孟令江,上官同強,于秀玲,滕海達
摘要:目的:根據(jù)北沙參制定標準測定不同種質(zhì)北沙參8-甲氧基異歐前胡內(nèi)酯和香豆素總含量的研究。方法:檢測不同種質(zhì)類型北沙參產(chǎn)量相關(guān)性狀,利用高效液相色譜法測定北沙參中香豆素成分含量和總含量。結(jié)果:不同種質(zhì)的北沙參8種香豆素類成分含量存在顯著差異,以8種香豆素類成分的總含量作為指標,優(yōu)選出的主根中側(cè)根少的種質(zhì)和白條參種質(zhì)所含8種香豆素類成分的總含量最高。結(jié)論:不同種質(zhì)的北沙參香豆素類成分含量存在差異。
關(guān)鍵詞:北沙參;香豆素;總含量
北沙參是傘形科植物珊瑚菜(Glehnia? littoralis? FrSchmidt? ex Miq)的干燥根,具有養(yǎng)陰清肺,祛痰止咳、益胃生津等功效,為臨床上常用的中藥材,常用于治療勞嗽痰血,熱病津傷,咽干口渴、胃陰不足等病癥[1-2]。北沙參在我國已有500多年種植歷史,其中以萊陽種植量大、產(chǎn)量多、質(zhì)量好而聞名。根據(jù)栽培品種,不同品種之間的北沙參在性狀、質(zhì)量、功效方面是否存在差異目前尚未有定論,有待進一步研究。因此本實驗收集不同種質(zhì)北沙參,以常見和重要的8-甲氧基異歐前胡內(nèi)酯含量以及香豆素含量作為評價指標,利用高效液相色譜法等標準方法對其含量進行檢測,為客觀評價不同種質(zhì)北沙參內(nèi)在質(zhì)量等提供依據(jù)。
1材料與方法
1.1 儀器與原料
KQ-500E型超聲波清洗器、AE240十萬分之一電子天平、戴安U-3000高效液相色譜儀、恒溫烘箱等。甲醇、乙腈、補骨脂素、歐前胡素、異歐前胡素對照品HPLC≥98%等。從山東萊陽胡城、河北安國東桄、赤峰牛營子三個北沙參人工種植基地進行種質(zhì)資源收集,共收集北沙參鮮藥材12批。洗去泥沙后,置于恒溫烘箱55℃烘干備用。
1.2 測定指標及方法
1.2.1 色譜條件:色譜柱:Inertsil ODS-3(250×4.6 mm,5μm);流動相為乙腈-水,檢測波長:310 nm;進樣量10?l。
1.2.2 相關(guān)溶液配制:對照品溶液配制:精密稱取異茴芹內(nèi)酯、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯、氧化前胡素、異歐前胡素、珊瑚菜素、8-甲氧基異歐前胡內(nèi)酯、異歐前胡素對照品,分別配制成濃度為對照品溶液備用。
1.2.3 供試品溶液配制:分別取不同種質(zhì)的北沙參進行碾碎(過40目)后精密稱定各取1g,置具塞錐形瓶中,加甲醇20ml,超聲處理30 min,用0.45μm微孔濾膜濾過,作為供試品溶液備用。
1.3 方法學(xué)驗證
精密吸取混合對照品溶液0.5、1、2、4、5、8 ml至10 ml容量瓶中,加甲醇稀釋并定容至刻度,搖勻。分別精密吸取10μL,依次注入高效液相色譜儀,測定峰面積,以對照品濃度(mg/mL)為橫坐標、峰面積為縱坐標,繪制標準曲線。并分別進行精密度試驗、穩(wěn)定性試驗、重復(fù)性試驗。最終得回歸方程:異茴芹內(nèi)酯Y=10.343+14.343x,r=0.9992,花椒毒素Y=2.707x-1.5077,r=0.9991,佛手柑內(nèi)酯Y=4.9731x-2.6935,r=0.9998,氧化前胡素=5.9731x-3.6935,r=0.9993、異歐前胡素=1.9731x-0.6935,r=0.9998。珊瑚菜素=0.9822x-0.8232,r=0.9991,8-甲氧基異歐前胡內(nèi)酯=1.3928x-0.7271,r=0.9992,異歐前胡素=2.9833x-1.9823,r=0.9991。
2結(jié)果
2.1 不同種質(zhì)類型產(chǎn)量相關(guān)性狀測定
12批北沙參鮮藥材分別是大紅袍(DH)、白條參(BT)、紅條參(HT)、山東地方種(SHD)、高含量組(HC)、高產(chǎn)量組(HY)、安國地方種(ANG)、根型優(yōu)組即主根粗側(cè)根少(RG)、赤峰地方種(CHF)、主根粗側(cè)根多(CD)、主根中側(cè)根少(ZS)、主根細側(cè)根少(XS)。具體產(chǎn)量相關(guān)性狀見表1。
2.2 不同種質(zhì)北沙參含量評價
北沙參含量測定結(jié)果顯示不同種質(zhì)北沙參所含香豆素類成分含量存在顯著差異,其中,異茴芹內(nèi)酯、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯、氧化前胡素、異歐前胡素、珊瑚菜素、8-甲氧基異歐前胡內(nèi)酯、異歐前胡素等成分含量存在顯著差異(P<0.01),不同種質(zhì)北沙參所含8種香豆素類成分含量也有較大差異,其中優(yōu)選出的主根細側(cè)根少的種質(zhì)和白條參種質(zhì),所含8種香豆素類成分的總含量最高;主根中等側(cè)根少的種質(zhì)和赤峰本地種質(zhì),所含8種香豆素類成分的總含量最低,結(jié)果見表2。
3討論
結(jié)果顯示,不同種質(zhì)的北沙參8種香豆素類成分含量存在顯著差異,這與國內(nèi)研究北沙參的其他文獻結(jié)果相似,可以作為北沙參種質(zhì)評價和良種選育的一個重要指標。以8種香豆素類成分的總含量作為指標,優(yōu)選出的主根中側(cè)根少的種質(zhì)和白條參種質(zhì)所含8種香豆素類成分的總含量最高,可以作為優(yōu)良種質(zhì)。此外,不同成分也可能具有不同的藥理活性和臨床療效,在藥理活性明確的情況下,也可以根據(jù)對成分的要求來定向選育不同的北沙參品種。
參考文獻
[1]邱曉月,景永帥,鄭玉光,等.北沙參多糖對免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)作用研究進展[J].中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志,2021,35(10):794.
[2]李雪瑩,武永剛.中藥材北沙參及其偽品鑒定方法的研究進展[J].農(nóng)技服務(wù),2021,38(3):88-89+92.