鄭 超，趙 儒，陳立達(dá)，蘆宏凱，王璐璐，劉希曦，王文靜，郭偉潔，曹永彤，2

（1.中日友好醫(yī)院 輸血科；2.檢驗(yàn)科，北京 100029）

意外抗體是指除天然發(fā)生的抗-A、抗-B 和抗-A、B 以外的其他血型抗體，包括同種抗體和自身抗體。意外抗體的存在可能導(dǎo)致疑難血型、交叉配血困難、溶血性輸血反應(yīng)、新生兒溶血病、紅細(xì)胞輸注無效等，因此意外抗體的篩查對于擬輸血患者或孕產(chǎn)婦都非常重要，是保證輸血安全的有效措施。本研究通過對我院29744 例擬輸血患者及產(chǎn)科門診孕產(chǎn)婦進(jìn)行意外抗體的篩查和鑒定，對結(jié)果進(jìn)行分析，探討意外抗體篩查的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 樣本來源

中日友好醫(yī)院2013年5月～2016年11月間擬輸血患者共29744 例，男12981 例、女16763 例。其中有輸血史或妊娠史者17340 例； 女性中有妊娠史無輸血史者7405例，妊娠和輸血史均無者3317 例。

1.2 試劑與儀器

人ABO 血型反定型用紅細(xì)胞試劑盒、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e、抗-C3d、抗IgG 由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供。抗-M、抗-N、抗-Lea、抗-Leb、抗-Fya、抗-Fyb、抗-Jka、抗-Jkb、16 系譜細(xì)胞由Sanquin 公司提供。紅細(xì)胞血型抗體篩選細(xì)胞 （微柱凝膠法）、Diana Gel Coombs 卡、Rh血型分型卡由西班牙Grifol 公司提供。人不規(guī)則抗體檢測用3%紅細(xì)胞試劑盒（柱凝集法）、抗人球蛋白卡由強(qiáng)生公司提供。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。WADiana 和ERTHRY 全自動血型及配血分析系統(tǒng)、DG Therm 專用離心機(jī)、DG SPIN 專用孵育器均購自西班牙Grifol 公司，ORTHO AutoVue Innova 全自動血型及配血分析系統(tǒng)、ORTH BioVue 專用離心機(jī)均購自強(qiáng)生公司，Baso2005-2血型血清學(xué)離心機(jī)購自臺灣貝索公司。

1.3 檢測方法

采集靜脈血2ml，EDTA 抗凝，將試管顛倒混勻5 次，使血液充分抗凝。將標(biāo)本以3000r/min 離心5min，分離血漿后進(jìn)行檢測，同時行紅細(xì)胞Rh 血型的抗原分型。意外抗體篩查陽性樣本送至北京市紅十字血液中心血型室鑒定。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS22.0 對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計數(shù)資料用頻數(shù)和百分?jǐn)?shù)表示，組間比較采用卡方檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 性別及輸血史或妊娠史對意外抗體的影響

共檢出意外抗體陽性204 例，陽性率為0.69%。其中女性陽性率為0.80%，顯著高于男性的0.54%（P＜0.01）。有輸血史或妊娠史者陽性率為0.93%，顯著高于無輸血史或妊娠史的0.35%（P＜0.01）。女性中僅有妊娠史者意外抗體陽性率為1.11%，顯著高于無妊娠史和輸血史的0.21%（P＜0.01）。

2.2 意外抗體陽性在不同血型系統(tǒng)的分布

表1 示，Rh 血型系統(tǒng)相關(guān)抗體74 例，占36.27%；其次為Lewis 血型系統(tǒng)相關(guān)抗體27 例，占13.24%； 再次為MNS 血型系統(tǒng)相關(guān)抗體26 例，占12.75%；其余血型系統(tǒng)抗體少見。

2.3 意外抗體陽性者在臨床科室及疾病的分布情況

意外抗體陽性者分布于外科85 例（41.67%），血液科37 例 （18.14%），產(chǎn)科20 例 （9.80%），急診科18例（8.82%）；疾病分布主要集中于血液疾病49 例（24.02%），惡性腫瘤36 例（17.65%）。

