呼鳳蘭, 周淑萍
(呂梁學(xué)院, 山西 離石 033000)
冰菜是番杏科植物,又名冰葉日中花、冰花、冰草、水晶冰菜。冰菜的葉表面和莖的表面覆蓋著大量的水泡狀的細胞,且細胞中含有大量水分,在陽光下如冰晶一般,所以又稱為水晶冰菜。冰菜細胞中的液體含有鹽分,是一種比較耐干旱,而且對土壤質(zhì)量要求不高的植物,在缺乏水資源和貧瘠的地區(qū)具有很高的推廣價值。冰菜的原產(chǎn)地在南非納米比沙漠等干旱地域,在亞洲西部和歐洲也均有冰菜的分布,我國已引進種植。植物生長調(diào)節(jié)劑是一類具備植物生物活性且由人工合成的、可以調(diào)節(jié)植物生長和發(fā)育的有機物質(zhì),又被稱為植物外源激素。研究表明,使用植物激素處理植物可以影響植物生長。有些植物激素對植物的生長發(fā)育起到了促進作用,而有些植物生長調(diào)節(jié)劑對植物會起到抑制作用。生長素、赤霉素(GA3)、細胞分裂素、乙烯利(ETH)、脫落酸(ABA)、6-芐氨基嘌呤(6-BA)和水楊酸等都是植物生長調(diào)節(jié)劑。針對冰菜產(chǎn)量低、種植范圍小的問題,可利用植物生長調(diào)節(jié)劑來促進種子萌發(fā),進而提高冰菜產(chǎn)量。
實驗材料:冰菜種子,濾紙。
GA3,IAA,6-BA,ABA,ETH,電子天平,燒杯,培養(yǎng)皿。
1.3.1冰菜種子的處理
挑選籽粒豐滿、大小均一的冰菜種子[2],先用少量95%的乙醇溶液消毒2~3 min,然后用蒸餾水沖洗3~5次,最后用濾紙將水分吸干備用。
1.3.2不同濃度植物激素對冰菜種子的處理
將冰菜種子分為7組,每組20粒,分別放入消過毒的培養(yǎng)皿中。將稱量好的粉末狀的植物激素放入燒杯中,然后加入少量95%的乙醇溶液對植物激素進行溶解,再加入適量蒸餾水。將配置好的植物激素溶液倒入培養(yǎng)皿中,蓋上培養(yǎng)皿蓋,24 h后,進行發(fā)芽處理。各植物激素濃度詳見表1。
表1 不同濃度激素處理組合Table 1 Combination of hormone treatment with different concentrations
1.3.3發(fā)芽處理
將處理后的冰菜種子沖洗3~5次,去除表面的植物生長調(diào)節(jié)劑。在培養(yǎng)皿底部放2~3層濾紙[7],將冰菜種子均勻地鋪在培養(yǎng)皿中,噴灑適量的蒸餾水,隔日開始觀察,每天觀察后都在培養(yǎng)皿中噴灑適量蒸餾水。連續(xù)觀察7 d并記錄每日發(fā)芽數(shù),冰菜種子連續(xù)3 d不發(fā)芽視為不發(fā)芽。發(fā)芽以冰菜種子吐白1 mm為標準[8],7 d后統(tǒng)計冰菜的發(fā)芽率(GR)、發(fā)芽勢(GE)、發(fā)芽指數(shù)(GI)[10]。
各指標的公式參照文獻[11]:
GR(%)=(發(fā)芽種子數(shù)/20)×100%;
GE(%)=(發(fā)芽高峰期種子數(shù)/20)×100%;
GI=∑(Gt/Dt),式中:Gt為第t天種子發(fā)芽數(shù);Dt為對應(yīng)的種子發(fā)芽的天數(shù)。
由圖1所示,當(dāng)GA3濃度在0~120 mg·L-1之間時,冰菜種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)呈上升趨勢;當(dāng)GA3濃度達到120 mg·L-1時,發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)最高,分別為80%、65%、12。說明0~120 mg·L-1GA3處理對冰菜種子的萌發(fā)起促進作用,120 mg·L-1的GA3最有利于冰菜種子萌發(fā)。這是因為適量濃度的GA3能夠誘導(dǎo)α-淀粉酶的產(chǎn)生,打破種子休眠的狀態(tài),細胞新陳代謝提高,冰菜種子容易發(fā)芽。當(dāng)GA3濃度在120~360 mg·L-1之間時,冰菜種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)呈下降趨勢。說明120~360 mg·L-1GA3處理對冰菜種子萌發(fā)的促進作用減小,甚至抑制冰菜種子的萌發(fā)。這是因為過量GA3破壞了冰菜種子的內(nèi)部結(jié)構(gòu),導(dǎo)致細胞死亡,無法發(fā)芽。
圖1 不同濃度GA3對冰菜種子萌發(fā)的影響Fig.1 Effects of different concentrations of GA3 on seed germination of M. crystallinum seeds
由圖2所示,當(dāng)IAA濃度在0~150 mg·L-1之間時,冰菜種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)呈上升趨勢;當(dāng)IAA濃度達150 mg·L-1時,發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)最高,分別為70%、70%、11。說明0~150 mg·L-1IAA處理對冰菜種子萌發(fā)起促進作用,150 mg·L-1的IAA最有利于冰菜種子萌發(fā)。這是因為適量濃度的IAA會使細胞壁變得松散,促進細胞的滲透性吸水,細胞開始伸長并進一步合成其他物質(zhì)。當(dāng)IAA濃度在150~ mg·L-1之間時,冰菜種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)呈下降趨勢。150~300 mg·L-1IAA處理對冰菜種子萌發(fā)的促進作用減少,甚至抑制冰菜種子萌發(fā)。這是因為過量IAA會使細胞合成乙烯,抵消了IAA的作用。
圖2 不同濃度IAA對冰菜種子萌發(fā)的影響Fig.2 Effects of different concentrations of IAA on seed germination of M. crystallinum seeds
