于杰

（吉林省吉林市龍?zhí)秴^(qū)結(jié)核病防治所，吉林 吉林 132000）

0 引言

結(jié)核并具有較強(qiáng)的傳染性和危害性，由結(jié)核分枝桿菌誘發(fā)，可經(jīng)由呼吸道傳播。該病多為老年群體高發(fā)，在慢性呼吸道疾病、糖尿病患者中有較高發(fā)病率，會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)盜汗、低熱、消瘦等癥，對(duì)人們的生命健康造成非常嚴(yán)重的威脅。從現(xiàn)階段的現(xiàn)狀來(lái)看，結(jié)核病的發(fā)病率逐年上升，已成為重點(diǎn)防治傳染病之一。該病中的大部分患者均可經(jīng)及時(shí)治療后獲得痊愈，故需及早予以診斷[1]。該病癥在臨床診斷過程中，常常需要根據(jù)患者的胸部X線來(lái)判定，但影像特異性不夠明顯，而且PPD實(shí)驗(yàn)的假陰性問題比較多，加之結(jié)核桿菌耐藥性不斷增強(qiáng)，因此采取更為合適的方法獲得準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果非常重要。痰結(jié)核桿菌檢驗(yàn)的方法主要為痰涂片顯微鏡檢查（分為普通顯微鏡和熒光顯微鏡），這兩種方法在臨床的應(yīng)用范圍均比較廣泛，為進(jìn)一步了解兩種方法的檢測(cè)差異，本次研究選取70例研究對(duì)象進(jìn)行對(duì)比分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選擇2020年1月至2020年12月吉林省吉林市龍?zhí)秴^(qū)結(jié)核病防治所進(jìn)行痰結(jié)核桿菌檢驗(yàn)的患者70例，其中男40例，女30例，年齡16～70歲，平均（42.16±3.46）歲。分別進(jìn)行普通顯微鏡檢查（普通顯微鏡組）和熒光顯微鏡檢查（熒光顯微鏡組），所有患者均存在不同程度的乏力、午后低熱、盜汗等癥狀，最終均在病理報(bào)告、痰片或熒光顯微鏡檢查檢查下確診。

1.2 方法。收集患者晨起痰液標(biāo)本，如果患者不能有效咳出痰液，則收集其咽拭子標(biāo)本，即肺部分泌物。采集完畢后將痰涂片均送往實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)[2]。普通顯微鏡組：將酒精浸泡的玻璃片用鑷子取出，將其放置與酒精燈上進(jìn)行烘干，以有效消除載玻片上的油脂、酒精等。載玻片溫度恢復(fù)到室溫后，則可以將痰液標(biāo)本涂成2 cm大小，厚薄適宜的痰膜，抗酸染色，將其放在光學(xué)顯微鏡下檢查，若顯示為3～9條/100條視野則可以判定為陽(yáng)性，然后玻片經(jīng)脫油干燥后進(jìn)行有序保存。熒光顯微鏡組：對(duì)涂片進(jìn)行干燥處理，取0.1%金胺0染色，15 min后，行5%鹽酸酒精脫色，時(shí)間控制在3 min，予以0.5%高錳酸鉀染色1 min，于室溫下予以干燥處理，行以LED熒光顯微鏡鏡檢。需要注意的是，需控制好涂層的厚度，避免涂過厚，否則無(wú)法觀察到單個(gè)的菌體，也不可涂太薄，防止出現(xiàn)找不到生物組織的情況，同時(shí)，也避免用力過猛對(duì)載玻片造成損害[3]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。在SPSS 20.0中完成本次研究數(shù)據(jù)，計(jì)量數(shù)據(jù)用（±s）表示，施以t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用（%）表示，施以χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

普通顯微鏡組發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性患者14例，占總?cè)藬?shù)20.00%；熒光顯微鏡組檢查發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性患者52例，占總?cè)藬?shù)的74.29%，兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），詳見表1。

