■鐘經(jīng)波 侯啟瑞，2 沈曼曼，2 趙衛(wèi)國(guó)，2 吳 萍，2*

（1.江蘇科技大學(xué)，江蘇鎮(zhèn)江 212000；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所，江蘇鎮(zhèn)江 212000）

桑樹（Morus albaL.）是多年生木本植物，?？疲?，薔薇目，在我國(guó)有著悠久的種植歷史，為食品、飼料和絲綢工業(yè)提供了許多有價(jià)值的產(chǎn)品[1]。飼料桑是由我國(guó)科研人員培育出的桑樹新品系，具有抗逆性強(qiáng)、產(chǎn)量高、營(yíng)養(yǎng)豐富、適口性好等特點(diǎn)，桑葉消化率可達(dá)70%～90%，是畜禽的理想飼料資源，已有不少學(xué)者將其應(yīng)用于雞、豬、牛、羊等動(dòng)物的生產(chǎn)研究，用于改善動(dòng)物生產(chǎn)性能和產(chǎn)品品質(zhì)[2]。

但是目前桑葉作為飼料存在一個(gè)問題，其在畜禽飼料中的使用量不能過高。據(jù)報(bào)道，桑葉在肉雞飼料中的添加量≤3%[3]，鵝飼料中的添加量≤4%[4]，豬飼料中的添加量≤10%[5]，兔飼料中的添加量≤15%[6]，超過限額則動(dòng)物的生長(zhǎng)性能受到抑制。到目前為止，對(duì)桑飼料的研究主要集中在推薦用量及對(duì)動(dòng)物產(chǎn)品品質(zhì)的改善方面，對(duì)其不能增加用量的原因研究較少。桑葉本是一味傳統(tǒng)中藥材，含有多糖類、黃酮類、生物堿類、多酚類等多種活性成分，具有抗衰老、降血脂、降血糖等諸多藥理作用[7]。1-脫氧野尻霉素（1-Deoxynojirimycin，DNJ）是桑葉中一種特殊的亞氨基糖（多羥基生物堿）類的天然α-葡萄糖苷酶抑制劑，在桑葉中的含量最高可達(dá)0.7911%，遠(yuǎn)高于在其他植物中的含量，對(duì)動(dòng)物體糖代謝具有較強(qiáng)的抑制作用[8]。研究表明，DNJ 具有良好的降血糖、降血脂和減肥的作用，可用于治療Ⅱ型糖尿病、肥胖癥等相關(guān)的糖脂代謝機(jī)能紊亂[9]。Kong 等[10]發(fā)現(xiàn)，DNJ 能夠明顯改善自發(fā)持續(xù)高血糖大鼠的空腹血糖水平，特別是能夠明顯增強(qiáng)胰島素敏感性，并防止高血糖大鼠體質(zhì)量的增加。DNJ還可激活β-氧化系統(tǒng)，抑制肝臟脂質(zhì)積累[11]。筆者推測(cè)，DNJ 可能是影響桑葉在動(dòng)物飼料中使用量的因素之一，其通過影響機(jī)體的糖代謝和脂肪沉積進(jìn)而影響動(dòng)物的生長(zhǎng)性能、屠宰性能以及肉品質(zhì)等。然而，目前關(guān)于桑葉DNJ的研究主要集中在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域[9-11]，對(duì)其在動(dòng)物生產(chǎn)中的影響研究較少。

家兔是典型的草食動(dòng)物，飼料組分中碳水化合物（糖類）的比例較大，是研究桑葉DNJ對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)影響的理想對(duì)象。本研究通過在育肥期新西蘭白兔的基礎(chǔ)日糧中添加不同比例的桑葉DNJ，探究其對(duì)新西蘭白兔生長(zhǎng)性能、血液生化指標(biāo)、屠宰性能和肉品質(zhì)的影響，為合理利用桑葉作為飼料資源開發(fā)提供理論數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

桑葉1-脫氧野尻霉素（DNJ）提取物購(gòu)于西安普瑞斯公司，純度為98%。

1.2 試驗(yàn)方法

隨機(jī)選取36只75日齡平均體重為(1.57±0.11) kg的健康新西蘭白兔分為3 組，每組12 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只。其中，對(duì)照組（Control）不添加DNJ，處理組為每千克基礎(chǔ)日糧分別添加0.4 g DNJ（L-DNJ 組，DNJ含量為0.4 g/kg）和2 g DNJ（H-DNJ 組，DNJ 含量為2 g/kg）。各組日糧混合均勻后制備成直徑為4～6 mm的顆粒，日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

