趙萬富

(鄭州市第三人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 鄭州 450000)

慢性阻塞性肺疾病急性加重(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD)屬于臨床常見的呼吸系統(tǒng)疾病。近年來隨著廣譜抗菌藥物的普及應(yīng)用以及患者自身免疫功能的降低，侵襲性肺部真菌感染成為AECOPD患者死亡的主要原因[1]。AECOPD的早期確診和對(duì)癥干預(yù)對(duì)改善患者預(yù)后、降低病死率具有重要意義。然而，真菌感染性疾病診斷困難，真菌培養(yǎng)雖能確定診斷，但操作復(fù)雜，耗時(shí)久易貽誤治療時(shí)機(jī)。G試驗(yàn)和血清白細(xì)胞介素(interleukin，IL)-6、IL-10、半乳甘露聚糖(galactomannan，GM)水平檢測均是臨床上常用的感染性疾病診斷方法，各具優(yōu)缺點(diǎn)。本研究旨在觀察上述方法聯(lián)合應(yīng)用對(duì)AECOPD并發(fā)侵襲性肺部真菌感染的早期診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年3月至2019年3月在鄭州市第三人民醫(yī)院就診的72例AECOPD患者，把單純AECOPD患者作為對(duì)照組(50例)，把并發(fā)侵襲性肺部真菌感染患者作為觀察組(22例)。觀察組男13例，女9例；年齡46～73歲，平均(59.48±5.67)歲；體質(zhì)量指數(shù)(body mass index，BMI)17.6～25.4 kg·m-2，平均(21.51±1.33)kg·m-2；合并基礎(chǔ)疾病高血壓5例，冠心病2例，糖尿病2例。對(duì)照組男27例，女23例；年齡44～72歲，平均(60.18±5.39)歲；BMI為17.2～25.7 kg·m-2，平均(21.48±1.26)kg·m-2；合并基礎(chǔ)疾病高血壓13例，冠心病4例，糖尿病5例。兩組患者性別、年齡、BMI、合并基礎(chǔ)疾病等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)鄭州市第三人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①明確COPD病史；②處于急性發(fā)作期；③入組前未接受抗真菌治療；④患者自愿簽署知情同意書。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①細(xì)菌及其他病原體感染；②肺以外部位感染。

1.3 檢測方法

1.3.1收集樣本 患者均行G試驗(yàn)和血清IL-6、IL-10、GM水平檢測。取患者晨起空腹靜脈血3 mL，離心半徑8 cm，3 500 r·min-1離心10 min，取上清液，保存至-80 ℃冰箱待測。

1.3.2G試驗(yàn) 取待測血清加入酶反應(yīng)主劑，待溶解以微量加樣器移至9 mm×65 mm平底試管，插入微生物快速動(dòng)態(tài)監(jiān)測系統(tǒng)(湛江安度斯生物有限公司，MB-80型)自動(dòng)顯示1，3-β-D葡聚糖水平>10 ng·L-1記為陽性。

1.3.3血清IL-6、IL-10水平檢測 取待測血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法測定患者血清IL-6、IL-10水平。

1.3.4GM檢測 取待測血清，與配比血清處理液混勻，水浴3 min(100 ℃)，離心，取上清液50 μL，與50 μL結(jié)合液加入EB-A2微孔板，封板，孵育90 min(37 ℃)，加顯色液，避光置30 min，加終止液以自動(dòng)定量酶標(biāo)儀讀吸光度值(A值)，A值需介于0.3～0.8間，連續(xù)2次有效A值>0.5者為陽性(+)。并發(fā)侵襲性肺部真菌感染陽性標(biāo)準(zhǔn)：上述檢測任一診斷為陽性即為陽性。

1.4 觀察指標(biāo)(1)對(duì)比兩組G試驗(yàn)和血清IL-6、IL-10、GM水平檢測結(jié)果。(2)以真菌培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn)，分析G試驗(yàn)和血清IL-6、IL-10、GM水平檢測結(jié)果。(3)比較血清IL-6、IL-10、GM水平檢測與G試驗(yàn)聯(lián)合診斷效能。

2 結(jié)果

2.1 G試驗(yàn)和血清IL-6、IL-10、GM水平檢測觀察組患者1，3-β-D葡聚糖水平、血清IL-6及IL-10水平、GM檢測A值高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組患者G試驗(yàn)和血清IL-6、IL-10、GM水平檢測結(jié)果比較

