胡詠梅

(廣州市荔灣區(qū)人民醫(yī)院，廣東 廣州 510370)

0 引言

分析前質(zhì)量保證是臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證體系中最重要的環(huán)節(jié)之一，樣本的正確采集是分析前質(zhì)量保證的一個(gè)主要內(nèi)容。而選用什么樣的采血管是分析前樣本采集中保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

肌酸激酶(CK) 廣泛存在人體組織中，其大部分分布在骨骼肌、心肌，CK 包括CKBB、CKMM 和CKMB 三種同工酶，其中CKMB 主要分布在心肌中，CKMB 升高是心肌損害的特異性指標(biāo)之一，對早期急性心肌診斷價(jià)值高，已廣泛運(yùn)用于臨床診斷。但由于CKMB 酶活性存在不穩(wěn)定性，且抵抗干擾能力弱，對患者的真實(shí)水平反映不夠靈敏、準(zhǔn)確和穩(wěn)定。CKMB 質(zhì)量測定(以下簡稱CKMBmass)，可以不受CKBB、巨CK 以及腺苷酸激酶等的干擾[1]，特異性大大提高；胸痛發(fā)作的最初6 小時(shí)內(nèi)，敏感性明顯優(yōu)于CKMB 酶活性測定法；檢測CKMB 的質(zhì)量濃度比檢測CKMB 的酶活性更加適合心肌梗死患者[2]，對微小心肌梗死的診斷價(jià)值明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的活性檢測。

CKMBmass 是心肌類疾病生化項(xiàng)目的新方法學(xué)[3]，本文旨在研究CKMBmass 分析前樣本采血管的應(yīng)用與選擇，同時(shí)比較和討論CKMB 和CK 分析前樣本采血管的應(yīng)用與選擇，正確選用適合CKMBmass、CKMB 和CK 檢測的采血管，讓檢測結(jié)果更接近人體的真實(shí)水平，為臨床醫(yī)生呈現(xiàn)檢測者準(zhǔn)確無誤的機(jī)體指標(biāo)水平。

本文采用促凝管、枸櫞酸鈉抗凝管、肝素抗凝管和EDTA-K2抗凝管檢測CK-MB mass(酶質(zhì)量)、CKMB(酶活性)和CK 酶活性)，并對檢測結(jié)果進(jìn)行兩兩比較，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)抽取本院 2020 年1-10 月健康體檢人員160 例為對照組，其中男78 例，女82 例，年齡22-62 歲，45(34.0，51.7)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：意識清晰，積極配合，肝腎功能正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重感染性疾病患者；凝血功能障礙患者；先天性心臟病患者；近期接受藥物相關(guān)治療者等等。抽取本院臨床上有血脂異常、肝病、腎病、心肌損傷疾病、血糖異?；颊邽榧膊〗M(共160 例)，其中男75 例，女85 例，年齡24-72 歲，51.5(39，59)歲。為了本研究正常值水平和異常值水平的3 個(gè)指標(biāo)不同水平濃度數(shù)值，故設(shè)對照組和疾病組。

1.2 儀器與試劑

選用東芝120-RF 生化儀，CKMBmass(膠乳免疫比濁法，北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司)，CKMB 和CK(DGKC 優(yōu)化比色法，上海執(zhí)誠生物科技有限公司)，采血管選用促凝、枸櫞酸鈉、肝素和EDTA-K2 4種采血管(均為成都瑞琦醫(yī)療科技有限責(zé)任公司生產(chǎn))。

1.3 方法

1.3.1 樣本采集與檢測

同時(shí)收集同一患者或體檢人員的4 種采血管樣本。將不同的樣本在相同的條件下同時(shí)按照相關(guān)SOP 文件置生化儀檢測。

1.3.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用 SPSS 23.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用Shapiro—Wilk 方法判斷數(shù)據(jù)是否為正態(tài)分布，非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)用中位數(shù)P50(P25，P75)來表示；組間數(shù)據(jù)采用非參數(shù)多個(gè)相關(guān)樣本比較的 Friedman M 檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

對照組和疾病組中各樣本類型的中位數(shù)結(jié)果如表1所示。

表1 不同抗凝管血液樣本檢測結(jié)果的比較中位數(shù)P50(P25，P75)

各組的數(shù)值差異兩兩比較結(jié)果如表2 所示，具體表述如下：

表2 組間數(shù)據(jù)兩兩比較差異，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

(1)每個(gè)兩兩比較組與生化指標(biāo)對應(yīng)的對照組和疾病組的結(jié)果P值均為一致性，即對照組和疾病組的結(jié)果均P值＞0.05 或P值＜0.05；