試驗(yàn)前兔籠、兔舍經(jīng)甲醛和高錳酸鉀（2∶1）熏蒸消毒3 d。試驗(yàn)兔單籠飼養(yǎng)(60 cm×60 cm×45 cm)，籠內(nèi)配備自動(dòng)飲水裝置，糞尿從籠底部金屬網(wǎng)格漏出。舍內(nèi)溫度（25.10±2.65）℃，相對(duì)濕度（72.54±5.34）%，自然通風(fēng)和采光。試驗(yàn)包括7 d的預(yù)試期和42 d的正試期，每天定時(shí)飼喂兩次（8:00和18:00），期間自由采食和飲水。

1.3 生長(zhǎng)性能的測(cè)定

試驗(yàn)開始及結(jié)束晨飼前記錄所有試兔的體重，計(jì)算每只動(dòng)物的平均日增重。統(tǒng)計(jì)試兔的給料量和剩料量，計(jì)算每只動(dòng)物的平均日采食量。根據(jù)采食量和體增重計(jì)算各組的料重比。試驗(yàn)總個(gè)體數(shù)目36 只，每組各12只，以下各測(cè)定方法數(shù)目情況相同。

1.4 養(yǎng)分表觀消化率的測(cè)定

屠宰前1周進(jìn)行消化率試驗(yàn)，采集飼料和糞便樣品。全收糞法連續(xù)3 d收集糞便，混合均勻。按Pérez等[12]的方法處理糞樣，測(cè)定飼糧和糞樣中DM、CP、CF、EE、Ash、Ca、P、ADF、NDF 和ADL 的含量，計(jì)算其表觀消化率。養(yǎng)分表觀消化率（%）=（食入養(yǎng)分-糞中養(yǎng)分）/食入養(yǎng)分×100。

1.5 血液生化指標(biāo)的測(cè)定

試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天稱重后心臟采血，4 ℃靜置30 min，3 500 r/min 離心20 min，分離上層血清。用CRONY型半自動(dòng)生化分析儀及配套試劑盒測(cè)定生化指標(biāo)，包括谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT(U/L)、谷草轉(zhuǎn)氨酶AST(U/L)、總蛋白TP(g/L)、白蛋白ALB(g/L)、球蛋白GLB(g/L)、尿酸UA（μmol/L）、尿素氮BUN(μmol/L)、肌酐CRE(μmol/L)、血糖GLU(mmol/L)、三酰甘油TG(mmol/L)和膽固醇TC（mmol/L），試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.6 屠宰性能和肉品質(zhì)的測(cè)定

所有試驗(yàn)兔禁食12 h 后稱重，屠宰，測(cè)定全凈膛率、半凈膛率、背肌率和腿肌率。全凈膛率(%)=(全凈膛重/活重)×100；半凈膛率(%)=(半凈膛重/活重)×100；背肌率(%)=(背肌重/全凈膛重)×100；腿肌率(%)=(腿肌重/全凈膛重)×100。

取背最長(zhǎng)肌進(jìn)行肉品質(zhì)檢測(cè)。用便攜式pH測(cè)定儀檢測(cè)肉樣的pH 值；用色差儀CIEL*a*b*法測(cè)肉色；用C-LM3 型肌肉嫩度儀測(cè)定剪切力；用壓力計(jì)法在膨脹壓縮儀平臺(tái)上測(cè)失水率，失水率（%）=（加壓前肉樣重－加壓后肉樣重）/加壓前肉樣重×100。

1.7 統(tǒng)計(jì)分析

所有數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0中ANOVA方法分析，采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較，以P<0.05為顯著差異表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 桑葉DNJ對(duì)新西蘭白兔生長(zhǎng)性能的影響

從表2可知，L-DNJ組和H-DNJ組新西蘭白兔期末體重、平均日增重和平均日采食量顯著小于對(duì)照組（P<0.05），料重比隨DNJ 添加量增加有升高的趨勢(shì)，但未達(dá)到顯著水平。說明日糧中的桑葉DNJ 會(huì)抑制新西蘭白兔的采食量，減慢其生長(zhǎng)速度。

