張朝輝

(咸陽市渭城區(qū)疾病預(yù)防控制中心 結(jié)核病門診,陜西 咸陽712000)

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)主要臨床特征為肺部氣流受限的呼吸內(nèi)科疾病，由于其病情緩和，進(jìn)展緩慢，治療周期漫長(zhǎng)，易影響患者身心健康并加重其家庭經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[1]。COPD的發(fā)生與肺部的異常炎癥反應(yīng)有關(guān)，肺泡巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞等多種炎性細(xì)胞參與這一過程[2]。研究表明，巨噬細(xì)胞參與炎癥反應(yīng)時(shí)會(huì)極化成功能截然不同的兩種狀態(tài)，即M1單核細(xì)胞和M2單核細(xì)胞[3]。外周血M1/M2單核細(xì)胞比例的失調(diào)在COPD發(fā)病機(jī)制中扮演重要角色，但失調(diào)方向尚存在爭(zhēng)議[4-5]。第1 s用力呼氣容積占用力肺活量百分比(forced expiratory volume in one second/forced vital capacity，F(xiàn)EV1/FVC)常用來衡量肺功能，是COPD肺功能評(píng)估的主要依據(jù)[6]。目前，COPD患者外周血M1/M2單核細(xì)胞比例與肺功能指標(biāo)的相關(guān)性研究較少。本研究將通過檢測(cè)急性加重期COPD患者不同肺功能時(shí)期的外周血M1/M2與FEV1/FVC，并分析兩者的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年7月至2019年7月在咸陽市渭城區(qū)疾病預(yù)防控制中心就診的急性加重期COPD患者(觀察組)105例作為研究對(duì)象，根據(jù)肺功能分為中度組(43例，50.00%≤FEV1/FVC<70.00%，F(xiàn)EV1<80.00%)、重度組(50例，30.00%≤FEV1/FVC<70.00%，F(xiàn)EV1<50.00%)和極重度組(12例，F(xiàn)EV1/FVC<70.00%，F(xiàn)EV1<30.00%)，選取同期健康體檢者(對(duì)照組)105例作為對(duì)照。收集兩組一般資料，包括：性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)(body mass index，BMI)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)COPD學(xué)組制定的診治標(biāo)準(zhǔn)[7]。②醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。③患者知情且簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有嚴(yán)重代謝性疾病、惡性腫瘤、心血管疾病、自身免疫性疾病、肝腎疾病、精神疾病者。②患有其他肺部疾病、其他明顯限制性通氣功能障礙者。③生活不能自理者。④不配合肺功能等檢查或者不能交流者。⑤資料不全或不真實(shí)者。

1.2 血液采集及指標(biāo)檢測(cè)

清晨抽取受試者空腹外周靜脈血2份。1份加入乙二胺四乙酸抗凝，參考文獻(xiàn)[8]中方法采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血M1型和M2型單核細(xì)胞，并分別計(jì)算M1、M2型占CD14+單核細(xì)胞的比例以及M1/M2比值。

另1份4℃ 3 000 r/min離心10 min，取上層血清0.5 ml，ELISA法檢測(cè)患者血清IL-6、IL-12、IL-13、TNF-α水平，試驗(yàn)方法均按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 肺功能檢測(cè)

采用肺功能儀(型號(hào)：MasterScreen PFT System，購(gòu)自德國(guó)耶格公司)測(cè)定所有受試者的肺功能指標(biāo)第1 s用力呼氣容積(forced expiratory volume in one second，F(xiàn)EV1)、用力肺活量(forced vital capacity，F(xiàn)VC)3次，計(jì)算FEV1占FVC百分比(FEV1/FVC)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料

兩組受試者性別、年齡、BMI的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

表1 兩組一般資料比較

2.2 各組外周血M1、M2、M1/M2與FEV1/FVC

與對(duì)照組相比，觀察組3組不同時(shí)期COPD患者外周血M1、M2、M1/M2與FEV1/FVC的差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與中度組相比，重度、極重度組COPD患者外周血M1、M1/M2與FEV1/FVC均明顯下降(P<0.05)，M2明顯上升(P<0.05)。與重度組相比，極重度組COPD患者外周血M1、M1/M2與FEV1/FVC均明顯下降(P<0.05)，M2明顯上升(P<0.05)。見表2。

表2 各組外周血M1、M2、M1/M2與FEV1/FVC比較

2.3 各組外周血炎癥因子水平

與對(duì)照組相比，觀察組3組不同時(shí)期COPD患者外周血IL-6、IL-12、IL-13、TNF-α水平的差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與中度組相比，重度、極重度組COPD患者外周血IL-6、IL-13、TNF-α水平明顯升高(P<0.05)，IL-12水平明顯降低(P<0.05)。與重度組相比，極重度組COPD患者外周血IL-6、IL-13、TNF-α水平明顯升高(P<0.05)，IL-12水平明顯降低(P<0.05)。見表3。