由圖3所示,當(dāng)6-BA濃度在0~2 mg·L-1之間時,冰菜種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)呈上升趨勢;當(dāng)6-BA濃度為2 mg·L-1時,發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)最高,分別為65%、55%、16。說明0~2 mg·L-16-BA處理對冰菜種子的萌發(fā)起促進作用,2 mg·L-1的6-BA最有利于冰菜種子萌發(fā)。這是因為適量濃度的6-BA會促進某些酶的合成,進而打破種子休眠,促使細胞分裂。當(dāng)6-BA濃度在2~100 mg·L-1時,冰菜種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)呈下降趨勢。2~100 mg·L-16-BA處理對冰菜種子萌發(fā)的促進作用減小,甚至抑制冰菜種子的萌發(fā)。這是因為過量6-BA破壞了細胞的某些酶,從而使細胞新陳代謝速率降低。
圖3 不同濃度6-BA濃度對冰菜種子萌發(fā)的影響Fig.3 Effects of different concentrations of 6-BA on seed germination of M. crystallinum seeds
由圖4所示,當(dāng)ABA濃度為0 mg·L-1時,發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)最高,分別為55%、35%、13。當(dāng)ABA濃度在0~80 mg·L-1之間時,冰菜種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)呈下降趨勢;當(dāng)ABA濃度在80~200 mg·L-1之間時,冰菜種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)均為0。說明0~80 mg·L-1ABA處理對冰菜種子萌發(fā)的抑制作用逐漸增強,當(dāng)ABA濃度在80~200 mg·L-1時,完全抑制了冰菜種子的萌發(fā)。這是因為ABA會抑制細胞合成α-淀粉酶,從而抑制細胞合成蛋白質(zhì)等物質(zhì),抑制細胞分裂,最后引起種子休眠。
圖4 不同濃度ABA對冰菜種子萌發(fā)的影響Fig.4 Effects of different concentrations of ABA on seed germination of M. crystallinum seeds
由圖5所示,當(dāng)ETH濃度在0~80 mg·L-1之間時,冰菜種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)呈上升趨勢;當(dāng)ETH濃度為80 mg·L-1時,發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)最高,分別為65%、60%、13。說明0~80 mg·L-1ETH處理對冰菜種子的萌發(fā)起促進作用,80 mg·L-1的ETH最有利于冰菜種子萌發(fā)。這是因為適量濃度的ETH活化了某種酶,進而打破種子休眠,加速細胞的新陳代謝,促使細胞分裂。當(dāng)ETH濃度在80~120 mg·L-1之間時,冰菜種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)呈下降趨勢。說明80~120 mg·L-1ETH處理對冰菜種子萌發(fā)的促進作用下降,甚至抑制冰菜種子的萌發(fā)。這可能是因為過量ETH破壞了細胞壁結(jié)構(gòu),促使細胞死亡。
圖5 不同濃度ETH對冰菜種子萌發(fā)的影響Fig.5 Effects of different concentrations of ETH on seed germination of M. crystallinum seeds
冰菜營養(yǎng)價值極高,但種子極小,在萌發(fā)時需要一定的條件。使用植物外源激素能夠改善冰菜種子萌發(fā)率低的問題。本試驗通過使用不同濃度梯度的5種植物生長調(diào)節(jié)劑對冰菜種子進行處理,探究植物生長調(diào)節(jié)劑對冰菜種子萌發(fā)的影響。結(jié)果表明,120 mg·L-1的GA3為冰菜種子萌發(fā)的最適濃度;150 mg·L-1的IAA為冰菜種子萌發(fā)的最適濃度;80 mg·L-1的ETH為冰菜種子萌發(fā)的最適濃度;ABA可以抑制冰菜種子萌發(fā),當(dāng)ABA濃度大于80 mg·L-1時,冰菜種子完全不萌發(fā);2 mg·L-1的6-BA為冰菜種子萌發(fā)的最適濃度。這5種植物生長調(diào)節(jié)劑對冰菜種子萌發(fā)的促進作用從大到小的列順序為:GA3>IAA>ETH>6-BA>ABA。
GA3對冰菜種子萌發(fā)的效果最好,主要表現(xiàn)在兩個方面,第一,使用適當(dāng)GA3的冰菜種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)都較好,而且使用GA3以后的冰菜種子的根莖葉也發(fā)展的較好。這是因為使用適量素以后會誘導(dǎo)α-淀粉酶的產(chǎn)生,促使細胞分裂,新陳代謝加速,進而使冰菜萌發(fā);GA3過量則會抑制冰菜種子萌發(fā),這是因為過量的GA3可能破壞了細胞結(jié)構(gòu)。使用適量的IAA會使細胞壁變得松散,促進細胞的滲透性吸水,細胞開始伸長并進一步合成其他物質(zhì)。而過量的IAA會使細胞產(chǎn)生乙烯,抵消IAA的作用。使用適量的ETH會活化細胞的某種酶,促使細胞分裂,使冰菜種子萌發(fā),過量的ETH則會破壞細胞結(jié)構(gòu)。使用適量的6-BA會促進某些酶的合成,打破種子的休眠狀態(tài),過量的6-BA又會抑制某些酶的合成。ABA會抑制冰菜種子萌發(fā)主要是因為ABA會抑制細胞合成α-淀粉酶,抑制細胞分裂。
由于GA3對冰菜種子萌發(fā)的效果最好,在今后培養(yǎng)冰菜時,可以添加適量GA3來促進冰菜種子萌發(fā)。