表2 桑葉DNJ對(duì)新西蘭白兔生長(zhǎng)性能的影響

2.2 桑葉DNJ 對(duì)新西蘭白兔養(yǎng)分消化率的影響（見表3）

表3 桑葉DNJ對(duì)新西蘭白兔主要養(yǎng)分表觀消化率的影響（%）

從表3可知，桑葉DNJ可降低新西蘭白兔對(duì)飼料干物質(zhì)和粗脂肪的消化率（P<0.05）；H-DNJ組的高濃度DNJ顯著提高了新西蘭白兔對(duì)粗蛋白的消化率（P<0.05）。DNJ 不影響新西蘭白兔對(duì)飼料纖維和礦物質(zhì)成分的消化率（P>0.05）。

2.3 桑葉DNJ 對(duì)新西蘭白兔血液生化指標(biāo)的影響（見表4）

從表4 可知，DNJ 處理對(duì)新西蘭白兔血清大部分生化參數(shù)的影響不顯著（P>0.05），包括谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白、白蛋白、球蛋白、肌酐、血糖、膽固醇和三酰甘油，但會(huì)顯著降低血清尿素氮和尿酸含量（P<0.05）。

表4 日糧中添加桑葉DNJ對(duì)新西蘭白兔血清生化指標(biāo)的影響

2.4 桑葉DNJ對(duì)新西蘭白兔屠宰性能和肉品質(zhì)的影響（見表5）

表5 日糧中添加桑葉DNJ對(duì)新西蘭白兔屠宰性能及肉品質(zhì)的影響

由表5 可知，添加DNJ 對(duì)新西蘭白兔全凈膛率、半凈膛率、背肌率和腿肌率無顯著影響，對(duì)肌肉pH、嫩度、失水率及紅度和黃度也無顯著影響（P>0.05），但會(huì)顯著提高肉色的亮度（P<0.05）。

3 討論

曹美琪等[13]檢測(cè)了6 個(gè)蛋白桑品種、3 個(gè)傳統(tǒng)桑品種葉片中的DNJ 含量，均值為0.26%。以此計(jì)算，本試驗(yàn)L-DNJ 組和H-DNJ 組飼糧所含的DNJ量分別相當(dāng)于154 g和769 g桑葉所含的DNJ量，即處理組飼糧分別含桑葉15%和75%。試驗(yàn)結(jié)果顯示，L-DNJ和H-DNJ 組新西蘭白兔期末體重和平均日增重顯著低于對(duì)照組（P<0.05），與侯啟瑞等[6]發(fā)現(xiàn)的15%桑葉粉添加量顯著降低獺兔生長(zhǎng)性能的結(jié)果一致，說明DNJ可能是桑葉中影響動(dòng)物體重增加的一種物質(zhì)，其作用效果直接影響了桑葉在飼料中的使用量。

根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，DNJ影響新西蘭白兔體重增加與其降低動(dòng)物的采食量和影響動(dòng)物對(duì)干物質(zhì)和粗脂肪的消化率有關(guān)。研究人員已經(jīng)證明，DNJ通過增加脂聯(lián)素水平來調(diào)節(jié)體重，而脂聯(lián)素會(huì)影響能量攝入，防止飲食導(dǎo)致的肥胖[14]。Kim等[15]研究了DNJ在高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠下丘腦中的作用，發(fā)現(xiàn)腦室內(nèi)(ICV)給予DNJ可降低下丘腦內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，激活瘦素誘導(dǎo)的JAK2 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和STAT3 信號(hào)通路，引起食欲抑制。在肥胖和糖尿病動(dòng)物模型試驗(yàn)中顯示，DNJ在降低餐后血糖的同時(shí)對(duì)脂代謝也有很強(qiáng)的調(diào)節(jié)作用，能夠使動(dòng)物對(duì)食物中的糖分和脂肪的利用受到阻礙[10]。在家禽的研究中，Hou 等[16]發(fā)現(xiàn)高濃度DNJ 能夠抑制皖西白鵝腸道中淀粉酶和脂肪酶的活性，降低盲腸微生物α-多樣性，誘導(dǎo)腸絨毛縮短，從而降低動(dòng)物對(duì)有機(jī)物、粗脂肪、酸性洗滌纖維和鈣的消化率。本試驗(yàn)中空腹血糖水平未受到添飼DNJ 的影響，與Hou 等[16]在鵝中的研究結(jié)果不同，可能不同的動(dòng)物對(duì)DNJ作用的敏感程度有差異，家禽更容易受到糖苷酶抑制劑的影響，長(zhǎng)期添飼會(huì)造成動(dòng)物低血糖。添飼DNJ并未造成新西蘭白兔血脂相關(guān)指標(biāo)降低，與Kong等[10]在動(dòng)物模型中的試驗(yàn)結(jié)果不同，說明DNJ在調(diào)節(jié)糖脂代謝中的作用主要是降低過高的血糖和血脂水平，對(duì)健康動(dòng)物正常水平的血糖和血脂無顯著影響。

