王智，王娟，徐雷，趙東明△

黃芩苷是黃芩的有效提取物之一［1］，現(xiàn)代藥理學(xué)證實其具有抗炎［2］、抗腫瘤［3］、降壓［4］的作用，對于擴張型心肌病心室重構(gòu)亦有較好的抑制作用［5］。已有研究證實，黃芩苷對異丙腎上腺素（isoprenaline，ISO）所致的心肌損傷具有保護作用，可穩(wěn)定血流動力學(xué)指標，但并未進行系統(tǒng)深入的研究［6］。本課題組前期研究表明，黃芩苷對脂多糖損傷的人心肌H9c2細胞具有一定的保護作用，可減少心肌細胞凋亡，抑制線粒體損傷，提高細胞存活率［7］。有文獻報道，當心肌細胞發(fā)生過度內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）時，會引起Kv4.3、Nav1.5等離子通道異常表達，導(dǎo)致心律失常［8］。目前，鮮有黃芩苷對心力衰竭大鼠心室肌細胞ERS與心律失常關(guān)系的相關(guān)報道。本研究以心室肌細胞ERS-肌電穩(wěn)定性為切入點，探討黃芩苷對ISO所致心力衰竭大鼠室性心律失常、心功能的影響及其與心室肌細胞ERS-肌電穩(wěn)定性的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物72只清潔級雄性Wistar大鼠，6周齡，體質(zhì)量（200±20）g，購自吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院動物實驗中心，動物生產(chǎn)合格證號：SCXK（吉）2011-0004。大鼠自由飲水、飲食，飼養(yǎng)環(huán)境溫度20～22℃，嚴格遵循國家《實驗動物管理條例》。

1.1.2 主要試劑 黃芩苷（浙江江北藥業(yè)公司，批號13659，純度≥98%）；酒石酸美托洛爾片（阿斯利康制藥有限公司，國藥準字H32025391，批號A14202000531）；原位缺口末端標記（TUNEL）試劑盒（上海碧云天生物技術(shù)有限公司，貨號C1088）；人基質(zhì)裂解素2（ST2）、腦鈉肽（BNP）試劑盒，兔抗鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78（glucose-regulated protein 78，GRP78）、肌醇需酶1（inositolrequiring enzyme-1，IRE1）、C/EBP環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子同源蛋白（CCAAT/enhancer binding protein homologous protein，CHOP）、縫隙 連接蛋 白43（connexin，Cx43）單克隆抗體（英國Abcam公司，貨號分別為：ab256751、ab108816、ab181602、ab108615、ab37073、ab179823及ab235585），山羊抗兔二抗（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，ZB2301）。

1.1.3 實驗儀器5180/R型多功能臺式離心機（德國Eppendorf公司）；WD-9413B型凝膠成像系統(tǒng)（北京六一生物科技有限公司）；MK3型酶標儀（美國Multiskan公司）；1703940型半干轉(zhuǎn)膜儀（美國Bio-Rad公司）；BL420F生理儀（成都泰盟公司）；Langendorff裝置（上海奧爾科特生物科技有限公司）；DF-5A型心臟刺激儀（蘇州市東方電子儀器廠）；BX53型熒光顯微鏡（日本Olympus公司）；GE Vivid E9彩色超聲、ML6-15型高頻超聲淺表探頭（美國GE公司）。

1.2 心力衰竭模型制備與分組72只清潔級雄性Wistar大鼠采用隨機數(shù)字表法分為對照組，模型組，美托洛爾組，黃芩苷低、中、高劑量組，每組12只。根據(jù)文獻［4］，模型組大鼠予后頸部皮下注射5 mg（/kg·d）的ISO，對照組予后頸部皮下注射等體積0.9%NaCl注射液，連續(xù)注射7 d；美托洛爾組及黃芩苷低、中、高劑量組在模型組基礎(chǔ)上分別給予美托洛爾10 mg（/kg·d）及25、50、100 mg（/kg·d）黃芩苷灌胃，對照組給予等體積0.9%NaCl注射液灌胃，連續(xù)給藥4周。模型成功標準：左心室射血分數(shù)（LVEF）下降0.05，左心室舒張末期內(nèi)徑（LVEDd）、左心室收縮末期內(nèi)徑（LVESd）增大0.15 mm［4］。全部大鼠均造模成功。