表1 比較兩組痰涂片顯微鏡檢驗(yàn)結(jié)果

3 討論

肺結(jié)核屬于臨床常見的呼吸系統(tǒng)疾病，發(fā)病后需要及時(shí)進(jìn)行對(duì)癥治療，盡可能避免病灶發(fā)生轉(zhuǎn)移現(xiàn)象。通常情況下，病灶會(huì)轉(zhuǎn)移到腸道、腎臟等部位，導(dǎo)致臨床治療難度加大。此類患者隨著病程的不斷延長(zhǎng)，大部分會(huì)出現(xiàn)多器官相應(yīng)功能的減退[4]。相關(guān)調(diào)查研究顯示，結(jié)核病的發(fā)病人群主要為青年。發(fā)生結(jié)合桿菌感染后，一般會(huì)有4～8周的潛伏期，這其中，主要以肺部感染結(jié)合桿菌為主，該病菌可侵入皮膚、骨骼、腦膜、頸淋巴等，主要通過呼吸道進(jìn)行傳染[5]。結(jié)核桿菌進(jìn)入人體后，極易誘發(fā)結(jié)核病，對(duì)患者的神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)等會(huì)造成嚴(yán)重?fù)p害，進(jìn)而對(duì)生活及正常工作造成嚴(yán)重影響。結(jié)核桿菌誘發(fā)呼吸系統(tǒng)疾病后，患者通常會(huì)出現(xiàn)低熱、惡心嘔吐、食欲不振等癥狀，嚴(yán)重者可能出現(xiàn)上腹部疼痛、反復(fù)高熱等癥狀，不但危害到患者的身體健康，也會(huì)對(duì)其生命安全造成威脅[6]。近些年來(lái)，人們的生活質(zhì)量不斷提升，醫(yī)療機(jī)構(gòu)相關(guān)規(guī)定也在不斷完善，肺結(jié)核在臨床的治療效果也取得了極大程度的改善。不過，由于肺結(jié)核的早期臨床癥狀不明顯，在臨床診斷過程中非常容易出現(xiàn)誤診問題，從而對(duì)臨床治療造成延誤。所以，對(duì)于肺結(jié)核疾病，早期進(jìn)行有效的診斷極其重要。

在以往的臨床檢驗(yàn)中，主要采用痰液涂片方式進(jìn)行檢驗(yàn)，這種檢驗(yàn)方法操作簡(jiǎn)單，費(fèi)用也比較低。對(duì)于結(jié)核病患者，結(jié)核桿菌是臨床診斷該病的極其重要的指標(biāo)，可以采用痰液抗酸染色法、痰培養(yǎng)法等方式檢查。痰液涂片檢驗(yàn)法對(duì)于痰液樣本的質(zhì)量要求比較高，靈敏度不高，陽(yáng)性的檢出率也不高，并不能為結(jié)核病患者提供有效的診斷意見，對(duì)于其病情的恢復(fù)及預(yù)后效果均不利[7]。在臨床治療方面，由于肺結(jié)核的治療周期比較長(zhǎng)，而斑菌轉(zhuǎn)陰率是此類患者臨床治療效果判定的一個(gè)非常重要的依據(jù)，所以臨床上需采取合理手段，來(lái)較為準(zhǔn)確判斷臨床預(yù)后，從而為臨床治療提供有價(jià)值的參考意見[8]?，F(xiàn)階段，隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷進(jìn)步，熒光顯微鏡在臨床已經(jīng)得到非常成熟的發(fā)展。采用此種檢驗(yàn)方式，可使工作人員在更短的時(shí)間內(nèi)觀察到更多視野，減輕了工作人員的負(fù)擔(dān)。而且，發(fā)光柔和，對(duì)人的親近性較好，不易產(chǎn)生視覺疲勞。此外，熒光顯微鏡檢查法在暗色環(huán)境中會(huì)使抗酸桿菌發(fā)出橙黃色熒光，更易被發(fā)現(xiàn)，更為有效的探測(cè)特異性熒光，進(jìn)而有效改善臨床診斷準(zhǔn)確率。

