鄭 超，趙 儒，陳立達，蘆宏凱，王璐璐，劉希曦，王文靜，郭偉潔，曹永彤，2

（1.中日友好醫(yī)院 輸血科；2.檢驗科，北京 100029）

意外抗體是指除天然發(fā)生的抗-A、抗-B 和抗-A、B 以外的其他血型抗體，包括同種抗體和自身抗體。意外抗體的存在可能導致疑難血型、交叉配血困難、溶血性輸血反應、新生兒溶血病、紅細胞輸注無效等，因此意外抗體的篩查對于擬輸血患者或孕產(chǎn)婦都非常重要，是保證輸血安全的有效措施。本研究通過對我院29744 例擬輸血患者及產(chǎn)科門診孕產(chǎn)婦進行意外抗體的篩查和鑒定，對結(jié)果進行分析，探討意外抗體篩查的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 樣本來源

中日友好醫(yī)院2013年5月～2016年11月間擬輸血患者共29744 例，男12981 例、女16763 例。其中有輸血史或妊娠史者17340 例； 女性中有妊娠史無輸血史者7405例，妊娠和輸血史均無者3317 例。

1.2 試劑與儀器

人ABO 血型反定型用紅細胞試劑盒、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e、抗-C3d、抗IgG 由上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司提供。抗-M、抗-N、抗-Lea、抗-Leb、抗-Fya、抗-Fyb、抗-Jka、抗-Jkb、16 系譜細胞由Sanquin 公司提供。紅細胞血型抗體篩選細胞 （微柱凝膠法）、Diana Gel Coombs 卡、Rh血型分型卡由西班牙Grifol 公司提供。人不規(guī)則抗體檢測用3%紅細胞試劑盒（柱凝集法）、抗人球蛋白卡由強生公司提供。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。WADiana 和ERTHRY 全自動血型及配血分析系統(tǒng)、DG Therm 專用離心機、DG SPIN 專用孵育器均購自西班牙Grifol 公司，ORTHO AutoVue Innova 全自動血型及配血分析系統(tǒng)、ORTH BioVue 專用離心機均購自強生公司，Baso2005-2血型血清學離心機購自臺灣貝索公司。

1.3 檢測方法

采集靜脈血2ml，EDTA 抗凝，將試管顛倒混勻5 次，使血液充分抗凝。將標本以3000r/min 離心5min，分離血漿后進行檢測，同時行紅細胞Rh 血型的抗原分型。意外抗體篩查陽性樣本送至北京市紅十字血液中心血型室鑒定。

1.4 統(tǒng)計學方法

應用SPSS22.0 對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。計數(shù)資料用頻數(shù)和百分數(shù)表示，組間比較采用卡方檢驗。

2 結(jié)果

2.1 性別及輸血史或妊娠史對意外抗體的影響

共檢出意外抗體陽性204 例，陽性率為0.69%。其中女性陽性率為0.80%，顯著高于男性的0.54%（P＜0.01）。有輸血史或妊娠史者陽性率為0.93%，顯著高于無輸血史或妊娠史的0.35%（P＜0.01）。女性中僅有妊娠史者意外抗體陽性率為1.11%，顯著高于無妊娠史和輸血史的0.21%（P＜0.01）。

2.2 意外抗體陽性在不同血型系統(tǒng)的分布

表1 示，Rh 血型系統(tǒng)相關(guān)抗體74 例，占36.27%；其次為Lewis 血型系統(tǒng)相關(guān)抗體27 例，占13.24%； 再次為MNS 血型系統(tǒng)相關(guān)抗體26 例，占12.75%；其余血型系統(tǒng)抗體少見。

2.3 意外抗體陽性者在臨床科室及疾病的分布情況

意外抗體陽性者分布于外科85 例（41.67%），血液科37 例 （18.14%），產(chǎn)科20 例 （9.80%），急診科18例（8.82%）；疾病分布主要集中于血液疾病49 例（24.02%），惡性腫瘤36 例（17.65%）。

