韋美德，胡禮賓，秦志麗，黃榆蘇，凌建生

（廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，廣西 柳州 545005）

按ISO 15189認(rèn)可的要求，臨床實(shí)驗(yàn)室中通過(guò)認(rèn)可的項(xiàng)目，應(yīng)每年進(jìn)行儀器比對(duì)，樣本量應(yīng)≥20例，濃度應(yīng)覆蓋測(cè)量范圍，比對(duì)結(jié)果應(yīng)滿(mǎn)足要求；如比對(duì)結(jié)果不一致時(shí)，應(yīng)分析原因，采取必要的糾正措施，并評(píng)估糾正措施的有效性，以保證實(shí)驗(yàn)室中不同分析系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果具有一致性和可比性[1]。廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科有2臺(tái)cobas c702全自動(dòng)生化分析儀（簡(jiǎn)稱(chēng)c702-1和c702-2），而同型號(hào)的不同儀器檢測(cè)同一份樣本也不可避免地存在系統(tǒng)誤差[2]。為此，本研究擬通過(guò)2臺(tái)同型號(hào)的生化分析儀血清鈣檢測(cè)結(jié)果的比對(duì)分析，探討比對(duì)結(jié)果不通過(guò)的原因和糾正措施。

1 材料和方法

1.1 樣本來(lái)源

收集廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院門(mén)診和住院患者新鮮血清樣本20份，血清鈣濃度覆蓋高、中、低水平，每份血清樣本體積不少3 mL，且無(wú)黃疸、脂血或溶血。

1.2 儀器和試劑

cobas c702全自動(dòng)生化分析儀（瑞士羅氏公司）及配套試劑、c.f.a.s校準(zhǔn)品。多參數(shù)質(zhì)控品購(gòu)自美國(guó)伯樂(lè)公司。

1.3 方法

1.3.1 儀器保養(yǎng)與質(zhì)量保證 2臺(tái)儀器比對(duì)當(dāng)天室內(nèi)質(zhì)量控制（簡(jiǎn)稱(chēng)室內(nèi)質(zhì)控）結(jié)果在控，近期室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（簡(jiǎn)稱(chēng)室內(nèi)質(zhì)評(píng)）成績(jī)合格，2臺(tái)儀器比對(duì)時(shí)性能良好。

1.3.2 比對(duì)儀器的確定 以連續(xù)多年參加國(guó)家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心、廣西省臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)評(píng)，成績(jī)優(yōu)秀的儀器（c702-2）為比對(duì)儀器，c702-1為試驗(yàn)儀器。

1.3.3 樣本測(cè)定 按本實(shí)驗(yàn)室比對(duì)程序要求，將20份血清樣本同時(shí)在2臺(tái)儀器上進(jìn)行血清鈣濃度檢測(cè)。

1.3.4 判斷標(biāo)準(zhǔn) （1）2臺(tái)儀器比對(duì)結(jié)果r2≥0.95，且有≥80%的結(jié)果符合|偏移%|≤該項(xiàng)目比對(duì)質(zhì)量目標(biāo)；（2）平均偏移的絕對(duì)值應(yīng)低于本實(shí)驗(yàn)室規(guī)定的允許范圍；（3）各醫(yī)學(xué)決定水平值代入直線(xiàn)回歸方程（Y=aX+b）后的理論值與實(shí)際值的偏移應(yīng)低于本實(shí)驗(yàn)室規(guī)定的允許范圍，a值在1.00±0.05范圍內(nèi)，r2≥0.95。

2 結(jié)果

2.1 血清鈣首次比對(duì)結(jié)果

c702-1與c702-2比對(duì)結(jié)果的絕對(duì)偏移為-0.16～0.08 mmol/L，有65%的結(jié)果符合|偏移%|≤該項(xiàng)目比對(duì)質(zhì)量目標(biāo)，平均|偏移%|為4.94%，醫(yī)學(xué)決定水平處的|偏移%|為3.38%。線(xiàn)性回歸方程為Y=1.040 1X-0.199 9（r2=0.987 1），見(jiàn)圖1。比對(duì)結(jié)果通過(guò)率為65%，未達(dá)到≥80%的要求，本次比對(duì)未通過(guò)。

圖1 c702-1與c702-2血清鈣首次比對(duì)的線(xiàn)性回歸分析

2.2 首次比對(duì)不通過(guò)原因分析

2.2.1 攜帶污染或試劑干擾因素 首先考慮試劑加樣攜帶污染或干擾。通過(guò)查看相關(guān)文獻(xiàn)并進(jìn)行血清鈣干擾排查試驗(yàn)后，確認(rèn)c702-2試劑倉(cāng)試劑的排列順序合理，不存在攜帶污染或干擾。c702-1試劑倉(cāng)中排列于血清鈣試劑前的鎂和總蛋白試劑均對(duì)血清鈣檢測(cè)有干擾作用。因此，將鎂和總蛋白試劑的擺放位置移至血清鈣試劑之后。

