王 鐸 梁光哲 張曉燕 張倚劍 羅世乾 梁明振*

(1.廣西大學動物科學技術(shù)學院，南寧 530004；2.廣西宜坤奇飼料有限公司，南寧 530001)

活性干酵母是由特殊培養(yǎng)的鮮酵母經(jīng)壓榨干燥脫水后仍保持強的發(fā)酵能力、具有活性的酵母細胞的固態(tài)產(chǎn)品，細胞數(shù)量超過2×1010CFU/g[1]，是一類具有安全、易儲存、無污染、無殘留等特點的益生菌[2]，被我國批準可以作為飼料添加劑應(yīng)用于生產(chǎn)中。

酵母主要在單胃動物的胃、十二指腸、小腸、盲腸等消化系統(tǒng)中發(fā)揮作用[3]。一般認為，活性干酵母主要是通過調(diào)節(jié)動物腸道微生物的平衡[4]、降低胃腸道的pH[5-6]等方式來保證動物的健康。鄭海英[7]研究表明，在母豬飼糧中分別添加800和500 g/t的活性干酵母，顯著提高了母豬采食量、仔豬平均斷奶重，且添加800 g/t活性干酵母效果最好。Tadele等[8]研究表明，在斷奶仔豬的飼糧中添加活性干酵母，顯著提高了仔豬平均日增重。Zhu等[9]研究表明，在基礎(chǔ)飼糧中添加活性干酵母可以顯著提高斷奶仔豬空腸黏膜免疫球蛋白A(IgA)的含量，減少大腸桿菌的數(shù)量，增強腸道黏膜的免疫力。Trckova等[10]研究表明，在基礎(chǔ)飼糧中添加500 g/t的活性干酵母飼喂2周，可顯著提高仔豬的血清IgA含量，并且檢測到仔豬腹瀉的嚴重程度明顯降低，發(fā)作時間更短。秦紅[11]研究表明，與對照組相比，在基礎(chǔ)飼糧中添加0.5 g/kg的活性干酵母(釀酒酵母，酵母菌活菌數(shù)1.0×1010CFU/kg)，鈣的表觀消化率顯著提高。綜上所述，不同種類活性干酵母以及添加量對斷奶仔豬的生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率和免疫指標的影響結(jié)果不盡一致。因此，本試驗旨在研究飼糧中添加活性干酵母對斷奶仔豬生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率和血清免疫指標的影響，探索飼糧中適宜的活性干酵母的種類和添加量，為斷奶仔豬的快速、健康生長提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗所用斷奶仔豬由廣西橫縣某大型養(yǎng)豬場提供；試驗所用活性干酵母由廣西某酵母科技有限公司提供，菌株為普通釀酒酵母(酵母細胞數(shù)為2×1010CFU/g)和布拉迪酵母(酵母細胞數(shù)為4×1010CFU/g)。

1.2 試驗設(shè)計與飼糧

試驗選擇35日齡、體重為(8.2±0.3) kg的健康杜長大斷奶仔豬330頭，采用完全隨機試驗設(shè)計分成5組，每組3個重復，每個重復22頭(公母各占1/2)。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧；試驗1、2組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加1、2 g/kg釀酒活性干酵母；試驗3、4組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.5、1.0 g/kg的布拉迪活性干酵母。基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.3 飼養(yǎng)管理

本試驗在廣西農(nóng)墾永新集團畜牧有限公司良圻原種豬場的保育區(qū)進行，為期37 d(包括預試期7 d)。本試驗采用全封閉管理，工作人員進入生產(chǎn)區(qū)均需消毒和洗澡。試驗前圈舍完全清理和消毒，所有仔豬自由采食和飲水，每天07:30—11:00和15:00—17:30進行飼喂，定期對圈舍打掃、消毒，保持圈舍衛(wèi)生和通風。

1.4 樣品采集

1.4.1 糞樣的采集與處理

于試驗第35～37天連續(xù)3 d，每日07:00—08:00從每個重復中收集總糞便1/4的無雜質(zhì)污染的新鮮糞便，加入10%的硫酸(每100 g鮮糞中加入10 mL的硫酸)固氮，糞樣0～4 ℃保存。將3 d收集的糞樣均勻混合，將混勻后的糞便在105 ℃的烘干箱中烘1 h,再用65 ℃烘干至恒重，室溫冷卻回潮24 h,并用微型粉碎機粉碎，采用鹽酸不溶灰分(acid insoluble ash,AIA)法，即內(nèi)源指示劑法測定營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率。

1.4.2 血清的采集與處理

于試驗期第37天在每個重復中選取1頭與平均體重相近、健康、精神的仔豬，空腹頸靜脈采血5 mL，靜置數(shù)小時后，3 000 r/min離心15 min，取上層血清，于-20 ℃環(huán)境下冷凍保存。

1.5 測定指標及方法

1.5.1 生長性能

于正試期當天、試驗結(jié)束當天空腹測量仔豬體重，每天記錄各個重復的耗料量。每天觀察并記錄腹瀉仔豬數(shù)和死亡頭數(shù)。按以下公式計算平均日增重、平均日采食量、料重比、腹瀉率和死亡率。