1.3 心電圖檢測 于實驗第4周末，取各組大鼠進行腹腔注射3%戊巴比妥鈉溶液（60 mg/kg）麻醉，待大鼠麻醉成功后固定于粘鼠板，四肢連接BL420F生理儀心電電極，持續(xù)觀察3 min，記錄大鼠心率及室性早搏發(fā)生情況，每分鐘出現(xiàn)1～4個室性早搏為偶發(fā)室性早搏，每分鐘室性早搏發(fā)生數(shù)≥5個為頻發(fā)室性早搏。

1.4 心功能檢測 于實驗第4周末取各組大鼠麻醉后固定于粘鼠板，清理大鼠胸前毛發(fā)，應(yīng)用胸壁高頻超聲ML6-15型探頭對大鼠進行心功能檢測，觀察指標包括LVEF、LVESd及LVEDd，每只大鼠取3個連續(xù)完整心動周期測量平均值。

1.5 血清心力衰竭標志物檢測 各組大鼠進行心臟超聲檢查后，抽取尾靜脈血1 mL，靜置1 h后分離血清并于EP管中及時-80℃凍存，常溫下解凍樣本，采用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）法檢測各組大鼠血清中心力衰竭標志物BNP和ST2含量，檢測流程嚴格按照說明書操作。

1.6 Langendorff離體心臟灌注模型 于實驗第4周末，從各組中抽取6只大鼠，麻醉后沿胸骨左緣剪開胸腔，直接剪下心臟，置于預(yù)冷H-K液中（H-K液配制參照文獻［9］），修剪后充分暴露主動脈，主動脈與Langendorff裝置連接后，在37℃，8.65 kPa恒壓條件下，用95%O2-5%CO2飽和K-H液非循環(huán)式逆行灌注。待離體心臟灌注模型穩(wěn)定復(fù)跳10 min后，冠脈流量控制在10～12 mL/min，冠脈壓力維持為9.3 kPa左右，進行恒流灌注，導(dǎo)管接壓力轉(zhuǎn)換器［9］。植入電極，正負電極均放置于左心室前壁，并且正負極距離保持1 mm左右，于主動脈根部固定參考電極，連接BL420F生物機能實驗系統(tǒng)記錄心肌單相動作電位（MAP），并計算心肌單相動作電位復(fù)極90%的時程（MAPD90）。

應(yīng)用DF-5A型心臟刺激儀，記錄電極與刺激電極均放置于左心室前壁，兩者相距3 mm，BL420F生物機能實驗系統(tǒng)記錄有效不應(yīng)期（ERP）：連續(xù)發(fā)放8個起搏刺激波S1后發(fā)放1個早搏刺激波S2，S1S1與S1S2設(shè)置為250 ms，S1S2間期自設(shè)置數(shù)值每次縮短10 ms幅度，直至經(jīng)S2誘發(fā)無反應(yīng)，再于無誘發(fā)反應(yīng)數(shù)值基礎(chǔ)上增加10 ms，然后以-1 ms反掃直至S2不能誘發(fā)出動作電位，此時S1S2間期即為心室肌細胞ERP。計算并比較各組間ERP/MAPD90比值。

1.7 TUNEL染色檢測心室肌細胞凋亡情況 取每組剩余6只大鼠，頸椎脫臼處死后用眼科剪子取下心臟，剪下部分左心室組織，用4%多聚甲醛液進行固定，無水乙醇脫水，切片厚度保持在3～4 μm制作切片樣本，其余左心室組織樣本留取進行后續(xù)實驗，根據(jù)TUNLE試劑盒說明書進行操作，樣本經(jīng)0.1%Trition X-100透化，加入3%H2O2200 μL，磷酸鹽緩沖液（PBS）漂洗3次后，加入蛋白酶K滅活DNA、RNA，最后加入TUNEL液，恒溫箱中避光孵育60 min。取出后經(jīng)PBS沖洗3次加入DAPI反應(yīng)液，反應(yīng)20 min后沖洗封片。應(yīng)用顯微鏡觀察左心室組織切片，褐色代表已凋亡細胞，藍色代表仍生存細胞，于200倍鏡下觀察各組大鼠心室肌細胞凋亡情況。凋亡指數(shù)（AI）＝各視野陽性細胞數(shù)/視野所有細胞總數(shù)×100%。