2.2.2 儀器準(zhǔn)確度因素 通過(guò)查看近期室間質(zhì)評(píng)和室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果，確認(rèn)儀器性能良好，血清鈣結(jié)果在控，但室間質(zhì)評(píng)和室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果均高于靶值，考慮為定標(biāo)原因引起。通過(guò)查閱文獻(xiàn)并進(jìn)行相關(guān)分析后，判斷可能是校準(zhǔn)品溶劑原因和空白對(duì)照液選取不當(dāng)。通過(guò)對(duì)比排除試驗(yàn)并進(jìn)行驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)用去離子水復(fù)溶校準(zhǔn)品，用去離子水作為空白進(jìn)行定標(biāo)后，血清鈣的室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果和室間質(zhì)評(píng)結(jié)果更接近于靶值。

2.3 實(shí)施糾正措施后血清鈣的第2次比對(duì)結(jié)果

第2次比對(duì)結(jié)果顯示，c702-1與c702-2血清鈣檢測(cè)結(jié)果的絕對(duì)偏移為-0.05～0.06 mmol/L，各項(xiàng)判斷指標(biāo)結(jié)果均符合要求。線(xiàn)性回歸分析見(jiàn)圖2。比對(duì)結(jié)果可接受，比對(duì)通過(guò)。

圖2 c702-1與c702-2血清鈣第2次比對(duì)的線(xiàn)性回歸分析

3 討論

在臨床生化檢測(cè)中，很多實(shí)驗(yàn)室采用蒸餾水復(fù)溶校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，并進(jìn)行本底空白定標(biāo)（本實(shí)驗(yàn)室之前也習(xí)慣用0.9% NaCl溶液或蒸餾水作空白對(duì)照，用蒸餾水復(fù)溶c.f.a.s校準(zhǔn)品、質(zhì)控品），而儀器系統(tǒng)用水中采用去離子水、蒸餾水或純凈水的情況均存在。本研究結(jié)果顯示，校準(zhǔn)品、質(zhì)控品復(fù)溶劑及本底空白定標(biāo)液與儀器系統(tǒng)用水不一致可能會(huì)對(duì)血清鈣的檢測(cè)造成一定影響，導(dǎo)致儀器比對(duì)出現(xiàn)差異。本實(shí)驗(yàn)室根據(jù)本研究結(jié)果，規(guī)定使用與儀器系統(tǒng)用水同源的去離子水進(jìn)行空白定標(biāo)對(duì)照，復(fù)溶校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，同時(shí)更正了實(shí)驗(yàn)室相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。因此，建議統(tǒng)一儀器實(shí)驗(yàn)用水，校準(zhǔn)品、質(zhì)控品復(fù)溶劑及本底空白定標(biāo)液選取與儀器系統(tǒng)用水同源的液體。因?qū)嶒?yàn)用水在純水機(jī)等水源供給過(guò)程中，水（包括去離子水）中都不可避免地含有極少量的鈣、鎂等離子或雜質(zhì)，而在檢測(cè)鈣、鎂等項(xiàng)目或其他項(xiàng)目時(shí)，使用的試劑均為濃縮試劑，需加水（實(shí)驗(yàn)用水）稀釋?zhuān)捎孟嗤瑏?lái)源的水來(lái)進(jìn)行空白定標(biāo)，復(fù)溶校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，可有效去除本底中鈣、鎂等離子或雜質(zhì)的影響，使結(jié)果更加準(zhǔn)確。

有研究結(jié)果顯示，鎂和總蛋白對(duì)鈣離子測(cè)定有干擾作用，且鎂的干擾作用大于總蛋白[3]。鎂的測(cè)定試劑中含有乙二醇二乙醚二胺四乙酸，該成分為鈣的絡(luò)合劑。另外，鈣的測(cè)定方法一般采用鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法，由于方法學(xué)的缺陷，影響因素較多，試劑開(kāi)瓶放置一段時(shí)間后會(huì)有輕微的顏色變化，影響檢測(cè)結(jié)果，所以臨床實(shí)驗(yàn)室均規(guī)定每天或間隔一定時(shí)間需對(duì)鈣項(xiàng)目進(jìn)行定標(biāo)。由于鈣測(cè)定的干擾因素較多，加上我國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 403—2012[4]推薦使用的鈣項(xiàng)目的允許總誤差和比對(duì)質(zhì)量目標(biāo)要求均較嚴(yán)格，所以血清鈣比對(duì)難以通過(guò)是長(zhǎng)期困擾臨床實(shí)驗(yàn)室的一大難題。

同一檢測(cè)系統(tǒng)、不同檢測(cè)系統(tǒng)同一項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果可比是非常重要的，涉及到結(jié)果解釋及臨床應(yīng)用，因此只有實(shí)現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果可比，才能保證不同系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果的統(tǒng)一性和一致性，才能給臨床提供準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)。即使使用不同參考區(qū)間的不同檢測(cè)系統(tǒng)，因方法學(xué)原理等差異無(wú)法實(shí)現(xiàn)可比時(shí)，也要將這種結(jié)果差異告知臨床，并采取風(fēng)險(xiǎn)控制措施（如在檢驗(yàn)報(bào)告上做出明確標(biāo)識(shí)等）。