2.4 Rh 血型系統(tǒng)抗體陽性患者的Rh 因子分型結(jié)果

Rh 血型系統(tǒng)相關(guān)抗體共74 例，頻率依次為，抗-E 占62.16%（46/74），抗-Ce 占17.57%（13/74），抗-cE 占9.46%（7/74），抗-D 占5.41%（4/74），抗-C 占4.04%（3/74），抗-e占1.35%（1/74）。檢出的5 種表型中CCDee（47 例）＞ccDEE（12 例）＞CcDee（11 例）＞ccdee（3 例）＞ccDEe（1 例），產(chǎn)生Rh 系統(tǒng)抗體的表型主要是CCDee，e 抗原百分比83.78%（62/74），C抗原百分比78.38%（58/74），c 抗原百分比36.49%（27/74），E 抗原百分比17.57%（13/74）。

3 討論

本組納入的29744 例意外抗體篩查共檢出意外抗體陽性者204 例，陽性率為0.69%，與之前類似報道[1]基本相符。女性陽性率為0.80%，顯著高于男性的0.54%（P＜0.01），原因可能為女性存在輸血和妊娠雙重免疫刺激機(jī)會。有輸血史或妊娠史者陽性率明顯高于無輸血史或妊娠史者（P＜0.01），提示輸血或妊娠可能是引起患者或孕婦發(fā)生意外抗體篩查陽性的重要因素之一。僅有妊娠史女性的意外抗體陽性率明顯高于無妊娠史和輸血史者（P＜0.01），說明妊娠可能是導(dǎo)致意外抗體陽性的主要影響因素。

本研究中共出現(xiàn)7 個血型系統(tǒng)的相關(guān)抗體。其中Rh血型系統(tǒng)相關(guān)抗體占比最高為36.27%，包含了Rh 單一抗體、Rh 復(fù)合抗體、Rh 合并其他系統(tǒng)抗體、自身類Rh 抗體、Rh+自身抗體，其中Rh 血型單一及復(fù)合抗體占比最高，分別為25%和6.86%。其次是Lewis 血型系統(tǒng)（13.24%）、MNS血型系統(tǒng)（12.75%），其他包括Duffy、Kidd、P、Kell 血型系統(tǒng)抗體則相對少見。這一結(jié)果與北京紅十字血液中心的研究結(jié)果[2]大致相同。

表1 意外抗體陽性在不同血型系統(tǒng)的分布情況n（%）

意外抗體陽性者在外科、血液科、產(chǎn)科的分布居前三位，分別為41.67%、18.14%、9.80%。86 例外科相關(guān)科室意外抗體陽性病例均為擇期手術(shù)患者。我院目前除急診手術(shù)外的擇期手術(shù)均要求提前一天進(jìn)行血型復(fù)檢、抗體篩查及交叉配血，可提前檢出意外抗體并選擇相合血液進(jìn)行備血，避免術(shù)中出現(xiàn)輸血的風(fēng)險。意外抗體多見于血液疾病49 例（24.02%），主要為自身免疫性溶血性貧血、骨髓增生異常綜合征、白血病等，惡性腫瘤36 例（17.65%），這可能與此類疾病患者反復(fù)多次輸血，多次免疫刺激有關(guān)[3]，結(jié)果與李翠瑩等[4]報道一致。目前意外抗體篩查已作為產(chǎn)前檢查的常規(guī)項(xiàng)目，提前發(fā)現(xiàn)并鑒定出產(chǎn)婦的意外抗體，可以有效防治新生兒溶血病的發(fā)生[5]。

本組數(shù)據(jù)Rh 系統(tǒng)相關(guān)抗體頻率由高到低依次為抗-E＞抗-Ce＞抗-cE＞抗-D＞抗-C＞抗-e，這一結(jié)果與焦偉等[6]報道的不完全一致，原因可能為本研究將Rh 血型單一抗體、復(fù)合抗體、其他Rh 相關(guān)抗體均納入比較所致。出現(xiàn)的5 種表型頻率依次為CCDee＞ccDEE＞CcDee＞ccdee＞ccDEe，4 種抗原百分率高低依次為e＞C＞c＞E，與王獻(xiàn)芳等[7]32 例樣本的報道不同。本研究是從29744 例樣本中篩選出的204 例意外抗體陽性樣本進(jìn)行的研究，更能客觀反映Rh系統(tǒng)的頻率分布。Rh 血型系統(tǒng)抗原的免疫原性僅次于ABO 系統(tǒng)，其強(qiáng)度依次為D>E>C>c>e。

綜上所述，意外抗體篩查是輸血前檢查與產(chǎn)前檢查的重要內(nèi)容，有利于及早發(fā)現(xiàn)有意義的抗體[8]，以降低或者避免意外抗體造成的溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病的風(fēng)險，為患者及孕產(chǎn)婦提供安全保障。