姜立敏，高金娥，陳祥吉，任鴻坤，劉楊楊

膝關節(jié)骨性關節(jié)炎是臨床常見的一種慢性進行性骨關節(jié)疾病，多發(fā)生于50歲以上的老年人，因該病會引發(fā)膝關節(jié)反復疼痛，導致患者關節(jié)活動受限、行走困難，若不及時治療，隨著病情進展，還會導致殘疾，嚴重影響患者生活質量[1-3]。近年隨著人口老齡化的加劇，膝關節(jié)骨性關節(jié)炎發(fā)病率呈上升趨勢，引起較多學者的重視。有研究指出膝關節(jié)骨性關節(jié)炎患者滑膜組織可分泌骨橋蛋白(OPN)、鈣結合蛋白(S100A12)及基質金屬蛋白酶-3(MMP-3)等多種活性因子，這些因子參與了該病的發(fā)生、發(fā)展。既往研究指出，在膠原誘導的關節(jié)炎模型中，滑膜組織和破骨細胞介導的骨吸收部位OPN高表達，提示OPN可能參與了關節(jié)炎的發(fā)病進程[4]。S100A12在炎性介導、腫瘤發(fā)生、傷后恢復等過程中發(fā)揮著重要作用[5]。MMP-3是滑膜分泌的細胞因子，Torstensen等[6]報道MMP-3對金屬蛋白酶和其他蛋白水解酶的合成起重要調節(jié)作用。故本文重點分析OPN、S100A12及MMP-3在中老年膝關節(jié)骨性關節(jié)炎患者中的表達情況，并分析三者對中老年膝關節(jié)骨性關節(jié)炎患者預后不良的預測價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 對2017年1月—2019年12月在我院住院部治療的膝關節(jié)骨性關節(jié)炎患者的臨床資料進行收集、整理。納入標準：符合中華骨科學會制定的膝關節(jié)骨性關節(jié)炎診斷標準，并經(jīng)X線檢查示關節(jié)間隙狹窄、關節(jié)邊緣有骨贅形成[7]；存在膝關節(jié)疼痛癥狀，活動時有骨摩擦音；年齡≥50歲；入院后1周內行關節(jié)鏡清理術。排除標準：納入研究前服用過影響OPN、S100A12及MMP-3水平的藥物者；合并惡性腫瘤及重要器官嚴重疾病者；治療依從性不佳者；因類風濕性關節(jié)炎、感染等原因引發(fā)的膝關節(jié)病變者；合并骨結核、嚴重骨質疏松癥者。最終納入106例，根據(jù)改良Mankin評分[8]評估病情嚴重程度，Mankin評分2～5分為輕度(30例)，5～9分為中度(43例)，9～14分為重度(33例)。輕度組中男15例，女15例；年齡55～79(70.41±3.31)歲；體質量指數(shù)(BMI)(25.45±2.35)kg/m2。中度組中男21例，女22例；年齡57～80(70.53±3.45)歲；BMI(25.50±2.39)kg/m2。重度組中男16例，女17例；年齡56～80(70.48±3.40)歲；BMI(25.55±2.42)kg/m2。3組基線資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2研究方法 ①比較不同病情程度患者關節(jié)液中OPN、S100A12及MMP-3水平。②采用電話、門診復查方式隨訪6個月，觀察不同OPN、S100A12及MMP-3水平患者預后情況。無感染、深靜脈血栓形成等并發(fā)癥發(fā)生，膝關節(jié)疼痛完全消失(或行走偶有疼痛)，關節(jié)活動未受限(或經(jīng)藥物治療緩解)，為預后良好；未達上述標準則為預后不良。③分析患者臨床資料，采用Logistic多因素回歸分析探討患者預后不良的影響因素。④繪制受試者工作特征(ROC)曲線分析OPN、S100A12及MMP-3水平對患者預后不良的預測價值。

1.3OPN、S100A12及MMP-3檢測方法 患者取坐位，行局部麻醉，經(jīng)外側膝眼進針，抽取膝關節(jié)液1～2 ml，4000 r/min離心5 min，-80℃下保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測關節(jié)液OPN水平，試劑盒由武漢云克隆科技股份有限公司提供；采用雙抗體夾心法檢測關節(jié)液S100A12及MMP-3水平，S100A12試劑盒由武漢明德生物科技股份有限公司提供，MMP-3試劑盒由上海信裕生物工程有限公司提供。OPN正常參考值<3200 ng/L，S100A12正常參考值17～28 ng/ml，MMP-3正常參考值≤110 pg/ml。

2 結果

2.1不同病情程度患者關節(jié)液OPN、S100A12及MMP-3水平比較 3組關節(jié)液中OPN、S100A12及MMP-3水平整體比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。重度組關節(jié)液OPN、S100A12及MMP-3水平明顯高于中度組及輕度組，中度組上述因子水平亦高于輕度組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 不同程度的中老年膝關節(jié)骨性關節(jié)炎3組關節(jié)液OPN、S100A12及MMP-3水平比較

