徐鋒 程德勇 蔣貽乾 肖強(qiáng)古

慢性乙型肝炎（HBV）不僅是肝硬化的重要誘因，還具有癌變風(fēng)險(xiǎn)，而肝纖維化是癌變的重要病理進(jìn)程［1］。近年來，研究顯示早期肝纖維化經(jīng)積極治療可發(fā)生逆轉(zhuǎn)［2］，因而早期識別肝纖維化是為治療的關(guān)鍵。有研究發(fā)現(xiàn)，HBV患者乙肝病毒脫氧核糖核酸（HBVDNA）水平與肝纖維化呈顯著相關(guān)，但臨床對此認(rèn)識尚有爭議［3-4］。本文回顧性收集84例慢性乙型肝炎患者的臨床資料，旨在分析慢性乙型肝炎HBV-DNA含量與血清纖維化指標(biāo)之間關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性收集2016年10月至2019年10月本院就診的84例HBV患者的臨床資料。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合慢性乙型肝炎防治指南（2015更新版）［5］HBV的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②首次確診，無抗病毒或抗纖維化治療史；③病歷資料完整。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有甲型或丙型肝炎者；②合并有肝臟或其他惡性腫瘤者；③合并有肝膽結(jié)石、遺傳代謝性疾病者。其中，男56例、女28例；年齡21～64歲，平均（46.18±14.75）歲；體重指數(shù)（BMI）19～23 kg/m2，平均（20.83±2.09）kg/m2；病程1～7年，平均（3.89±1.15）年；Child-pugh肝功能分級，A級34例、B級50例。

1.2 研究方法 患者入院后24 h內(nèi)采集清晨空腹肘靜脈血5 ml，經(jīng)TG18G臺式高速離心機(jī)以3000 r/min離心15 min，取上清液送檢。采用熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）檢測HBV-DNA病毒載量，試劑盒購自杭州輝圖生物科技有限公司（國械注準(zhǔn)20153402045）。采用放射免疫法檢測患者透明質(zhì)酸（HA）、層粘連蛋白（LN）、Ⅲ型前膠原（PCⅢ）及Ⅳ型膠原（CⅣ）等血清肝纖維化指標(biāo)水平，試劑盒均購自南京信帆生物技術(shù)有限公司。

1.3 觀察指標(biāo) （1）血清HBV-DNA含量：根據(jù)測得的血清HBV-DNA含量將所有患者分為A、B、C三組［6］，HBV-DNA載量＞105IU/ml者為A組，103IU/ml≤HBVDNA載量≤105IU/ml者為B組，HBV-DNA載量＜103 IU/ml者為C組；A組28例，B組30例，C組26例。（2）血清肝纖維化指標(biāo)（HA、LN、PCⅢ及CⅣ）水平。（3）血清HBV-DNA含量與肝纖維化指標(biāo)的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（）表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，組間比較采用卡方檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson法。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組患者臨床資料比較 見表1。

表1 三組患者臨床資料比較（）

表1 三組患者臨床資料比較（）

Child-pugh肝功能分級（n）男 女 A級 B級A 組 28 18 10 45.47±13.09 20.12±2.01 3.82±0.95 10 18 B 組 30 24 6 47.01±12.54 19.86±1.73 3.66±1.07 14 16 C 組 26 14 12 46.92±13.37 19.64±1.89 3.90±1.05 10 16 χ2/F值 4.395 0.125 0.443 0.403 0.785 P值 0.111 0.883 0.643 0.670 0.676組別 n 性別 年齡（歲） BMI（kg/m2）病程（年）

2.2 三組血清肝纖維化指標(biāo)比較 見表2。

表2 不同HBV DNA水平患者血清纖維化指標(biāo)比較

2.3 血清HBV-DNA含量與肝纖維化指標(biāo)水平的相關(guān)性分析 見表3。

表3 HBV-DNA含量與血清肝纖維化指標(biāo)水平的相關(guān)性分析

3 討論

HBV-DNA病毒復(fù)制被認(rèn)為是慢性乙肝的始動(dòng)因素，有學(xué)者認(rèn)為HBV-DNA水平可反映病毒增殖活躍程度，為乙肝病情評估提供依據(jù)［7-8］。肝纖維化作為乙肝病毒感染后肝臟炎癥與肝組織修復(fù)的必然結(jié)果，是肝硬化的重要病理特征［9］。顧生旺等［10］研究提出，透明質(zhì)酸（HA）是肝纖維化的預(yù)測因子。HA是由星狀細(xì)胞分泌的粘多糖，能較準(zhǔn)確地反映肝臟星狀細(xì)胞功能狀態(tài)，星狀細(xì)胞異?；罨图?xì)胞外間質(zhì)升高是肝纖維化發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。本研究結(jié)果顯示，不同HBV-DNA水平患者的病程和肝功能分級均無差異，但HA水平存在顯著差異，且與HBV-DNA水平呈正相關(guān)，提示HBVDNA可作為評估肝纖維化的定量指標(biāo)。隨著HBV-DNA水平升高，病毒復(fù)制更加活躍，造成肝臟星狀細(xì)胞組織炎癥進(jìn)一步加重，導(dǎo)致血清HA水平升高，進(jìn)而加速肝纖維化過程。層粘連蛋白（LN）是肝細(xì)胞分化增殖的重要蛋白酶，在乙肝病毒復(fù)制活躍時(shí)增加肝臟損傷，LN被釋放并沉積于肝竇內(nèi)皮細(xì)胞間隙［11］，可在一定程度上反映乙肝病毒增殖狀態(tài)。Ⅲ型前膠原（PCⅢ）水平與HBV-DNA含量具有一定相關(guān)性，可能是因?yàn)镻CⅢ升高多提示Ⅲ型膠原合成速率升高，而Ⅲ型膠原合成速率與乙肝病毒感染后免疫損傷密切相關(guān)［12］。因此，監(jiān)測HBV-DNA含量有助于評估肝纖維化程度，尤其是無癥狀的慢性乙肝病毒攜帶者，監(jiān)測HBV-DNA水平對于防止患者進(jìn)展至肝硬化具有重要臨床意義。本研究還發(fā)現(xiàn)，Ⅳ型膠原（CⅣ）水平與HBV-DNA含量并不存在顯著線性關(guān)系，可能是機(jī)體因免疫因素造成的HBVDNA水平異常，免疫清除期HBV患者雖然炎癥進(jìn)展、肝損傷加重，但此時(shí)HBV-DNA并不相應(yīng)升高［13］，與周萍等［14］報(bào)道不一致?？梢姡瑢τ诼砸倚透窝谆颊?，監(jiān)測HBV患者免疫功能對指導(dǎo)臨床也同樣重要。

綜上，慢性乙型肝炎患者HBV-DNA水平與血清肝纖維化指標(biāo)具有一定相關(guān)性，監(jiān)測其HBV-DNA含量與免疫功能對指導(dǎo)臨床具有重要意義。