2.4 Rh 血型系統(tǒng)抗體陽性患者的Rh 因子分型結(jié)果

Rh 血型系統(tǒng)相關(guān)抗體共74 例，頻率依次為，抗-E 占62.16%（46/74），抗-Ce 占17.57%（13/74），抗-cE 占9.46%（7/74），抗-D 占5.41%（4/74），抗-C 占4.04%（3/74），抗-e占1.35%（1/74）。檢出的5 種表型中CCDee（47 例）＞ccDEE（12 例）＞CcDee（11 例）＞ccdee（3 例）＞ccDEe（1 例），產(chǎn)生Rh 系統(tǒng)抗體的表型主要是CCDee，e 抗原百分比83.78%（62/74），C抗原百分比78.38%（58/74），c 抗原百分比36.49%（27/74），E 抗原百分比17.57%（13/74）。

3 討論

本組納入的29744 例意外抗體篩查共檢出意外抗體陽性者204 例，陽性率為0.69%，與之前類似報道[1]基本相符。女性陽性率為0.80%，顯著高于男性的0.54%（P＜0.01），原因可能為女性存在輸血和妊娠雙重免疫刺激機會。有輸血史或妊娠史者陽性率明顯高于無輸血史或妊娠史者（P＜0.01），提示輸血或妊娠可能是引起患者或孕婦發(fā)生意外抗體篩查陽性的重要因素之一。僅有妊娠史女性的意外抗體陽性率明顯高于無妊娠史和輸血史者（P＜0.01），說明妊娠可能是導致意外抗體陽性的主要影響因素。

本研究中共出現(xiàn)7 個血型系統(tǒng)的相關(guān)抗體。其中Rh血型系統(tǒng)相關(guān)抗體占比最高為36.27%，包含了Rh 單一抗體、Rh 復合抗體、Rh 合并其他系統(tǒng)抗體、自身類Rh 抗體、Rh+自身抗體，其中Rh 血型單一及復合抗體占比最高，分別為25%和6.86%。其次是Lewis 血型系統(tǒng)（13.24%）、MNS血型系統(tǒng)（12.75%），其他包括Duffy、Kidd、P、Kell 血型系統(tǒng)抗體則相對少見。這一結(jié)果與北京紅十字血液中心的研究結(jié)果[2]大致相同。

表1 意外抗體陽性在不同血型系統(tǒng)的分布情況n（%）

意外抗體陽性者在外科、血液科、產(chǎn)科的分布居前三位，分別為41.67%、18.14%、9.80%。86 例外科相關(guān)科室意外抗體陽性病例均為擇期手術(shù)患者。我院目前除急診手術(shù)外的擇期手術(shù)均要求提前一天進行血型復檢、抗體篩查及交叉配血，可提前檢出意外抗體并選擇相合血液進行備血，避免術(shù)中出現(xiàn)輸血的風險。意外抗體多見于血液疾病49 例（24.02%），主要為自身免疫性溶血性貧血、骨髓增生異常綜合征、白血病等，惡性腫瘤36 例（17.65%），這可能與此類疾病患者反復多次輸血，多次免疫刺激有關(guān)[3]，結(jié)果與李翠瑩等[4]報道一致。目前意外抗體篩查已作為產(chǎn)前檢查的常規(guī)項目，提前發(fā)現(xiàn)并鑒定出產(chǎn)婦的意外抗體，可以有效防治新生兒溶血病的發(fā)生[5]。

本組數(shù)據(jù)Rh 系統(tǒng)相關(guān)抗體頻率由高到低依次為抗-E＞抗-Ce＞抗-cE＞抗-D＞抗-C＞抗-e，這一結(jié)果與焦偉等[6]報道的不完全一致，原因可能為本研究將Rh 血型單一抗體、復合抗體、其他Rh 相關(guān)抗體均納入比較所致。出現(xiàn)的5 種表型頻率依次為CCDee＞ccDEE＞CcDee＞ccdee＞ccDEe，4 種抗原百分率高低依次為e＞C＞c＞E，與王獻芳等[7]32 例樣本的報道不同。本研究是從29744 例樣本中篩選出的204 例意外抗體陽性樣本進行的研究，更能客觀反映Rh系統(tǒng)的頻率分布。Rh 血型系統(tǒng)抗原的免疫原性僅次于ABO 系統(tǒng)，其強度依次為D>E>C>c>e。

綜上所述，意外抗體篩查是輸血前檢查與產(chǎn)前檢查的重要內(nèi)容，有利于及早發(fā)現(xiàn)有意義的抗體[8]，以降低或者避免意外抗體造成的溶血性輸血反應和新生兒溶血病的風險，為患者及孕產(chǎn)婦提供安全保障。