1.8 Western blot法檢測ERS信號通路蛋白及Cx43蛋白表達 取1.7各組大鼠留取的左心室肌組織樣本并制備組織勻漿（10%），裂解細胞后采用BCA法測定各組心室肌樣本蛋白濃度，制備上樣液。各組樣品均取10 μL和5 μL蛋白Marker，加入電泳裝置中，5%、10%SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白。待電泳結(jié)束后將含蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝膠轉(zhuǎn)移到PVDF膜，5%脫脂奶粉常溫封閉4 h，加入目標蛋白GRP78一抗（1∶800）、IRE1一抗（1∶1 000）、CHOP一抗（1∶800）、Cx43一抗（1∶1 000）及內(nèi)參蛋白GAPDH（1∶800）一抗4℃封閉過夜。次日應(yīng)用PBS于水平搖床洗膜3次，加入山羊抗兔二抗（1∶500）后常溫下孵育2 h。取出PVDF膜后，用PBS洗膜3次，ECL顯像，暗室曝光，掃描膠片，用Gel-Pro-Analyzer軟件進行圖像處理，計算所測條帶光密度值。實驗獨立重復(fù)3次。

1.9 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 20.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間多重比較行LSD-t檢驗；計數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。χ2檢驗組間多重比較，采用校正后的檢驗水準，P＜0.01為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠心電圖檢查結(jié)果 與對照組比較，模型組大鼠心率增快，室性早搏發(fā)生率增高（P＜0.05）；與模型組比較，美托洛爾組及黃芩苷低、中、高劑量組大鼠心率降低，室性早搏發(fā)生率降低（P＜0.05）；與美托洛爾組比較，黃芩苷低、中、高劑量組大鼠心率升高，室性早搏發(fā)生率差異無統(tǒng)計學(xué)意義；黃芩苷低、中、高劑量組大鼠心率依次降低（P＜0.05），室性早搏發(fā)生率差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

Tab.1 Comparison of heart rate and ventricular premature beat between six groups表1各組大鼠心率及室性早搏情況比較 （n=12）

2.2 各組大鼠超聲心動圖的變化 與對照組比較，模型組大鼠LVESd、LVEDd升高，LVEF降低（P＜0.05）。與模型組比較，美托洛爾組及黃芩苷低、中、高劑量組LVEF升高，LVESd、LVEDd降低（P＜0.05）。與美托洛爾組比較，黃芩苷低、中劑量組LVEF降低，LVESd、LVEDd升高（P＜0.05）；黃芩苷高劑量組與美托洛爾組差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。黃芩苷低、中、高劑量組LVEF依次升高，LVESd、LVEDd依次降低（P＜0.05），見圖1、表2。

2.3 各組大鼠血清心衰標志物的變化 與對照組比較，模型組大鼠血清ST2、BNP水平升高（P＜0.05）。與模型組比較，美托洛爾組及黃芩苷低、中、高劑量組血清ST2、BNP水平降低（P＜0.05）。與美托洛爾組比較，黃芩苷低、中劑量組血清ST2、BNP水平升高（P＜0.05），高劑量組與美托洛爾組差異無統(tǒng)計學(xué)意義。黃芩苷低、中、高劑量組血清ST2、BNP水平依次降低（P＜0.05），見表3。

2.4 各組大鼠Langendorff離體心臟灌注模型ERP、ERP/MAPD90情況 與對照組比較，模型組大鼠心室肌細胞ERP、MAPD90增大，ERP/MAPD90減?。≒＜0.05）。與模型組比較，美托洛爾組及黃芩苷低、中、高劑量組心室肌細胞ERP、MAPD90降低，ERP/MAPD90升高（P＜0.05）。與美托洛爾組比較，黃芩苷低、中劑量 組ERP、MAPD90升 高 ，ERP/MAPD90降 低（P＜0.05）；高劑量組與美托洛爾組差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。黃芩苷低、中、高劑量組心室肌細胞ERP、MAPD90依次降低，ERP/MAPD90依次升高（P＜0.05），見表4。

Fig.1 Echocardiography of rats in each group圖1各組大鼠超聲心動圖

Tab.2 Comparison of LVEF,LVESd and LVEDd between six groups表2各組大鼠LVEF、LVESd、LVEDd比較（n=12，±s）

Tab.2 Comparison of LVEF,LVESd and LVEDd between six groups表2各組大鼠LVEF、LVESd、LVEDd比較（n=12，±s）

