顯的抑制作用。D'Auria FD(2015)報道了茶樹油對酵母菌的最低抑菌濃度(MIC)為0.12%~0.50%(v/v),對皮膚癬菌的MIC為 0.12% ~ 1%(v/v), 因 為茶樹油的親脂性質(zhì),使它能夠穿透皮膚,適合于局部治療真菌性黏膜和皮膚感染。Wang N等(2020)觀察到茶樹油抑制灰霉病菌孢子萌發(fā)和菌絲生長,誘導(dǎo)灰霉病菌線粒體功能障礙,能抑制線粒體的三羧酸循環(huán)、丙酮酸代謝、氨基酸代謝和膜的相關(guān)途徑,并能促進(jìn)鞘脂代謝,加速真菌細(xì)胞死亡。

        2.4 抗寄生蟲作用

        1)螨蟲。澳大利亞茶樹油及其提取物松油素-4-醇對蠕形螨相關(guān)疾病有緩解作用,其可能的作用是降低螨數(shù)量,減輕蠕形螨相關(guān)癥狀,調(diào)節(jié)機(jī)體免疫系統(tǒng),特別是炎癥反應(yīng)。室外試驗(yàn)表明,10%的茶樹油可以除掉100%屋塵螨;100%的茶樹油可以在3.7 min內(nèi)殺死毛囊螨;50%的茶樹油在14.8 min可以殺死毛囊螨;采用1%的茶樹油治療豬的癢螨,治愈率為98.5%;Walton SF等(2018)發(fā)現(xiàn)茶樹油能明顯縮短患者疥瘡上螨蟲的存活時間,殺螨的主要有效成分為松油烯-4-醇。

        2) 吸 血 昆 蟲。Terriquez JA(2019)觀察到30%的茶樹油對鼠的吸血昆蟲有效。Fonseca-Santos和Bruno(2019)觀察到茶樹油可以驅(qū)蚊。

        3)血茅線蟲。Grando TH(2016)茶樹油(0.75 mL/kg)、茶樹油納米制劑、4-松油醇(0.5 mL/kg)可以抗試驗(yàn)性沙鼠的血茅線蟲感染,減少感染量分別為 46.36%;48.64%和 43.18%。對肝腎無損傷,可以降低線蟲引起的肝臟谷丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶 (AST)的水平。

        4)驢虱。Ellse L(2016)采用5%的茶樹油和薰衣草油,分別對冬季驢舍中的驢,噴灑被毛,用藥后2周檢查發(fā)現(xiàn),茶樹油和薰衣草油對皮毛沒有損傷,對驢虱具有很好抑制作用(78%)。

        5)利什曼蟲和錐蟲?。篢TO對寄生蟲具有較好的殺蟲活性。Mikus等(2000)發(fā)現(xiàn)TTO質(zhì)量濃度分別為403 mg/mL和0.5 mg/mL時,利什曼蟲和錐蟲病減少了50%,還發(fā)現(xiàn)松油烯-4-醇是TTO抗蟲活性的主要成分,用TTO進(jìn)行治療能夠延長被伊氏錐蟲感染的大鼠的壽命,并保持低寄生蟲血癥。

        TTO作為天然植物精油,在開發(fā)新型殺蟲劑并治療豬寄生蟲感染方面具有潛在的應(yīng)用價值。

        2.5 抗腫瘤

        Bozzuto G等(2010)發(fā)現(xiàn)TTO及其主要活性成分terpinen-4-ol也可以干擾藥物敏感性和耐藥性黑色素瘤細(xì)胞的遷移和侵襲過程。Calcabrini A等(2004)觀察到茶樹油能夠抑制人類M14黑色素瘤細(xì)胞的生長。

        2.6 促生長

        2015年,王琦發(fā)明了一種用于替代飼料抗生素的天然茶樹油添加劑,可以提高動物機(jī)體免疫力與增重,能替代家禽、家畜用抗生素。2018年,戴進(jìn)松公開了一種含有茶樹油用于解除動物霉菌毒素中毒的飼料添加劑的配方,可以應(yīng)用于豬只生產(chǎn)過程中。在動物飼料和食品、消毒劑方面抗菌作用,Antonio Diego Brand?o Melo(2015)對比發(fā)現(xiàn),茶樹油>白色百里香>牛至油。郭乙冰(2020)研究發(fā)現(xiàn)在日糧中添加一定量的茶樹油可以提高贛西山羊生長性能和肌肉品質(zhì), 改善贛西山羊腸道微生物區(qū)系,提高腸黏膜抗氧化能力以及腸黏膜的免疫能力。

        2.7 抗氧化、抗炎、提高機(jī)體免疫力

        茶樹油對二苯代苦味胼基自由基 (DPPH自由基)有很好的清除能力 ,其所含的α-萜品烯 、γ-萜品烯等成分是天然的抗氧化劑。Matheus D(2014)觀察到茶樹油處理組大鼠的血清細(xì)胞因子水平降低。唐永富等(2012)采用茶樹油(0.005 μL/mL)干預(yù)未成熟的樹突狀細(xì)胞(DC)48 h后,觀察到茶樹油能夠增強(qiáng)DC刺激淋巴細(xì)胞增殖的能力,降低樹突狀細(xì)胞的吞噬功能。初步證實(shí)茶樹油可以促進(jìn)樹突狀細(xì)胞的表型和功能成熟。

