楊瑞東，田鳳霞

（河北省灤州市人民醫(yī)院，河北 灤州）

0 引言

食管癌是我國高發(fā)惡性腫瘤之一，而惡性腫瘤的重要特征之一就是腫瘤細(xì)胞無限制地生長，其實(shí)質(zhì)是細(xì)胞核內(nèi)DNA 不斷復(fù)制的結(jié)果。腫瘤細(xì)胞DNA 含量的分布及倍體類型與腫瘤的生物學(xué)行為有關(guān)[1-2]。全自動DNA 圖像分析可以監(jiān)測細(xì)胞內(nèi)DNA 含量的變化，發(fā)現(xiàn)癌變細(xì)胞，目前已廣泛應(yīng)用于腫瘤的診斷，以及治療方案的確定和腫瘤患者預(yù)后的觀察[3-4]。應(yīng)用全自動DNA 圖像分析測定食管組織細(xì)胞的相關(guān)報道國內(nèi)少見。為了探討其在食管癌診斷中的價值及臨床作用，本文對病理確診的食管癌分別進(jìn)行了全自動DNA 圖像分析及食管內(nèi)鏡下進(jìn)行觀察并進(jìn)行了分析，并分析了全自動DNA 圖像分析與食管癌癌的分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2018 年1 月至2019 年6 月在灤州市人民醫(yī)院經(jīng)病理確診的食管癌患者104 例患者，其中男性76 例，女性28 例，年齡45～83 歲，平均59.5 歲。經(jīng)食管內(nèi)鏡觀察結(jié)果為食管癌91 例、非食管癌13 例，經(jīng)全自動DNA 圖像分析檢查結(jié)果為食管癌101 例，非食管癌3 例。在104 例食管癌中，高分化29 例，中低分化75 例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的69 例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的35 例。

1.2 檢查方法

1.2.1 病理標(biāo)本的采集

由本院經(jīng)驗(yàn)豐富的醫(yī)師負(fù)責(zé)，采用進(jìn)口Olympus v70 胃鏡，受檢者左側(cè)臥位，胃鏡下觀察并用活檢鉗鉗取病變部位5～10 塊。然后1% 福爾馬林液固定、脫水、石蠟包埋、切片、蘇木精-伊紅（HE）染色等步驟后，鏡下觀察其病理結(jié)果。所有標(biāo)本均由兩名以上高年資病理醫(yī)師依據(jù)WHO 診斷標(biāo)準(zhǔn)確定診斷[5-6]。

1.2.2 全自動DNA 圖像分析分析

受檢者取左側(cè)臥位位，醫(yī)師在胃鏡直視下手持特制細(xì)胞刷，將刷頭中央較長刷絲刷取病變部位黏膜面，順時針或逆時針旋轉(zhuǎn)3～5 圈，取出細(xì)胞刷，拔下刷頭，浸泡在樣本收集管中，送DNA 試驗(yàn)室制片，用Feulgen 染色。采用加拿大BC腫瘤研究所提供的全自動細(xì)胞圖像分析系統(tǒng)（AICM）對染色片中的每一個細(xì)胞核進(jìn)行掃描分析，根據(jù)每個細(xì)胞核的123個核特征參數(shù)值，自動進(jìn)行分類和計數(shù)，自動打印DNA 倍體分析直方圖和細(xì)胞點(diǎn)陣圖。

1.3 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)

以測定細(xì)胞核IOD 來判斷DNA 含量。以DNA 指數(shù)（DNA index）來表示DNA 的含量。DNA 指數(shù)=被測細(xì)胞DNA IOD 值/ 正常細(xì)胞（G0/G1）DNA IOD 平均值，DNA 定量細(xì)胞學(xué)常用C（Content）作為單位來衡量DNA 含量。（1）正常2 倍體（DNA 定量為2C）細(xì)胞為主，未見異倍體細(xì)胞及異倍體細(xì)胞峰。（2）當(dāng)4C 細(xì)胞數(shù)大于被測細(xì)胞總數(shù)的5%，但未見異倍體細(xì)胞，診斷為增生。（1）和（2）診斷為陰性。（3）出現(xiàn)3 個或3 個以上＞5C 的細(xì)胞或出現(xiàn)異倍體細(xì)胞峰，診斷為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