＊P＜0.05；a與對照組比較，b與模型組比較，c與美托洛爾組比較，d與黃芩苷低劑量組比較，e與黃芩苷中劑量組比較，P＜0.05

組別LVEFLVESd（mm）LVEDd（mm）對照組0.857 2±0.024 61.73±0.114.58±0.19模型組0.698 0±0.034 9a3.46±0.12a6.27±0.25a美托洛爾組0.820 9±0.024 8b1.89±0.10b4.84±0.19b黃芩苷低劑量組0.720 5±0.038 4bc2.17±0.15bc5.79±0.25bc黃芩苷中劑量組0.785 9±0.026 0bcd2.03±0.14bcd5.13±0.20bcd黃芩苷高劑量組0.835 7±0.029 5bde1.83±0.10bde4.68±0.21bde F 56.463＊48.208＊34.224＊

Tab.3 Comparison of serum levels of ST2 and BNP between six groups表3各組大鼠血清ST2、BNP比較 （μg/L，±s）

Tab.3 Comparison of serum levels of ST2 and BNP between six groups表3各組大鼠血清ST2、BNP比較 （μg/L，±s）

＊P＜0.05；a與對照組比較，b與模型組比較，c與美托洛爾組比較，d與黃芩苷低劑量組比較，e與黃芩苷中劑量組比較，P＜0.05

組別nST2BNP對照組1250.03±5.5864.92±5.58模型組1280.16±5.79a220.75±20.28a美托洛爾組1264.15±4.07b112.50±9.89b黃芩苷低劑量組1275.63±3.65bc176.08±11.56bc黃芩苷中劑量組1271.71±4.34bcd155.83±12.55bcd黃芩苷高劑量組1264.50±5.28bde106.75±16.39bde F 186.724＊246.843＊

2.5 各組大鼠TUNEL染色情況 與對照組比較，模型組大鼠心室肌細胞AI值明顯升高（F=289.711，P＜0.05）；與模型組比較，美托洛爾組及黃芩苷低、中、高劑量組大鼠心室肌細胞AI值明顯降低（P＜0.05）。與美托洛爾組比較，黃芩苷低、中劑量組心室肌細胞AI值明顯升高（P＜0.05）；高劑量組與美托洛爾組差異無統(tǒng)計學(xué)意義。黃芩苷低、中、高劑量組大鼠心室肌細胞AI值依次降低（P＜0.05），見圖2、3。

Tab.4 Comparison of ERP,MADP90 and ERP/MADP90 between six groups表4各組大鼠ERP、MADP90、ERP/MADP90比較 （±s）

Tab.4 Comparison of ERP,MADP90 and ERP/MADP90 between six groups表4各組大鼠ERP、MADP90、ERP/MADP90比較 （±s）

＊P＜0.05；a與對照組比較，b與模型組比較，c與美托洛爾組比較，d與黃芩苷低劑量組比較，e與黃芩苷中劑量組比較，P＜0.05

組別nERP（ms）MADP9（0ms）ERP/MADP90對照組648.67±3.4465.33±3.390.75±0.02模型組664.17±6.24a97.50±8.46a0.66±0.02a美托洛爾組650.17±3.31b66.83±3.87b0.75±0.01b黃芩苷低劑量組661.17±2.71bc89.17±3.43bc0.69±0.01bc黃芩苷中劑量組654.83±1.83bcd76.33±3.20bcd0.72±0.02bcd黃芩苷高劑量組650.50±2.26bde67.33±3.67bde0.75±0.02bde F 58.857＊168.426＊18.734＊

2.6 Western blot檢測結(jié)果 與對照組比較，模型組大鼠心室肌組織中GRP78、IRE1、CHOP表達升高，Cx43表達降低（P＜0.05）。與模型組比較，美托洛爾組及黃芩苷低、中、高劑量組大鼠心室肌組織中GRP78、IRE1、CHOP表達降低，Cx43表達升高（P＜0.05）。與美托洛爾組比較，黃芩苷低、中劑量組心室肌組織中GRP78、IRE1、CHOP表達升高，Cx43表達降低（P＜0.05）；高劑量組與美托洛爾組差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。黃芩苷低、中、高劑量組大鼠心室肌組織中GRP78、IRE1、CHOP表達依次降低，Cx43表達依次升高（P＜0.05），見表5、圖4。

Fig.2 TUNEL staining results of baicalin on ventricular myocytes of rats with heart failure(×200)Fig.2各組心力衰竭大鼠心室肌組織TUNEL染色結(jié)果（×200）