平均日增重=(末體重-初體重)/試驗天數(shù)；平均日采食量=(投料量-剩料量)/(試驗天數(shù)×仔豬頭數(shù))；料重比=試驗期總采食量/試驗期總增重；腹瀉率(%)=[試驗期內(nèi)每組腹瀉仔豬頭數(shù)/(試驗天數(shù)×每組試驗頭數(shù))]×100；死亡率(%)=(試驗期內(nèi)每組死亡仔豬頭數(shù)/每組試驗頭數(shù))×100。

1.5.2 飼糧營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率

本試驗采用AIA法測定飼糧的營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率。按照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》(2版)[12]的方法測定粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維、AIA、鈣和磷含量，計算各營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率。

飼糧中各營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的計算公式如下：

飼糧中某營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率(%)=100-100×(b×c)/(a×d)。

式中：a為飼糧中該營養(yǎng)物質(zhì)含量；b為糞樣中該營養(yǎng)物質(zhì)含量；c為飼糧中AIA含量；d為糞樣中AIA含量。

1.5.3 血清免疫指標

血清IgA、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量用試劑盒(免疫比濁法)測定，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗數(shù)據(jù)先用Excel 2010軟件進行初步處理，再用SPSS 13.0程序進行單因素方差分析并采用Duncan氏法進行多重比較，P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。數(shù)據(jù)結(jié)果均使用“平均值±標準差”(mean±SD)表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧中添加活性干酵母對斷奶仔豬生長性能的影響

由表2可知，與對照組相比，試驗1、2、3和4組斷奶仔豬的平均日采食量和平均日增重極顯著提高(P<0.01)；試驗1、3組腹瀉率顯著降低了1.45%、1.44%(P<0.05)，試驗2、4組腹瀉率分別降低了0.25%、0.78%(P>0.05)；在死亡率方面，對照組和試驗2組均為3.03%，而試驗1、3和4組則未出現(xiàn)死亡的情況。

表2 飼糧中添加活性干酵母對斷奶仔豬生長性能的影響

2.2 飼糧中添加活性干酵母對斷奶仔豬營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

由表3可見，與對照組相比，試驗1、2、3和4組粗纖維表觀消化率分別提高了6.69%、5.31%、7.92%和1.19%(P>0.05)；試驗1、2、3和4組鈣表觀消化率分別提高了9.71%、4.13%、11.35%和3.72%(P>0.05)；試驗1、2、3和4組磷表觀消化率有所提高(P>0.05)。各組間營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率差異均不顯著(P>0.05)。

表3 飼糧中添加活性干酵母對斷奶仔豬營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

2.3 飼糧中添加活性干酵母對斷奶仔豬血清免疫指標的影響

由表4可知，試驗1、3組血清IgM含量顯著高于對照組(P<0.05)，分別比對照組提高了26%和34%。各組間血清IgA、IgG含量差異均不顯著(P>0.05)。

表4 飼糧中添加活性干酵母對斷奶仔豬血清免疫指標的影響

3 討 論

3.1 飼糧中添加活性干酵母對斷奶仔豬生長性能的影響

活性干酵母作為一種綠色飼料添加劑，可以調(diào)節(jié)物腸道微生物的平衡，抑制腸道內(nèi)有害微生物的生長繁殖，提高動物的免疫力[13]。布拉迪酵母作為普通釀酒酵母的一個亞種，兩者具有相似的生長特性，但是之間也存在一些不同的特性。相比于普通釀酒酵母(30 ℃)，布拉迪酵母(37 ℃)適宜生長溫度更高[14]；布拉迪酵母耐酸性較強，反觀普通釀酒酵母耐酸性能較弱[15]。Datta等[16]研究表明，布拉迪酵母在37、39、45 ℃及胃酸條件下1 h的存活率顯著高于普通釀酒酵母。由于突然的飲食和環(huán)境的變化，斷奶是豬生命中的關(guān)鍵時期。這個緊張的時期導致飼糧攝入減少，導致腸道發(fā)炎，對感染的敏感性增加，腸道菌群失衡，從而導致斷奶后造成仔豬采食量下降、飼料轉(zhuǎn)化率低、消化不良、腹瀉、免疫力下降[17-20]。Tokach等[21]研究表明，在21日齡斷奶的仔豬，斷奶1周后增重大于225 g/d的仔豬比增重達不到225 g/d的仔豬達到109 kg體重要提前10 d。這說明提高斷奶仔豬的生長性能與日后仔豬的生長有著重大的關(guān)系。Jiang等[22]研究表明，斷奶仔豬飼糧中添加3 g/kg干酵母(釀酒酵母)較對照組相比料重比顯著降低。Hoang等[23]研究表明，斷奶仔豬飼糧中添加布拉迪酵母菌后，提高了仔豬采食量和日增重，增加了腸道菌群和有機酸濃度，降低了大腸桿菌數(shù)量，表明飼糧中添加布拉迪酵母菌可以提高仔豬的免疫力，促進斷奶仔豬的生長。本試驗結(jié)果與上述研究結(jié)果相似，試驗組在基礎(chǔ)飼糧中添加了不同種類和不同添加量的活性干酵母，極顯著提高了斷奶仔豬的平均日增重和平均日采食量，這可能是活性干酵母增強動物的食欲，提高了采食量，進而提高了仔豬的平均日增重。試驗1、2、3和4組的料重比，較對照組差異不顯著,但分別降低了2.58%、0.64%、1.29%和1.29%。試驗1、3組腹瀉率較對照組分別顯著降低了1.45%、1.44%，試驗2、4組與對照組相比也有所降低，這可能是活性干酵母降低腸道中的病原菌數(shù)量，提高動物的免疫力，提高動物的抗應(yīng)激能力，從而降低仔豬的腹瀉率和死亡率,仔豬腹瀉是提高仔豬死亡率的重要原因。這說明添加活性干酵母可以提高斷奶仔豬的生長性能，而試驗組中，添加1 g/kg釀酒干酵母可以起到提高斷奶仔豬生長性能的作用。