數(shù)據(jù)采用SPASS 17.0 統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，全自動DNA 圖像分析與內(nèi)鏡分析的差異比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 內(nèi)鏡與全自動DNA 圖像分析比較

全自動DNA 圖像分析與內(nèi)鏡觀察結(jié)果共陰性3 例，全自動DNA 圖像分析與食管內(nèi)鏡觀察結(jié)果共陽性91 例，全自動DNA 圖像分析陰性內(nèi)鏡陽性0 例，全自動DNA 圖像分析陽性食管內(nèi)鏡陰性10 例，二者比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），以上結(jié)果見表1。

表1 內(nèi)鏡與全自動DNA 圖像分析比較（n）

2.2 食管癌的分化程度與全自動DNA 圖像分析的關(guān)系

在29 例高分化的食管癌組織中全自動DNA 圖像分析的陽性率為89.66%，在75 例中低分化的食管癌組織中全自動DNA 圖像分析的陽性率為98.67%，全自動DNA 圖像分析在中低分化食管癌組織中的陽性率高于高分化的食管癌組織的陽性率，差異比較具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 分化程度與全自動DNA 圖像分析的關(guān)系（n,%）

2.3 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與全自動DNA 圖像分析的關(guān)系

在69 例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌組織中全自動DNA 圖像分析的陽性率為98.55%，在35 例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌組織中全自動DNA 圖像分析的陽性率為85.71%，全自動DNA圖像分析在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌組織中的陽性率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌組織的陽性率，差異比較具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與全自動DNA 圖像分析的關(guān)系（n,%）

3 討論

3.1 全自動DNA 圖像分析與內(nèi)鏡比較

本研究表明，全自動DNA 圖像分析在食管癌組織中的陽性率明顯高于食管內(nèi)鏡在食管癌組織中的陽性率，差異比較均具有統(tǒng)計學(xué)意義。該結(jié)果提示，全自動DNA 圖像分析在食管癌的診斷中有重要的指導(dǎo)意義。全自動DNA 圖像分析分析，具有客觀性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高、敏感性強(qiáng)的特點(diǎn)[7-8]。因此可以將全自動DNA 圖像分析分析診斷方法作為一種常規(guī)的臨床檢測方法，采用全自動DNA 圖像分析分析方法結(jié)合病理活檢方法來診斷食管癌。

3.2 全自動DNA 圖像分析與食管癌分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

本研究表明全自動DNA 圖像分析在104 例食管癌患者中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽性率高于無淋巴結(jié)組的陽性率，結(jié)果比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05），結(jié)果表明全自動DNA 圖像分析陽性的食管癌更容易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。這與國內(nèi)外的相關(guān)研究結(jié)果基本一致。全自動DNA 圖像分析在104 例食管癌患者中中低分化組的陽性率其在高分化組的陽性率中，結(jié)果比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。該結(jié)果提示全自動DNA 圖像分析陽性率高的腫瘤可能具有較低的分化程度。因此全自動DNA 圖像分析分析有助于認(rèn)識腫瘤的生物學(xué)行為。

綜上所述，本研究為細(xì)全自動DNA 圖像分析在食管癌的診斷提供新的臨床資料床資料，并證實(shí)全自動DNA 圖像分析分析對于食管腫瘤具有較高的敏感性。因此全自動DNA圖像分析與臨床信息、病理結(jié)果相結(jié)合，更有助于對惡性腫瘤的診斷、指導(dǎo)臨床治療的個體化及預(yù)后評估。