2.2不同OPN、S100A12及MMP-3水平患者預后情況 隨訪資料顯示，64例(60.38%)預后良好，42例(39.62%)預后不良。OPN、S100A12及MMP-3異常升高患者預后不良率明顯高于OPN、S100A12及MMP-3正?；颊?P<0.05，P<0.01)。見表2。

表2 不同OPN、S100A12及MMP-3水平中老年膝關節(jié)骨性關節(jié)炎患者預后情況比較[例(%)]

2.3影響患者預后不良的Logistic多因素回歸分析 年齡≥65歲、有半月板撕裂、術中Outerbridge分級3～4級、術后未堅持鍛煉、OPN異常升高、S100A12異常升高、MMP-3異常升高為中老年膝關節(jié)骨性關節(jié)炎患者預后不良的獨立危險因素(P<0.05，P<0.01)。見表3。

表3 影響中老年膝關節(jié)骨性關節(jié)炎患者預后不良的Logistic多因素回歸分析

2.4OPN、S100A12、MMP-3單一及聯(lián)合檢測對患者預后不良的預測價值分析 OPN、S100A12、MMP-3單一及聯(lián)合檢測ROC曲線下面積分別為0.771、0.807、0.771、0.921，各指標曲線下面積以聯(lián)合檢測最大。見表4及圖1。

圖1 OPN、S100A12、MMP-3單一及聯(lián)合檢測預測中老年膝關節(jié)骨性關節(jié)炎患者預后不良的受試者工作特征曲線

表4 OPN、S100A12、MMP-3單一及聯(lián)合檢測對中老年膝關節(jié)骨性關節(jié)炎患者預后不良的預測價值分析

3 討論

骨性關節(jié)炎涉及軟骨分解、合成代謝及滑膜等組織變化，但到目前為止其病因仍不明了[9]。目前臨床公認滑膜炎在骨性關節(jié)炎發(fā)病中起重要作用，它可加速軟骨基質的分解代謝，加速軟骨退變[10]。

研究發(fā)現(xiàn)，骨性關節(jié)炎患者病變部位軟骨基質合成和退變的動態(tài)平衡被打破，這一過程受細胞因子、炎性介質、基質金屬蛋白酶等相關因素調控[11]。Paterson等[12]研究指出，健康人滑膜細胞、關節(jié)液及血漿中OPN水平明顯低于骨性關節(jié)炎患者關節(jié)液中水平，且OPN水平與患者病情嚴重程度呈正相關。本研究重度組、中度組、輕度組患者OPN水平有顯著差異，可見膝關節(jié)骨性關節(jié)炎患者關節(jié)液中OPN水平與病情進展關系密切[13]，因為OPN屬Th1類細胞因子，可促進毛細血管生長，并誘導軟骨細胞凋亡，通過調節(jié)局部細胞因子分泌來加重病變部位炎癥反應[14]，故病情越嚴重者關節(jié)液中OPN水平越高。

S100A12定位于人類染色體1q21，主要由中性粒細胞、單核巨噬細胞組成，以共價二聚體形式存在[15]。Bersani等[16]研究指出，S100A12在受到炎性因子刺激后，發(fā)生蛋白構象改變，由此暴露靶蛋白結合位點，能夠與特異性蛋白或肽類結合發(fā)揮生物學功能。因此S100A12參與了細胞遷移與黏附，主動氧化防御，傷口愈合，多數(shù)炎性、代謝性及腫瘤性疾病的病理生理過程[17-19]。本研究結果顯示，重度組S100A12水平明顯高于輕度、重度組，且S100A12水平異常升高為患者預后不良的獨立危險因素?？梢奡100A12在膝關節(jié)骨性關節(jié)炎發(fā)病過程中發(fā)揮了重要作用，可作為評估膝關節(jié)骨性關節(jié)炎病情嚴重程度的重要指標。

研究報道，MMP-3是一種鋅離子依賴酶，主要功能為負責細胞外基質成分降解，過高表達會導致軟骨框架結構崩解，從而破壞患者關節(jié)功能[20-21]。說明膝關節(jié)骨性關節(jié)炎患者關節(jié)液中MMP-3水平顯著升高，MMP-3可作為評估膝關節(jié)骨性關節(jié)炎病情嚴重程度的參考指標。本研究通過繪制ROC曲線，計算OPN、S100A12、MMP-3單一及聯(lián)合檢測預測中老年膝關節(jié)骨性關節(jié)炎患者預后不良的曲線下面積，結果顯示以聯(lián)合檢測曲線下面積最大。提示臨床可通過OPN、S100A12、MMP-3聯(lián)合檢測了解中老年膝關節(jié)骨性關節(jié)炎病情進展程度，亦可評估患者預后。

綜上，OPN、S100A12、MMP-3在不同嚴重程度的膝關節(jié)骨性關節(jié)炎患者中的水平存在差異，三者可作為評估膝關節(jié)骨性關節(jié)炎病情進展及預后的重要指標。