表3 各組外周血炎癥因子水平比較

2.4 COPD患者外周血M1/M2、FEV1/FVC與炎癥因子水平的相關(guān)性

相關(guān)性分析結(jié)果顯示，COPD患者外周血M1/M2、FEV1/FVC與IL-6、IL-13、TNF-α均明顯負(fù)相關(guān)(P<0.05)，與IL-12均明顯正相關(guān)(P<0.05)，COPD患者外周血M1/M2與FEV1/FVC明顯正相關(guān)(r=0.500，P<0.05)。見表4。

表4 COPD患者外周血M1/M、FEV1/FVC與炎癥因子水平的相關(guān)性分析

2.5 影響肺功能的多因素分析

將FEV1/FVC作為因變量，以外周血M1/M2、IL-6、IL-12、IL-13、TNF-α水平為自變量進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，外周血M1/M2水平為影響COPD患者肺功能的保護(hù)因素(P<0.05)。見表5。

表5 影響COPD患者肺功能的多因素分析

3 討論

M1、M2單核細(xì)胞是巨噬細(xì)胞的兩種類型。其中M1型巨噬細(xì)胞由Th1細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子誘導(dǎo)生成，分泌IL-12、IL-6等多種細(xì)胞因子參與Th1免疫應(yīng)答，可導(dǎo)致炎性損傷[9]。M2型巨噬細(xì)胞由Th2細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子誘導(dǎo)生成，分泌TNF-α、IL-1等多種細(xì)胞因子參與Th2免疫應(yīng)答，與組織的損傷修復(fù)有關(guān)[10]。本研究中，與對(duì)照組相比，觀察組COPD患者隨著肺功能嚴(yán)重程度的提升，COPD患者外周血M1、M1/M2、FEV1/FVC、IL-12水平均明顯下降，M2、IL-6、IL-13、TNF-α水平明顯升高，提示巨噬細(xì)胞極化程度M1、M2、M1/M2、肺功能FEV1/FVC、細(xì)胞因子IL-6、IL-12、IL-13、TNF-α均與疾病發(fā)生及疾病嚴(yán)重程度有關(guān)。既往研究中，陳娜等[11]研究發(fā)現(xiàn)，哮喘患兒外周血巨噬細(xì)胞通過向M2型分化，參與哮喘的發(fā)生發(fā)展。杜艷等[8]在乳腺癌中同樣發(fā)現(xiàn)，巨噬細(xì)胞以M2型為主，主要發(fā)揮抑制炎癥，促進(jìn)組織修復(fù)等作用。在COPD中，Bazzan發(fā)現(xiàn)M1、M2的比例在不同嚴(yán)重程度COPD患者中增長(zhǎng)程度不一，M1從26%上升到84%，M2從7%上升到78%，認(rèn)為巨噬細(xì)胞的極化程度與COPD嚴(yán)重程度密切相關(guān)[5]。多因素回歸分析結(jié)果顯示，外周血M1/M2水平為影響COPD患者肺功能的保護(hù)因素(P<0.05)，推測(cè)隨著COPD疾病的加重，巨噬細(xì)胞M1/M2比例失衡，機(jī)體自我修復(fù)機(jī)制加強(qiáng)，巨噬細(xì)胞的極化方向傾向于組織損傷修復(fù)有關(guān)的M2型巨噬細(xì)胞，但具體調(diào)控機(jī)制未知。本研究通過進(jìn)一步分析COPD患者M(jìn)1/M2失衡過程中有關(guān)的因子，結(jié)果顯示，COPD患者外周血M1/M2、FEV1/FVCFEV1/FVC與IL-6、IL-13、TNF-α均明顯負(fù)相關(guān)，外周血M1/M2、FEV1/FVC與IL-12，外周血M1/M2與FEV1/FVC均明顯正相關(guān)；提示COPD患者外周血M1/M2可能通過影響IL-6、IL-12、IL-13、TNF-α水平，對(duì)肺功能產(chǎn)生影響，具體表現(xiàn)為FEV1/FVC下降。

綜上所述，急性加重期COPD患者外周血M1/M2單核細(xì)胞比例、肺功能FEV1/FVC明顯下降，隨疾病加重而加劇失衡，與IL-6、IL-12、IL-13、TNF-α水平明顯相關(guān)，外周血M1/M2單核細(xì)胞比例失衡后可能通過影響以上因子水平，進(jìn)而影響肺功能。需改進(jìn)之處：可進(jìn)一步增加樣本，增加結(jié)果可信性。