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        不同溫度下冷凝集素試驗(yàn)對(duì)ABO血型正反定型與電子交叉配血試驗(yàn)結(jié)果的影響

        2021-06-10 10:41:00劉力銘
        四川生理科學(xué)雜志 2021年4期
        關(guān)鍵詞:凝集素血型交叉

        劉力銘

        (平頂山市第一人民醫(yī)院,河南 平頂山 467000)

        輸血是臨床上一項(xiàng)重要的搶救和治療措施,當(dāng)血紅蛋白<60 g·L-1時(shí),機(jī)體代償機(jī)能難以維持正常血壓水平,會(huì)引發(fā)機(jī)體活動(dòng)障礙,此時(shí)需輸血治療[1-2]。為保證輸血有效性、安全性,臨床常通過(guò)ABO血型正反定型與電子交叉配血試驗(yàn)進(jìn)行配血[3]。冷凝集素屬自身抗體,正常生理情況下,不會(huì)促進(jìn)紅細(xì)胞凝集,但研究證實(shí),在低溫條件下,紅細(xì)胞由于自身特性會(huì)出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,尤其在4℃時(shí)紅細(xì)胞明顯凝集[4]。高滴度冷凝集素會(huì)對(duì)交叉配血試驗(yàn)結(jié)果造成影響,從而降低輸血治療效果,因此,在進(jìn)行交叉配血時(shí),需盡可能避免冷凝集素影響,提高配血成功率,保證用血安全[5]。本研究選取我院2019年2月至2020年4月間收治的需緊急輸血患者248例,探討不同溫度下冷凝集素試驗(yàn)對(duì)ABO血型正反定型與電子交叉配血試驗(yàn)結(jié)果的影響。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選取我院收治的需緊急輸血患者248例(2019年2月~2020年4月)作為研究對(duì)象,其中女123例,男125例;年齡18~76歲,平均年齡56.68±8.14歲;體質(zhì)量45.6~77.8 kg,平均體質(zhì)量61.15±7.67 kg。

        納入標(biāo)準(zhǔn):患者及其家屬知情、自愿并簽署同意書(shū);血紅蛋白<60 g·L-1;年齡≥18歲;無(wú)輸血史、藥物過(guò)敏史、遺傳病史。

        排除標(biāo)準(zhǔn):伴有免疫系統(tǒng)疾病、肝功能損傷及艾滋病、結(jié)核病、乙肝等傳染性疾病;血型為Rh(-)。

        1.2 方法

        1.2.1 儀器與試劑

        血型血清學(xué)離心機(jī)(生產(chǎn)廠家:長(zhǎng)春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司,型號(hào):TD-3A),全自動(dòng)血庫(kù)系統(tǒng)(生產(chǎn)廠家:煙臺(tái)艾德康生物科技有限公司,型號(hào):AIS-EN70),恒溫水浴箱(生產(chǎn)廠家:常州市國(guó)旺儀器制造有限公司,型號(hào):HHW-420.600.),顯微鏡(生產(chǎn)廠家:日本奧林巴斯公司,型號(hào):BX53)。

        凝聚胺試劑購(gòu)于合肥天一生物技術(shù)研究所,抗A抗B血型定型試劑購(gòu)于上海信帆生物科技有限公司,RhD血型定型試劑購(gòu)于蘇州蘇大賽爾免疫生物技術(shù)有限公司。所有儀器與試劑均進(jìn)行嚴(yán)格質(zhì)控,按照使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

        1.2.2 ABO血型正反定型

        抽取患者靜脈血2 mL,于37℃離心后取血清加入1 mL抗凝血?jiǎng)?,使用生理鹽水洗滌血液樣本內(nèi)的紅細(xì)胞3次,將經(jīng)過(guò)洗滌的溶液制成濃度為2%的紅細(xì)胞懸液。取10支試管,分別加入生理鹽水0.2 mL,接著向第1支試管加入0.2 mL血清,直至對(duì)半稀釋到第9支,最后與第10支進(jìn)行比較。向10支試管各加入0.2 mL紅細(xì)胞懸液,混合均勻后分別放置在20 ℃、37 ℃溫度下,靜置12 h后觀察結(jié)果。

        1.2.3 電子交叉配血

        血型鑒定:吸取內(nèi)含EDTA-K2抗凝劑的患者血液樣本2 mL,以3000 r·min-1離心5min后置于全自動(dòng)血庫(kù)系統(tǒng)進(jìn)行血型檢測(cè)。

        電子交叉配血:首先檢測(cè)血液樣本中的不規(guī)則抗體,若結(jié)果呈陰性,根據(jù)血型鑒定結(jié)果,對(duì)血型匹配一致性進(jìn)行判斷,若結(jié)果呈陽(yáng)性,需確定抗體性質(zhì),后判斷血型匹配一致性。分別在20 ℃、37 ℃進(jìn)行交叉配血,查看凝集反應(yīng)是否出現(xiàn)并記錄結(jié)果。

        1.2.4 血清學(xué)交叉配血

        以試管法復(fù)查RhD血型與ABO血型,再采用1.2.3中血型鑒定方法與血液標(biāo)本進(jìn)行主側(cè)、次側(cè)交叉配血。

        1.2.5 冷凝集素試驗(yàn)