        3 茶樹油在豬生產(chǎn)中的應(yīng)用

        目前,TTO是具有極大應(yīng)用價值和發(fā)展?jié)摿Φ奶烊恢参锞椭?,因其廣譜抑菌、抗病毒、抗寄生蟲等被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、食品等領(lǐng)域,已經(jīng)被開發(fā)應(yīng)用和具有潛在應(yīng)用價值的產(chǎn)品有殺菌劑、防腐劑、清潔劑、食品添加劑、飼料添加劑等,在養(yǎng)豬生產(chǎn)過程中也有著巨大的應(yīng)用潛力。

        3.1 仔豬

        張逸(2018)研究發(fā)現(xiàn),不同劑量茶樹油可促進(jìn)斷奶仔豬胰腺的發(fā)育,并且對胰腺組織抗氧化功能具有促進(jìn)作用。董麗等(2017)研究發(fā)現(xiàn)100 mg/kg茶樹油可提高斷奶仔豬血清、肝臟和腸黏膜抗氧化酶活性,減少血清、空腸黏膜過氧化氫(H2O2)的含量,進(jìn)而提高斷奶仔豬的機(jī)體抗氧化功能,總體效果優(yōu)于抗生素。在仔豬飼料添加茶樹油能夠顯著提高仔豬血清中溶菌酶的含量。也有報道稱,茶樹油飼料添加劑(4 g/kg)可促進(jìn)斷奶仔豬生長并降低仔豬腹瀉率,促進(jìn)仔豬腸道發(fā)育,提升免疫功能的作用。韋云規(guī)(2018)也發(fā)明了一種含有茶樹油的復(fù)合精油制劑,可防治乳仔豬的疾病,并且對改善仔豬的生存環(huán)境、促進(jìn)仔豬的生長有所裨益。

        張永勝(2020)發(fā)現(xiàn),茶樹油可以通過降低仔豬回腸上皮細(xì)胞IPI-2I細(xì)胞免疫應(yīng)激狀態(tài)下早期凋亡和晚期凋亡細(xì)胞數(shù)量,提高活細(xì)胞數(shù)量,降低其細(xì)胞上清液中白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、腫瘤壞死因子 -α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)分泌,從而降低細(xì)胞中IL-1β、TNF-α mRNA表達(dá)量,進(jìn)而緩解脂多糖(LPS)對IPI-2I細(xì)胞刺激產(chǎn)生的免疫應(yīng)激,這可能與茶樹油對TLR4/NF-kB信號通路的調(diào)節(jié)有關(guān),其中0.03%劑量茶樹油緩解IPI-2I細(xì)胞免疫應(yīng)激效果最佳。仲召鑫(2020)利用H2O2刺激仔豬回腸上皮 IPI-2I細(xì)胞,建立氧化應(yīng)激模型,觀察到茶樹油能夠提高氧化應(yīng)激下IPI-2I細(xì)胞中細(xì)胞活力、降低細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)相對產(chǎn)生量、降低丙二醛(MDA)含量、提高抗氧化酶活力以及提高部分抗氧化相關(guān)基因的表達(dá)量,從而緩解氧化應(yīng)激帶來的損傷,其中0.025% TTO濃度效果最佳。

        3.2 育肥豬

        封飛飛等(2018)發(fā)現(xiàn),在飼料中添加200 mg/kg茶樹油對育肥豬生長性能和肉質(zhì)的改善效果較好,添加TTO能使育肥豬末重和平均日增重顯著增加,背最長肌剪切力顯著降低、肌內(nèi)脂肪含量顯著增加。 曹江山(2017)發(fā)明了一種含有茶樹油和其他精油的植物精油型保育豬飼料復(fù)合添加物,可以提高豬只抗應(yīng)激力和健康水平,改善飼料利用率。楊珍(2017)觀察到澳洲茶油樹精油能夠明顯提高育肥豬的生產(chǎn)性能,能夠提高豬只肌肉品質(zhì),尤其增加肌肉中組氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸的含量,能夠提高豬只肌肉不飽和脂肪酸的總量,也能提高豬只細(xì)胞中溶菌酶、免疫球蛋白G(IgG)的水平并增加 CD4+/CD8+比值,具有提高豬只機(jī)體免疫功能的作用。孟杰民、馬吉飛等(2019)提供的茶樹精油腸溶包衣小丸能夠有效解決茶樹精油易揮發(fā)及特殊精油氣味影響豬只采食的問題,有效降低腹瀉等疾病的發(fā)生率,顯著增加豬只采食量,提高飼料轉(zhuǎn)化效率,安全性高、無耐藥性,通過飼料中添加可替代飼料添加劑中促生長抗生素的使用。

        3.3 豬精液保存

        在對豬人工授精精液的保存效果方面,茶樹油(0.4 mg/mL)和迷迭香精油與氨芐西林有相似的抗菌作用,但是在較低的濃度下,茶樹油的有效性高于迷迭香,有望作為生殖生物技術(shù)抗菌劑使用。

        4 展望

        茶樹油產(chǎn)品的使用安全性獲得了歐美等許多國家的認(rèn)可,目前已開發(fā)應(yīng)用于食品、藥品、化妝品、飼料等領(lǐng)域的產(chǎn)品中,具有良好市場的開發(fā)價值和發(fā)展?jié)摿?。但是我國對茶樹油的研究和?yīng)用時間尚較短,因此應(yīng)加強(qiáng)對茶樹油的基礎(chǔ)研究和應(yīng)用研究,尤其要針對其毒性、易揮發(fā)、氧化等問題,充分保護(hù)TTO的活性成分,開發(fā)出適合畜禽使用的藥物或替抗飼料添加劑,提高養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。

        (參考文獻(xiàn)略)

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