3.2 飼糧中添加活性干酵母對斷奶仔豬營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

仔豬生長水平是豬生長水平的關(guān)鍵，特別是早期斷奶仔豬的生長水平對以后影響最大，斷奶仔豬的生長發(fā)育直接影響成年豬的生長性能。斷奶仔豬的消化能力比較弱，主要表現(xiàn)在消化器官功能不發(fā)達、消化酶活性較低、胃酸分泌不足以及腸道微生物菌群不平衡[24-26]。營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率體現(xiàn)了動物對營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的能力，營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率與料重比有很大的關(guān)系。洪奇華等[27]研究表明，在斷奶仔豬基礎(chǔ)飼糧中添加2%的活性酵母，經(jīng)過為期32 d的飼養(yǎng)試驗，發(fā)現(xiàn)相比于對照組，總能和粗蛋白質(zhì)的表觀消化率分別提高了6.0%和5.9%。牛建康等[1]研究表明，泌乳牛飼糧中添加10和20 g的活性干酵母組粗蛋白質(zhì)表觀消化率與對照組相比分別顯著提高了6.39%和7.22%,飼糧中添加20 g活性干酵母組的鈣、磷表觀消化率高于其他組。Hang等[28]研究表明，育肥豬基礎(chǔ)飼糧中添加活性干酵母可以提高磷的表觀消化率。Heugten等[29]研究表明，在斷奶仔豬基礎(chǔ)飼糧中添加活性干酵母不能提高營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率。本試驗研究與Heugten等[29]的研究結(jié)果一致，但是與洪奇華等[27]的研究結(jié)果不同。這可能是由于活性干酵母的種類、添加量、持續(xù)時間、飼料成分和動物的衛(wèi)生條件之間的差異造成的。從結(jié)果看來，添加活性干酵母對營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率有所提高但未達到顯著效果。

3.3 飼糧中添加活性干酵母對斷奶仔豬血清免疫指標的影響

免疫球蛋白廣泛存在于動物機體中，主要為IgG、IgA和IgM三大類，能夠與抗原相結(jié)合，參與體液免疫[30]，其含量的多少直接反映機體免疫能力的強弱。IgM主要存在于免疫初期，具有激活補體的功能，IgG和IgA都是體內(nèi)免疫的主要抗體。陳生龍等[31]研究表明，在斷奶仔豬飼糧中添加活性干酵母，經(jīng)過28 d的飼養(yǎng)，血清IgG的含量沒有顯著提高，但是隨著活性酵母含量的增加，血清IgG含量有上升的趨勢。徐琴[32]研究表明，在飼糧中添加活性干酵母，顯著增加產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(EnterotoxigenicEscherichiacoli,ETEC)攻毒仔豬血清中IgG含量。Benjamin等[33]研究表明，母豬飼糧中添加活酵母，在哺乳期試驗組所產(chǎn)仔豬血清IgA、IgG或IgM含量沒有顯著差異。本試驗結(jié)果表明，試驗1、3組血清IgM含量分別比對照組顯著提高26%和34%。這與陳龍生[31]的研究結(jié)果相一致，與Benjamin等[33]的結(jié)果略有不同，可能是試驗豬接觸活性干酵母的方式不同。Benjamin等[33]在哺乳期母豬飼糧中添加酵母，本試驗是在斷奶仔豬基礎(chǔ)飼糧直接添加活性干酵母，出現(xiàn)不同的研究結(jié)果可能是由于在母豬飼糧中添加活性干酵母，然而剛出生的仔豬通過母豬獲得的活性干酵母成分還未能在仔豬腸道發(fā)生作用。綜上所述，斷奶仔豬飼糧中添加活性干酵母可以在一定程度上提高仔豬的免疫能力。

4 結(jié) 論

在斷奶仔豬基礎(chǔ)飼糧中添加適量的活性干酵母可以提高仔豬的生長性能和免疫能力，對營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率有所提高但未達到顯著效果。以添加1 g/kg的釀酒活性干酵母及0.5 g/kg布拉迪活性干酵母效果最好。