        向血清標(biāo)本中加入O型健康人群紅細(xì)胞或同型血,分別放置在4 ℃、31 ℃、37 ℃溫度下,記錄紅細(xì)胞凝集情況。

        1.2.6 交叉配血試驗(yàn)

        于37℃溫度下,使用鹽水法、凝聚胺配血法處理患者血液樣本,主側(cè)、次側(cè)均出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,代表配血不符,以24 ℃生理鹽水洗滌紅細(xì)胞3次,制成濃度為2%的紅細(xì)胞懸液,再次進(jìn)行交叉配血,觀察結(jié)果。

        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

        所有數(shù)據(jù)采用SPSS22.0軟件進(jìn)行分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±SD)表示,行t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以例或率(n(%))表示,行χ2檢驗(yàn),P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 血清學(xué)交叉配血與電子交叉配血結(jié)果比較

        248例需緊急輸血患者血液樣本,血清學(xué)交叉配血、電子交叉配血主側(cè)相合率無(wú)明顯差異(P>0.05),次側(cè)相合率差異顯著(P<0.05),見(jiàn)表1。

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        2.2 不同溫度下ABO血型鑒定結(jié)果

        ABO血型,在不同溫度下的鑒定結(jié)果(表2)。

        表2 不同溫度下ABO血型鑒定結(jié)果比較

        2.3 不同溫度下電子交叉配血結(jié)果

        20℃時(shí)電子交叉配血出現(xiàn)凝集例數(shù)多于30 ℃(P<0.05),見(jiàn)表3。

        表3 不同溫度下電子交叉配血結(jié)果(n(%),n=248)

        2.4 冷凝集素試驗(yàn)結(jié)果

        向血清標(biāo)本中加入O型健康人群紅細(xì)胞或同型血,分別放置在4℃、31℃、37℃溫度下,4℃溫度下出現(xiàn)明顯紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象,31℃溫度下可見(jiàn)紅細(xì)胞凝集,而溫度升至37℃時(shí),紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象消失。

        2.5 交叉配血試驗(yàn)結(jié)果

        于37℃溫度下,以鹽水法、凝聚胺配血法進(jìn)行交叉配血,主側(cè)、次側(cè)均出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,后用經(jīng)過(guò)處理的血清采取相同方法進(jìn)行交叉配血,主側(cè)、次側(cè)未出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,將血液樣本放置在載玻片,利用顯微鏡觀察到紅細(xì)胞彌漫、散在排列,交叉配血成功。

        3 討論

        輸血為臨床重要治療手段,為避免發(fā)生溶血、免疫排斥等不良反應(yīng),輸血前需對(duì)供血者、受血者的血型進(jìn)行配對(duì)[6-7]?,F(xiàn)階段,在臨床配血時(shí)通常經(jīng)ABO血型正反定型匹配后方允許輸血,保證輸血安全性[8]。但正反定型結(jié)果受到眾多因素影響,冷凝集素是其中之一[9]。隨著電子技術(shù)進(jìn)步,電子交叉配血試驗(yàn)在臨床逐漸得到應(yīng)用,其具有便捷、高效、準(zhǔn)確等優(yōu)勢(shì),能降低試劑庫(kù)存量,減少工作量,由計(jì)算機(jī)系統(tǒng)選擇與受血者相匹配的血型,還能減少人工操作失誤[10-11]。本研究對(duì)248例需緊急輸血患者血液樣本進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),冷凝集素引發(fā)的交叉配合不合,主要為次側(cè)不合,可在加溫后消除。溫度是影響冷凝集素活性的關(guān)鍵,有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道,溫度<31℃時(shí),冷凝集素作用于紅細(xì)胞抗原,出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象,隨著溫度上升,冷凝集素活力消失[12]。本研究還發(fā)現(xiàn),ABO血型正反定型與電子交叉配血試驗(yàn)結(jié)果受到溫度影響。要避免冷凝集素的影響,在ABO血型正反定型與電子交叉配血試驗(yàn)時(shí)需注意以下幾點(diǎn):(1)春冬季節(jié)溫度較低,易出現(xiàn)高效價(jià)冷凝集素,可將血液樣本放置在37℃恒溫水浴箱中,后再行檢測(cè),若提高溫度后,血型正反定型仍不相符或仍發(fā)生凝集反應(yīng),需排除其他因素引發(fā)的凝集反應(yīng);(2)ABO血型正反定型不符時(shí),應(yīng)進(jìn)一步選擇合適定型方法,如鹽水法、凝聚胺配血法;(3)對(duì)于需輸血治療的患者,應(yīng)首先確定冷凝集素的效價(jià),保證輸入同型血液,同時(shí)注意輸血速度緩慢、血液溫度適宜,以保證輸血有效性、安全性[13-15]。

        綜上所述,在低溫條件下,冷凝集素可促進(jìn)紅細(xì)胞凝集,影響輸血科ABO血型正反定型與電子交叉配血試驗(yàn)結(jié)果,為保證輸血安全,應(yīng)選擇科學(xué)合理鑒別方式,避免漏檢、誤檢。

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