Fig.3 Effects of baicalin on myocardial AI in rats with heart failure圖3黃芩苷對心力衰竭大鼠心室肌組織AI值的影響

Tab.5 Comparison of the protein expression levels of GRP78,IRE1,CHOP and Cx43 between six groups表5各組大鼠心室肌組織GRP78、IRE1、CHOP及Cx43蛋白表達水平比較 （n=6，±s）

Tab.5 Comparison of the protein expression levels of GRP78,IRE1,CHOP and Cx43 between six groups表5各組大鼠心室肌組織GRP78、IRE1、CHOP及Cx43蛋白表達水平比較 （n=6，±s）

＊P＜0.05；a與對照組比較，b與模型組比較，c與美托洛爾組比較，d與黃芩苷低劑量組比較，e與黃芩苷中劑量組比較，P＜0.05

組別GRP78IRE1CHOPCx43對照組0.17±0.030.20±0.040.17±0.022.58±0.22模型組0.40±0.04a1.16±0.08a1.23±0.09a0.25±0.06a美托洛爾組0.17±0.02b0.36±0.03b0.41±0.02b1.81±0.10b黃芩苷低0.31±0.03bc1.01±0.03bc1.05±0.06bc0.59±0.07bc劑量組黃芩苷中0.23±0.03bcd0.91±0.04bcd0.73±0.04bcd0.86±0.05bcd劑量組黃芩苷高0.17±0.01bde0.36±0.02bde0.42±0.03bde1.82±0.07bde劑量組F 46.492＊70.758＊132.413＊224.024＊

3 討論

Fig.4 Electrophoretic map of baicalin on GRP78,IRE1,CHOP and Cx43 in ventricular myocytes of rats with heart failure圖4各組心力衰竭大鼠心室肌組織GRP78、IRE1、CHOP及Cx43表達電泳圖

心力衰竭是指心臟結(jié)構(gòu)與功能發(fā)生異常，表現(xiàn)為心室壁變薄，心室腔呈擴張樣改變，心室過度充盈，射血無力等一系列臨床綜合征，多出現(xiàn)于心血管疾病的終末期［10］。心室重構(gòu)是心力衰竭的病理學(xué)基礎(chǔ)，主要包括結(jié)構(gòu)重構(gòu)和電重構(gòu)，兩者均是引發(fā)心力衰竭患者生活質(zhì)量下降的重要因素。不僅如此，兩者還可相互影響，相互加重［11］。黃芩苷對不同心血管疾病的作用已成為心血管領(lǐng)域研究熱點，有望成為治療或輔助治療多種心血管疾病的有效藥物［12］。

有研究顯示，黃芩苷能改善ISO所致心力衰竭大鼠心功能，提高LVEF，減少體內(nèi)水鈉潴留，降低循環(huán)機械應(yīng)力傳導(dǎo)至心肌細胞，抑制BNP及ST2產(chǎn)生［13］。本研究結(jié)果顯示，與對照組比較，模型組大鼠心率增快，室性早搏發(fā)生率增高，LVESd、LVEDd增加，LVEF降低，血清BNP及ST2含量升高，經(jīng)25～100 mg（/kg·d）黃芩苷灌胃后，上述指標均有所改善，且呈劑量依賴性，提示黃芩苷可改善ISO致心力衰竭大鼠的癥狀，但其具體機制仍不明確。

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是真核細胞合成蛋白的主要場所。當各種原因?qū)е聝?nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)態(tài)失衡時，易出現(xiàn)未折疊或錯誤折疊蛋白聚集于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中，細胞本身降解和重新折疊蛋白的過程即為ERS［14］，但持續(xù)而嚴重的ERS則可直接引發(fā)細胞凋亡［15］。心肌細胞凋亡不僅降低心功能，而且可引發(fā)心臟成纖維細胞增生并轉(zhuǎn)化為肌成纖維細胞。由于心肌細胞和成纖維細胞的靜息膜電位水平不同，兩類細胞間形成的電偶聯(lián)可降低心肌細胞除極速率和電活動傳導(dǎo)速度，引發(fā)心律失常［16］。從電生理角度分析，室性快速性心律失?；蝾l繁發(fā)作的室性早搏可導(dǎo)致心室收縮功能障礙，嚴重者可導(dǎo)致心臟擴大或心力衰竭［17］。由此可見，心室結(jié)構(gòu)重構(gòu)與電重構(gòu)之間存在相互誘發(fā)的病理條件。