隨著臨床研究的不斷深入，熒光顯微鏡檢查方法在結(jié)核桿菌檢驗(yàn)中的應(yīng)用逐漸廣泛起來(lái)。金胺0為鹽酸氨基四甲二氨基苯甲烷，為熒光染色的染色劑，需在24 h內(nèi)完成鏡檢。將其置于棕色瓶?jī)?nèi)，保存于暗處，在熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察，可擴(kuò)大觀察范圍，使結(jié)果更易于判讀，從而在臨床檢測(cè)中可以為疾病的診斷提供準(zhǔn)確的診斷依據(jù)，可有效指導(dǎo)臨床治療工作。本次研究結(jié)果顯示，普通顯微鏡組發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性患者14例，占總?cè)藬?shù)20.00%；熒光顯微鏡組發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性患者52例，占總?cè)藬?shù)的74.29%，兩組差異明顯。這一結(jié)果表明，結(jié)核患者在檢驗(yàn)痰結(jié)核桿菌時(shí)，熒光顯微鏡檢查法對(duì)于痰結(jié)核桿菌的檢出率更高。熒光顯微鏡檢查法是現(xiàn)階段新興分子與基因結(jié)合的診斷方法，具有診斷速度快、特異性高、費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn)，相比痰液涂鏡片檢驗(yàn)方法，更值得在臨床進(jìn)行應(yīng)用。可為臨床治療工作的開展提供重要參考依據(jù)，最終使疾病治療預(yù)后得以強(qiáng)有力的改善。但需注意的是，雖然LED熒光顯微鏡鏡檢方法的應(yīng)用，可使痰涂片檢測(cè)陽(yáng)性率提高，并使痰涂片檢測(cè)陽(yáng)性率提高，減輕實(shí)驗(yàn)室人員工作量。然而，若鏡檢人員缺乏經(jīng)驗(yàn)，則會(huì)使結(jié)果出現(xiàn)失誤。因此，需對(duì)閱片人員進(jìn)行系統(tǒng)化的培訓(xùn)，并在有經(jīng)驗(yàn)的人員協(xié)助下展開閱片，為確保痰涂片的質(zhì)量，需要避免陽(yáng)光直射，將其放在不透明玻片盒里進(jìn)行保存，以盲法質(zhì)量控制，以免有錯(cuò)誤出現(xiàn)時(shí)，可對(duì)錯(cuò)誤痰涂片進(jìn)行重新脫色與復(fù)染，進(jìn)而進(jìn)行再次檢測(cè)，獲取結(jié)果?？諝鈧鞑ナ墙Y(jié)核病傳播的主要途徑，想要有效控制結(jié)核病的流行，需要加強(qiáng)對(duì)病原體經(jīng)空氣傳播進(jìn)行控制，在日常生活中養(yǎng)成良好的生活習(xí)慣，對(duì)于已經(jīng)確診的患者，需要嚴(yán)格做好痰液傳播防護(hù)措施，不可隨意吐痰，加強(qiáng)衛(wèi)生消毒工作及個(gè)人防護(hù)工作。結(jié)核患者所處的環(huán)境，應(yīng)保持良好的通風(fēng)，減少空氣中的結(jié)核桿菌，并勤換衣物，做好個(gè)人衛(wèi)生。同時(shí)對(duì)于結(jié)核病，早發(fā)現(xiàn)早治療是關(guān)鍵，及時(shí)就診，依據(jù)醫(yī)師要求規(guī)律服藥治療，以最大限度的控制病情進(jìn)展，推進(jìn)機(jī)體康復(fù)。