(2)CKMBmass 檢測結(jié)果在枸櫞酸鈉和EDTA-K2 管中存在差異，在其它兩兩比較組別均無差異；

(3)CKMB 檢測結(jié)果在促凝-枸櫞酸鈉組、枸櫞酸鈉-肝素組和枸櫞酸鈉-EDTA-K2 組均存在差異，在其它兩兩比較組別均無差異；

(4)CK 檢測結(jié)果在促凝-枸櫞酸鈉組、枸櫞酸鈉-肝素組和枸櫞酸鈉-EDTA-K2 組均存在差異，在其它兩兩比較組別均無差異。

3 討論

不同采血管分離的血液標(biāo)本大致分為三類，分別為血清、血漿和全血，這三種標(biāo)本有著明顯的區(qū)別，血清是血液發(fā)生凝固后血凝塊發(fā)生回縮析出的淡黃色透明液體，血漿是血液加抗凝劑后離心所得的無細(xì)胞上清液[4]。

血清經(jīng)過凝固后，其原本含有的凝血因子、纖維蛋白原及少量參與血凝的其他血漿蛋白質(zhì)會被消耗，并且凝固過程中可能對血細(xì)胞產(chǎn)生擠壓，使細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)釋放出來，還增添了少量血凝時(shí)由血小板釋放出來的物質(zhì)，從而影響檢測結(jié)果。

肝素是一種含有硫酸基團(tuán)的黏多糖，它和抗凝血酶Ⅲ相結(jié)合，促進(jìn)其對凝血因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、X 和凝血酶活性的抑制作用，并有阻止血小板聚集等多種抗凝作用[5]；EDTA 鹽和枸櫞酸鹽可以和血液中鈣離子結(jié)合形成螯合物，從而使鈣離子失去凝血作用，阻止血液凝固；從以上分析原理可以得知，肝素與其余2 種抗凝劑的抗凝機(jī)制完全不同。

本文研究顯示，CKMBmass 在血清(促凝)和肝素管中的檢測結(jié)果無差異，CKMBmass 為免疫比濁法，說明肝素基本上不干擾免疫比濁法的CKMB 質(zhì)量檢測；有報(bào)道稱肝素可能對 CK、CKMB 測定有干擾，由于CKMB 采用免疫抑制法，其原理是用抗體結(jié)合CK 分子的M 亞基后測定B 亞基的活性，即認(rèn)為是由于肝素干擾了此項(xiàng)測定方法，或是對B 亞基也造成抑制現(xiàn)象[6]。也有研究報(bào)道，在低濃度CK、CKMB 下，添加了肝素的樣本顯現(xiàn)出干擾效應(yīng)，即由于采血困難及采血量不夠等多種原因，使肝素鋰濃度達(dá)到或超過31.25U/mL 時(shí)可使CK 及CKMB 結(jié)果嚴(yán)重偏低產(chǎn)負(fù)擾[7]。本研究未見肝素干擾CK 或CKMB 的檢測；目前國內(nèi)報(bào)道肝素對CK 或CKMB 的影響情況不一，王倩[8]等研究顯示肝素對CK 檢測有影響，張佳昌[9]與吳燕琴[10]等研究表明肝素對CK 無影響。

本研究顯示，枸櫞酸鈉管中CKMB 和CK 的結(jié)果與其它3種采血管的結(jié)果有差異，這與2019 年賴巧斌[11]的報(bào)道相符，原因可能為枸櫞酸鈉容易使血液堿化，從而影響檢測結(jié)果。

綜上所述，本研究探討4 種不同的采血管對CKMBmass、CKMB 及CK 檢測結(jié)果的影響，結(jié)果的差異性與對照組和疾病組的分組無關(guān)。檢測結(jié)果顯示，CKMBmass 檢測結(jié)果在枸櫞酸鈉和EDTA-K2 管中均存在差異，不建議采用枸櫞酸鈉和EDTA-K2 管檢測CKMBmass；CKMBmass 檢測結(jié)果在促凝管和肝素管中均無差異，可使用促凝管和肝素管檢測CKMBmass；CKMB 和CK 檢測結(jié)果均在促凝-枸櫞酸鈉組、枸櫞酸鈉-肝素組和枸櫞酸鈉-EDTA-K2 組存在差異，不建議采用枸櫞酸鈉和EDTA-K2 管檢測；CKMB 和CK 檢測結(jié)果在促凝管和肝素管中均無差異，可使用促凝管和肝素管檢測CKMB 和CK。