正常心肌細胞群均為單相動作電位，使用Langendorff離體心臟灌注模型可準確反映心肌細胞的去極和復(fù)極。K+外流形成MAPD90，主要反映0相去極化至3相復(fù)極末期，ERP反映0相去極化至3相復(fù)極中期。當Na+通道激活延遲，ERP則延長，由于ERP和MAPD90存在同步性變化，因此ERP/MAPD90比值更能反映心室肌電穩(wěn)定性；其比值越小，心肌細胞除極引起折返性心律失常以及局部傳導(dǎo)阻滯的概率越大［18］。既往已有研究探索黃芩苷治療心力衰竭大鼠的作用機制，但大多停留在心室結(jié)構(gòu)重構(gòu)及分子信號通路的研究［19］，并未將心室重構(gòu)及心律失常相關(guān)聯(lián)。無論是心臟的結(jié)構(gòu)重構(gòu)還是電重構(gòu)出現(xiàn)嚴重變化，均會對整體產(chǎn)生影響，故而對兩方面共同研究方可得出較為科學(xué)、可信的結(jié)論。

心肌細胞縫隙連接是由縫隙連接蛋白組成的六聚體半通道橋梁，由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分泌，駐于心肌細胞膜表面，對心肌細胞之間的電傳導(dǎo)起決定作用。而心肌細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)并不發(fā)達，一旦發(fā)生ERS，可能對縫隙連接蛋白的合成與表達產(chǎn)生影響［20］。賀智慧等［21］研究發(fā)現(xiàn)，阿霉素誘導(dǎo)的擴張型心肌病大鼠心室肌細胞存在ERS，并且ERS可能激發(fā)心室肌纖維化信號通路，引發(fā)Cx43表達減少，造成大鼠心律失常。為了印證黃芩苷是否也通過抑制ERS，減少心肌細胞凋亡并增加Cx43表達，減少室性早搏的發(fā)生，本次研究還對部分大鼠進行了Langendorff離體心臟灌注，進行TUNEL染色、ERS信號通路及Cx43蛋白檢測，降低離體心臟對凋亡的影響，以保障檢測結(jié)果的客觀性和準確性。結(jié)果顯示，與對照組比較，模型組心室肌細胞ERP/MAPD90比值降低，心室肌細胞AI值升高，ERS信號通路GRP78、IRE1、CHOP蛋白表達水平升高，Cx43蛋白表達水平降低。而經(jīng)黃芩苷干預(yù)后，心室肌細胞ERP/MAPD90比值升高，AI值降低，GRP78、IRE1、CHOP蛋白表達水平降低，Cx43蛋白表達水平升高，且均呈劑量依賴性，提示ISO所致心力衰竭模型大鼠心室肌細胞發(fā)生ERS凋亡的同時，Cx43表達下調(diào)，心室肌細胞肌電穩(wěn)定性降低，可能是造成模型組大鼠室性早搏發(fā)生率升高的原因；而黃芩苷可能通過調(diào)節(jié)ERS，恢復(fù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)蛋白合成穩(wěn)態(tài)，在減少心室肌細胞凋亡的同時，上調(diào)Cx43的表達，提升心室肌細胞肌電穩(wěn)定性，在抑制心力衰竭大鼠心室結(jié)構(gòu)重構(gòu)的同時還可抑制電重構(gòu)。另外，黃芩苷高劑量組大鼠心功能、心室肌細胞凋亡情況、Cx43表達及肌電穩(wěn)定性療效與美托洛爾組無明顯差異，提示高劑量黃芩苷可與美托洛爾發(fā)揮幾近相同的作用，但其主要作用機制可能存在較大差異，美托洛爾是β受體阻滯劑，可能通過抑制心動過速，增加心臟舒張期供血，從而達到治療心力衰竭的作用，而黃芩苷則更可能傾向于通過抑制心室結(jié)構(gòu)重構(gòu)起到增加心肌電穩(wěn)定性的作用。

綜上所述，黃芩苷具有改善ISO所致心力衰竭大鼠的心功能作用，減少心室肌細胞凋亡，減輕ERS，提高心室肌細胞Cx43表達及肌電穩(wěn)定性，在逆轉(zhuǎn)心室重構(gòu)的同時抑制電重構(gòu)，有望成為心血管疾病的輔助用藥。