痰結(jié)核桿菌檢驗(yàn)過程中為提高陽(yáng)性率，也需要注意下述內(nèi)容。不管是初治還是反復(fù)住院患者，其入院后的痰標(biāo)本檢查均非常重要，需要讓患者意識(shí)到采集痰標(biāo)本的重要性，不可隨便吐痰留取，痰標(biāo)本是否合格為疾病得到準(zhǔn)確診斷的重要條件，故需充分重視標(biāo)本采集環(huán)節(jié)。對(duì)患者進(jìn)行針對(duì)性的健康教育，為其講解肺結(jié)核相關(guān)知識(shí)，明確陽(yáng)性檢出率與痰標(biāo)本質(zhì)量的關(guān)系，以及檢驗(yàn)結(jié)果對(duì)治療方案的影響，從而使患者在留取痰標(biāo)本過程中具有良好的自覺性和依從性。在采集痰標(biāo)本期間，應(yīng)當(dāng)選擇平坦、寬敞的標(biāo)本盒，便于檢驗(yàn)人員進(jìn)行觀察和挑出可疑的部分，以提升痰涂片抗酸桿菌的陽(yáng)性檢出率。護(hù)士是否正確指導(dǎo)患者留取痰標(biāo)本，也會(huì)對(duì)痰菌的檢出率產(chǎn)生影響，因此，護(hù)士必須向患者正確講解留取痰標(biāo)本的方法。正確的方法應(yīng)是，晨起用清水漱口，深呼吸后用力咳嗽，咳出呼吸道深部的痰液，每天采集一次，連續(xù)采集三天。對(duì)于咳嗽無(wú)痰、痰少或無(wú)力咳痰的患者，應(yīng)當(dāng)通過誘導(dǎo)方式進(jìn)行排痰，臨床檢驗(yàn)工作中主要采用胸部叩擊排痰法、霧化吸入、人工采集法。相對(duì)而言，晨痰的抗酸桿菌陽(yáng)性率高于夜間痰及即時(shí)痰，所以需要指導(dǎo)患者連續(xù)3天留取晨痰，以提升涂片陽(yáng)性率。標(biāo)本采集成功后需要進(jìn)行全面檢查，對(duì)于不合格的標(biāo)本需要進(jìn)行重新采集。而采集后的標(biāo)本必須盡快送檢，如果不能立即進(jìn)行送檢，可以將標(biāo)本放在4℃的冰箱中。

另外，不同性狀的痰標(biāo)本陽(yáng)性檢出率也有明顯差異。通常痰液性狀分為干酪痰、血痰、黏液痰、水樣痰，黃色、膿樣、團(tuán)塊狀肺部分泌物屬于干酪痰，是最有價(jià)值的痰標(biāo)本。血痰和黏液痰相比干酪痰，檢出率明顯較低，水樣痰檢出率次之。在肺結(jié)核患者痰結(jié)核桿菌檢驗(yàn)過程中，也需要采用正確的檢驗(yàn)操作方法。按照實(shí)驗(yàn)室的操作規(guī)定，在涂片過程中要盡量選擇干酪痰，而含血標(biāo)本屬于破壞的肺組織，在選取時(shí)應(yīng)盡可能選擇含血部分。在加熱染色過程中不能讓染液沸騰，脫色時(shí)間也不能過長(zhǎng)，因?yàn)槊撋蟮娜疽褐泻茈y辨認(rèn)出抗酸桿菌。在痰液沖洗過程中應(yīng)保持緩慢的水流，須從一側(cè)進(jìn)行沖洗，不可直接沖洗[9]。而在患者痰標(biāo)本構(gòu)成方面，黏液痰和唾液痰所占比例比較大，膿樣痰比例相對(duì)較少，這主要與患者未掌握咳痰技巧和方法有關(guān)。肺結(jié)核患者痰液標(biāo)本主要來(lái)自上呼吸道，其成分構(gòu)成主要為口腔分泌物、咽部分泌物，而膿樣痰主要來(lái)自下呼吸道，主要是由肺部病變部分的壞死組織及支氣管分泌物構(gòu)成，其中結(jié)核分支桿菌的含量比較高，所以，在留取標(biāo)本過程中，非常有必要對(duì)患者留痰行為進(jìn)行干預(yù)和指導(dǎo)。此外，在引痰前需要初步評(píng)估患者的病情、治療情況、心理狀況等各項(xiàng)因素，需要向患者解釋10%的濃鹽引痰不會(huì)造成痛苦，也不會(huì)引起毒副作用。這種引痰方法比較經(jīng)濟(jì)適用，安全性也較高，患者的接受度及配合度也較高。做好各項(xiàng)引痰前的護(hù)理干預(yù)措施，才能有效保證痰液標(biāo)本的合格率。

綜上所述，熒光顯微鏡檢查法能夠有效提升結(jié)核患者陽(yáng)性率，可以為臨床工作提供非?？茖W(xué)的指導(dǎo)，在患者的臨床治療及預(yù)后中起著非常重要的作用，這種檢驗(yàn)方法值得在臨床中進(jìn)行普及。