程惠芬

（安吉縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，浙江 安吉 313300）

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染是導(dǎo)致慢性乙型肝炎（簡(jiǎn)稱慢性乙肝）及相關(guān)肝硬化、肝細(xì)胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）的主要原因[1]。慢性乙肝的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，在肝細(xì)胞變性中起主導(dǎo)作用的是機(jī)體自身的細(xì)胞免疫反應(yīng)[2]。慢性乙肝早期確診并明確病情嚴(yán)重程度對(duì)患者具有重要意義，但由于慢性乙肝早期可能無任何不適表現(xiàn)，加上肝臟代償能力極強(qiáng)，導(dǎo)致慢性乙肝早期發(fā)現(xiàn)較為困難[3]。有研究結(jié)果顯示，慢性乙肝患者P-選擇素、細(xì)胞間黏附分子1（intercellular cell adhesion molecule-1，ICAM-1）和白細(xì)胞介素（interleukin，IL）17A水平異常[4-5]。為此，本研究擬探討血清P-選擇素、ICAM-1、IL-17A水平與HBV感染嚴(yán)重程度的關(guān)系。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

選取2019年2月—2020年3月安吉縣人民醫(yī)院確診的HBV感染患者132例，其中男98例、女34例，年齡（45.10±8.10）歲，包括慢性乙肝患者82例（慢性乙肝組）、肝硬化患者21例（肝硬化組）、HCC患者29例（HCC組）。另選取同期安吉縣人民醫(yī)院體檢正常者62名作為正常對(duì)照組，其中男39名、女23名，年齡（44.20±9.10）歲。各組之間年齡和性別差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究經(jīng)安吉縣人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有對(duì)象均知情同意。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) （1）符合《慢性乙型肝炎防治指南（2019版）》[6]中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）未進(jìn)行過抗病毒及免疫調(diào)節(jié)治療；（3）依從性較好；（4）患者及家屬知情并簽署知情同意書。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) （1）合并肺炎等其他全身感染性疾病；（2）患丙型肝炎等其他類型的病毒性肝炎；（3）患酒精性肝炎、自身免疫性肝炎、脂肪肝等；（4）合并肝硬化、巨大肝血管瘤、肝癌等其他肝臟疾病；（5）精神障礙；（6）溝通障礙及精神異常；（7）有嚴(yán)重的心、肺功能異常。

1.3 方法

1.3.1 血清P-選擇素、ICAM-1及IL-17A檢測(cè) 采集所有對(duì)象清晨空腹靜脈血3 mL，145×g離心分離血清，-80 ℃保存，統(tǒng)一檢測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清P-選擇素、ICAM-1及IL-17A水平，試劑盒購自武漢默沙克有限公司。

1.3.2 慢性乙肝病情嚴(yán)重程度的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn) （1）輕度：體內(nèi)攜帶HBV，但無明顯的肝病癥狀。（2）中度：有肝病癥狀，可見輕度乏力、食欲減少等癥狀，白蛋白降低，但仍≥35 g/L，膽紅素≤35 μmol/L，凝血酶原活動(dòng)度≥60%。（3）重度：肝功能明顯異常，且白蛋白＜35 g/L，膽紅素＞35 μmol/L，白蛋白/球蛋白比值＜1，凝血酶原活動(dòng)度＜60%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 26.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。呈正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以表示，多組間比較采用方差分析。采用Logistic回歸分析評(píng)估重度慢性乙肝發(fā)生的危險(xiǎn)因素。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評(píng)估P-選擇素、ICAM-1、IL-17A判斷重度慢性乙肝的效能。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清P-選擇素、ICAM-1及IL-17A水平的比較

正常對(duì)照組、慢性乙肝組、肝硬化組、HCC組之間P-選擇素、ICAM-1、IL-17A水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 各組血清P-選擇素、ICAM-1及IL-17A表達(dá)水平的比較

表1 各組血清P-選擇素、ICAM-1及IL-17A表達(dá)水平的比較

注：與正常對(duì)照組比較，*P＜0.05；與慢性乙肝組比較，#P＜0.05；與肝硬化組比較，△P＜0.05；空白表示無此項(xiàng)。

組別 例數(shù) P-選擇素/（μg/L） ICAM-1/（μg/L） IL-17A/（ng/L）正常對(duì)照組 62 19.35±2.86 16.12±5.59 232.72±21.31 HBV感染組慢性乙肝組 82 50.51±3.53* 12.73±1.26* 410.32±28.59*肝硬化組 21 73.14±5.10*# 18.65±1.18*# 501.65±32.58*#HCC組 29 65.63±6.01*#△ 10.91±1.07*#△ 389.34±30.12*#△F值 90.11 75.63 105.69 P值 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01

2.2 輕、中、重度慢性乙肝患者血清P-選擇素、ICAM-1、IL-17A水平的比較

輕、中、重度慢性乙肝患者之間血清P-選擇素、ICAM-1、IL-17A水平依次升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 輕、中、重度慢性乙肝患者之間血清P-選擇素、ICAM-1、IL-17A水平的比較

表2 輕、中、重度慢性乙肝患者之間血清P-選擇素、ICAM-1、IL-17A水平的比較

注：與輕度組比較，*P＜0.05；與中度組比較，#P＜0.05；空白表示無此項(xiàng)。

組別 例數(shù) P-選擇素（μg/L） ICAM-1（μg/L） IL-17A（ng/L）輕度組 19 50.08±4.67 12.17±4.38 357.12±23.41中度組 45 63.21±6.34* 28.03±3.24* 410.38±26.67*重度組 18 70.35±7.13*# 35.67±2.06*# 472.03±28.82*#F值 15.43 32.61 20.03 P值 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01