一般來說，血清轉(zhuǎn)氨酶和白蛋白含量的變化與肝功能有關(guān)，球蛋白含量變化與免疫功能有關(guān)[17]。本試驗(yàn)中添飼DNJ 未造成新西蘭白兔血清轉(zhuǎn)氨酶和蛋白含量增加，說明試驗(yàn)動(dòng)物健康狀況良好，試驗(yàn)結(jié)果真實(shí)可信。血清尿素氮是動(dòng)物蛋白質(zhì)分解代謝產(chǎn)物，反映了蛋白質(zhì)在體內(nèi)的利用情況[18]。各試驗(yàn)組的尿素氮指標(biāo)均低于對(duì)照組，表明桑葉DNJ具有提高新西蘭白兔蛋白質(zhì)合成和氮沉積的作用，提高了蛋白質(zhì)的利用率，這與常文環(huán)等[18]的研究結(jié)論基本一致。尿酸是嘌呤代謝的產(chǎn)物，約三分之二尿酸來源于內(nèi)源性代謝，三分之一來源于飲食嘌呤豐富的食物，如蛋白質(zhì)[19]。本試驗(yàn)添飼DNJ 組新西蘭白兔的尿酸水平均低于對(duì)照組，可能與采食量減少造成蛋白質(zhì)類成分進(jìn)食不足有關(guān)。

屠宰性能和肉品質(zhì)是肉用畜禽經(jīng)濟(jì)價(jià)值的重要指標(biāo)。與桑葉的作用不同，DNJ對(duì)屠宰性能和肉品質(zhì)大多數(shù)指標(biāo)無顯著影響。侯啟瑞等[6]在獺兔上的試驗(yàn)認(rèn)為添飼桑葉可提高腿肌率，半凈膛率、全凈膛率和心臟指數(shù)有升高的趨勢(shì)。閆曉蓉等[20]報(bào)道，添飼桑葉可顯著提高新西蘭白兔背最長(zhǎng)肌和腿肌重量，降低肌肉失水率和剪切力，提高肉色的亮度和紅度。肉色主要取決于肌肉中肌紅蛋白和血紅蛋白的含量和化學(xué)狀態(tài)。紫紅色的脫氧肌紅蛋白與氧結(jié)合生成鮮紅色的氧合肌紅蛋白，脫氧肌紅蛋白和氧合肌紅蛋白均可以被氧化生成褐色的高鐵肌紅蛋白，使肉色變暗[21]。本試驗(yàn)DNJ的添加使兔肉亮度提高，預(yù)示DNJ有阻止肌紅蛋白氧化的可能性，與桑葉的抗氧化功能一致。黃思雨等[22]報(bào)道，綠茶、桑葉和臭黃荊葉細(xì)粉水提液均具有殺菌和抗氧化能力。

4 小結(jié)

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，每千克基礎(chǔ)日糧添加0.4 g 或2 g的桑葉DNJ對(duì)新西蘭白兔血液生化指標(biāo)和肉品質(zhì)的影響不大，但會(huì)對(duì)新西蘭白兔的生長(zhǎng)性能和有機(jī)物質(zhì)消化率產(chǎn)生抑制作用，說明桑葉中的DNJ一定程度上影響了動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化，大量食用桑葉不利于動(dòng)物快速育肥，DNJ是影響桑葉在動(dòng)物飼料中使用量的一種因素。