2.2 檢測結(jié)果72例AECOPD患者中，經(jīng)真菌培養(yǎng)確診為并發(fā)侵襲性肺部真菌感染22例，血清IL-6、IL-10水平檢測檢出12例，G試驗(yàn)檢出12例，GM檢測檢出14例，3種方法聯(lián)合檢出者24例。見表2。

表2 3種檢測方法結(jié)果比較(n)

2.3 診斷效能G試驗(yàn)聯(lián)合血清IL-6、IL-10、GM水平檢測AECOPD并發(fā)侵襲性肺部真菌感染靈敏度為90.91%，高于G試驗(yàn)和血清IL-6、IL-10、GM水平檢測，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；G試驗(yàn)聯(lián)合血清IL-6、IL-10、GM水平檢測漏診率為9.09%，低于G試驗(yàn)、GM檢測、血清IL-6及IL-10水平檢測，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；3種方法聯(lián)合對(duì)AECOPD并發(fā)侵襲性肺部真菌感染診斷的準(zhǔn)確度、特異度、誤診率、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值與G試驗(yàn)和血清IL-6、IL-10、GM水平檢測比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 不同方法診斷效能比較[%(n/N)]

3 討論

COPD病情久且常反復(fù)發(fā)作，患者長期接受糖皮質(zhì)激素、抗生素治療可致免疫功能抑制，易遭受二重感染，其中以侵襲性肺部真菌感染最為常見[2]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，AECOPD并發(fā)侵襲性肺部真菌感染時(shí)病死率達(dá)95.00%[3]。因此，臨床上需加強(qiáng)早期預(yù)防及診斷，以改善患者預(yù)后。

血清IL-6、IL-10及GM水平檢測是臨床上評(píng)估機(jī)體炎癥反應(yīng)及真菌感染的常用方法。IL-6為炎癥指標(biāo)，有研究表明，正常情況下血清中IL-6水平極低(<7 ng·L-1)，當(dāng)致病菌感染時(shí)會(huì)迅速升高[4-5]；IL-10是免疫調(diào)節(jié)因子，主要由Th2及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞生成，能調(diào)節(jié)Th1細(xì)胞應(yīng)答及巨噬細(xì)胞活性，相關(guān)研究證實(shí)，AECOPD患者血清IL-6、IL-10水平會(huì)升高，且可評(píng)估炎癥反應(yīng)的嚴(yán)重程度[6]。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組AECOPD患者血清IL-6、IL-10水平高于對(duì)照組，與上述研究結(jié)果相符，說明存在侵襲性肺部真菌感染時(shí)IL-6、IL-10增加，但是發(fā)現(xiàn)血清IL-6、IL-10升高并無特異性，因此，無法鑒別真菌感染。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，觀察組患者血清1，3-β-D葡聚糖水平和A值高于對(duì)照組，與血清IL-6、IL-10水平變化一致，或可輔助鑒別真菌感染。GM檢測主要適用于侵襲性曲霉菌的早期診斷，但有報(bào)道顯示，β(1-5)呋喃半乳糖殘基為曲霉菌特有的細(xì)胞壁多糖成分，GM檢測存在一定漏診情況[7-8]。G試驗(yàn)主要檢測真菌細(xì)胞壁成分1，3-β-D-葡聚糖，研究顯示，人體吞噬細(xì)胞吞噬真菌后可持續(xù)釋放上述物質(zhì)，迅速升高血液、體液中1，3-β-D-葡聚糖水平，有利于真菌感染的早期診斷[9-10]。本研究結(jié)果顯示，G試驗(yàn)聯(lián)合血清IL-6、IL-10、GM水平檢測AECOPD并發(fā)侵襲性肺部真菌感染靈敏度高于G試驗(yàn)和血清IL-6、IL-10、GM水平檢測，漏診率低于G試驗(yàn)和血清IL-6、IL-10、GM水平檢測，提示G試驗(yàn)聯(lián)合血清IL-6、IL-10水平及GM檢測在AECOPD并發(fā)侵襲性肺部真菌感染具有較高的診斷效能，有利于疾病的早期確診。但本研究首次探討G試驗(yàn)聯(lián)合血清IL-6、IL-10、GM水平檢測對(duì)AECOPD并發(fā)侵襲性肺部真菌感染的診斷價(jià)值，且樣本量較小，所得結(jié)論需大樣本量研究進(jìn)一步驗(yàn)證。

綜上可知，G試驗(yàn)聯(lián)合血清IL-6、IL-10、GM水平檢測對(duì)AECOPD并發(fā)侵襲性肺部真菌感染診斷具有較高的靈敏度，能降低早期診斷漏診率，可為臨床上制定治療方案提供參考依據(jù)。