2.3 P-選擇素、ICAM-1、IL-17A水平診斷慢性乙肝的Logistic回歸分析

以是否發(fā)生重度慢性乙肝為因變量（0=否，1=是），以P-選擇素、ICAM-1、IL-17A為自變量，建立Logistic回歸模型，并校正年齡等混雜因素。結(jié)果顯示，P-選擇素、ICAM-1、IL-17A是重度慢性乙肝發(fā)生的危險(xiǎn)因素[比值比（odds ratio，OR）值分別為9.21、8.01、5.23，95%可信區(qū)間（confidence interval，CI）分別為1.82～18.62、1.51～15.55、1.19～14.48]。見表3。

表3 P-選擇素、ICAM-1、IL-17A水平診斷重度慢性乙肝的Logistic回歸分析

2.4 P-選擇素、ICAM-1及IL-17A診斷重度慢性乙肝的效能

ROC曲線分析結(jié)果顯示，P-選擇素、ICAM-1、IL-17A診斷重度慢性乙肝的曲線下面積（area under curve，AUC）分別為0.807、0.700、0.672。見表4、圖1。

表4 P-選擇素、ICAM-1及IL-17A診斷重度慢性乙肝的ROC曲線參數(shù)

圖1 P-選擇素、ICAM-1及IL-17A診斷重度慢性乙肝的ROC曲線

3 討論

P-選擇素是黏附分子選擇素超家族中的一員，能夠促進(jìn)中性粒細(xì)胞、血小板、單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附，促使其進(jìn)入炎癥反應(yīng)部位，在炎癥反應(yīng)中起重要作用[7]。P-選擇素小部分來源于活化的內(nèi)皮細(xì)胞，大部分來源于衰老、被破壞及活化的血小板碎片，因此可反映血小板及血管內(nèi)皮細(xì)胞的活化程度[8]。P-選擇素在正常機(jī)體內(nèi)皮細(xì)胞和血小板表面不表達(dá)，當(dāng)機(jī)體被炎癥介質(zhì)、脂多糖、過氧化物等侵害時(shí)，內(nèi)皮細(xì)胞和血小板表面會(huì)表達(dá)大量P-選擇素[9]。P-選擇素可調(diào)節(jié)血液細(xì)胞的移動(dòng)，使其聚集在發(fā)生組織損傷和感染的部位，對(duì)血液循環(huán)中的白細(xì)胞、血小板等產(chǎn)生作用，進(jìn)而促進(jìn)HBV感染的發(fā)生、發(fā)展[10-11]。TANA等[12]的研究結(jié)果顯示，P-選擇素參與了肝內(nèi)血小板及內(nèi)皮細(xì)胞的活化、破壞，在肝癌及乙型肝炎相關(guān)肝硬化患者的病灶組織中均可發(fā)現(xiàn)P-選擇素的異常高表達(dá)。本研究結(jié)果顯示，慢性乙肝、肝硬化、HCC患者之間血清P-選擇素水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與文獻(xiàn)報(bào)道[12]一致。

ICAM-1在正常肝臟細(xì)胞表面無表達(dá)，只在門脈血管內(nèi)皮細(xì)胞和肝竇內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)。當(dāng)機(jī)體受到炎癥因子刺激時(shí)，ICAM-1可在多種細(xì)胞表面表達(dá)，進(jìn)而參與內(nèi)皮細(xì)胞和肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，完成跨膜遷移、黏附并損傷肝細(xì)胞、促進(jìn)機(jī)體內(nèi)炎癥反應(yīng)等病理過程，因此肝硬化患者體內(nèi)ICAM-1水平會(huì)急劇升高[13-14]。HBV慢性感染性疾病患者ICAM-1水平較高，且與患者體內(nèi)炎癥活動(dòng)度呈正相關(guān)，患者病情越嚴(yán)重，ICAM-1水平越高[15-16]。本研究結(jié)果顯示，慢性乙肝、肝硬化、HCC患者之間血清ICAM-1水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與文獻(xiàn)報(bào)道[16]一致。

IL-17A是機(jī)體免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中的關(guān)鍵因子，可與多種細(xì)胞表面的IL-17A受體結(jié)合，并誘導(dǎo)多種細(xì)胞分泌大量的趨化因子和炎癥因子，可促進(jìn)中性粒細(xì)胞趨化至炎癥部位，在感染、慢性炎癥反應(yīng)、自身免疫性疾病中均發(fā)揮重要作用。有研究結(jié)果顯示，IL-17A可能參與了乙型肝炎的免疫損傷過程[17]。王凌旭[18]的研究結(jié)果顯示，檢測(cè)血清IL-17水平有助于預(yù)測(cè)肝損傷與肝纖維化的嚴(yán)重程度，輔助性T細(xì)胞17（T helper cell 17，Th17）介導(dǎo)的炎癥與慢性乙肝向肝衰竭和肝硬化進(jìn)展有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，慢性乙肝、肝硬化、HCC患者之間血清IL-17A水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，HBV感染相關(guān)疾病患者血清P-選擇素、ICAM-1、IL-17A水平升高，且與病情嚴(yán)重程度有關(guān)，可作為判斷慢性乙肝病情嚴(yán)重程度的指標(biāo)之一。