摘要：近年來，循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測因其具有微創(chuàng)性，能夠克服腫瘤異質(zhì)性，易于實時動態(tài)監(jiān)測等優(yōu)勢，已逐漸應(yīng)用在腫瘤診斷治療中。市場上也出現(xiàn)了很多圍繞該技術(shù)的廠商，但是由于生產(chǎn)工藝、方法學(xué)靈敏度、臨床特異性、質(zhì)控規(guī)范、法規(guī)管理等一系列問題也使得該技術(shù)在產(chǎn)業(yè)化過程中遇到了一些困境。

關(guān)鍵詞：循環(huán)腫瘤細(xì)胞;檢測技術(shù);產(chǎn)業(yè)化

【中圖分類號】R246.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1673-9026（2021）04-361-01

腫瘤已成為造成人類死亡的第二大原因，目前想要徹底治愈腫瘤還有一段很長的路要走，現(xiàn)階段的目標(biāo)可能是將腫瘤變成慢性疾病進(jìn)行長期的治療，這就需要提供可以持續(xù)性動態(tài)監(jiān)測反應(yīng)腫瘤進(jìn)展的臨床指標(biāo)。常規(guī)的影像學(xué)和組織病理學(xué)過多的依賴腫瘤病灶可能無法監(jiān)測到無病灶狀態(tài)下的腫瘤實時狀況，此時循環(huán)腫瘤細(xì)胞（circulating tumor cellS，CTCS）檢測作為一種不依賴腫瘤病灶的新興技術(shù)可以為臨床提供部分的臨床指標(biāo)支持。本文對循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測方法和產(chǎn)業(yè)化現(xiàn)狀作簡單綜述。

1 循環(huán)腫瘤細(xì)胞

CTCS是由澳大利亞病理學(xué)家John AShworth在1869年首次報道，并闡述了它的稀有性[1]。CTCS來源于原發(fā)腫瘤或轉(zhuǎn)移瘤，但存在于血液系統(tǒng)，并且當(dāng)其中一部分細(xì)胞遇到合適的微環(huán)境，就極有可能克隆生長成新的轉(zhuǎn)移瘤。研究發(fā)現(xiàn)，部分CTCS具有干細(xì)胞特性，可促進(jìn)腫瘤及腫瘤耐藥性的形成;同時CTCS能夠發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EPithelial-MeSenchymal TranSition，EMT），使細(xì)胞失去細(xì)胞間黏附性，導(dǎo)致其侵襲、遷移能力增強(qiáng)[2]。目前CTCS的研究已經(jīng)不僅僅局限在血液標(biāo)本，已經(jīng)有很多研究者嘗試用腦脊液、胸腹水、尿液等體液嘗試進(jìn)行CTCS檢測[3，4]。

2檢測方法

目前已報道的CTCS檢測方法由分離和鑒定兩部分組成，分離CTCS的方法可以分為物理富集方法、生物富集方法和物理與生物結(jié)合的富集方法三大類[5]。鑒定的方法有基于抗原抗體反應(yīng)的免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)（ImmunocytochemiStry，ICC）和流式細(xì)胞術(shù)（Flow cytometry，F(xiàn)CM）、基于染色體異倍體檢測的熒光原位雜交技術(shù)（FluoreScence in Situ hybridization，F(xiàn)ISH）、基于核酸信息的逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（ReverSe TranScriPtion-PolymeraSe Chain Reaction，RT-PCR）[5，6]。隨著“芯片上的實驗室”（lab on the chiP）技術(shù)的出現(xiàn)，微流控芯片技術(shù)越來越多的被應(yīng)用到CTCS檢測上，其中有基于抗原抗體捕獲CTCS的芯片、基于濾膜分選CTCS的芯片、基于細(xì)胞形變分選CTCS的芯片、基于細(xì)胞比重分選CTCS的芯片等[7]，這些芯片都僅僅完成了CTCS富集部分的工作，當(dāng)然也有基于DNA標(biāo)簽捕獲和釋放CTCS的芯片[8]，它可以更好的操縱CTCS對接下游研究。近期也有一些新的技術(shù)，如利用光電納米檢測CTCS的方法[9]。這些檢測方法都在一定程度上提高了CTCS檢測的靈敏度，但是由于CTCS在血液中的稀有性，且暫時無法繞開“分離+鑒定”這兩個環(huán)節(jié)完成CTCS的檢測，使得CTCS檢測方法上并未出現(xiàn)大的技術(shù)進(jìn)步。

3產(chǎn)業(yè)化現(xiàn)狀

當(dāng)然CTCS檢測技術(shù)的出現(xiàn)就是為臨床所服務(wù)，目前該產(chǎn)品的產(chǎn)業(yè)化還是分為臨床和科研兩大模塊。已明確臨床應(yīng)用的獲批上市產(chǎn)品有：國家藥品監(jiān)督管理局（NMPA）批準(zhǔn)的第一個針對循環(huán)上皮細(xì)胞的CellSearch檢測系統(tǒng)（Menarini Silicon，進(jìn)口III類）;第一個檢測肺癌葉酸受體陽性CTCS的CytoPloRare檢測試劑盒（格諾，III類）;第一個循環(huán)上皮細(xì)胞采集器Cellcollector（GILUPI，進(jìn)口III類）;第一個利用微流控芯片結(jié)合磁捕獲分選細(xì)胞的CellRich儀器（美晶，II類）;第一個用于臨床細(xì)胞顯微圖像掃描、觀察及分析分離的儀器（?；荩琁I類）。據(jù)不完全統(tǒng)計[10-16]，除了已經(jīng)獲得注冊證的產(chǎn)品以外，國內(nèi)外開發(fā)或推出CTCS檢測系統(tǒng)/產(chǎn)品的公司還有CelSee、CytoTrack、Clearbridge、RareCyte、友芝友、益善、萊爾、中科納泰等60多家。

4 展望

CTC行業(yè)，無論是生產(chǎn)廠商還是檢測機(jī)構(gòu)，對于CTC檢測方法學(xué)的選擇都沒有固定的要求，因為每個方法學(xué)都存在其特有的局限性。為了避免方法學(xué)局限性導(dǎo)致的CTC的丟失，物理和生物結(jié)合的富集方式已經(jīng)成為一種趨勢，其中尤以微流控芯片的應(yīng)用前景最大。但是微流控芯片的生產(chǎn)工藝制約了其產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程，相信隨著工業(yè)技術(shù)的提升，微流控芯片的質(zhì)和量都會有所進(jìn)步，這也將為CTC提供一種更高性價比的檢測平臺。但是這些離CTC真正的臨床應(yīng)用還相差甚遠(yuǎn)，CTC檢測平臺的出現(xiàn)只是為臨床應(yīng)用提供了一種可能，而真正的臨床應(yīng)用需要大批的臨床數(shù)據(jù)作為依據(jù)，最為重要的是在臨床意義明確的前提下，如何提高CTC檢測平臺的自動化程度、提升檢測結(jié)果的穩(wěn)定性、建立標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)控體系及降低檢測成本，這些都是CTC行業(yè)內(nèi)人士需要思考的問題，相信更多的生產(chǎn)廠商已經(jīng)在向這個目標(biāo)努力。作為CTC行業(yè)里的一員，在基于微流控芯片的免疫磁微粒捕獲儀平臺推出后，也在做更深層次的應(yīng)用探索，希望可以在標(biāo)準(zhǔn)化、自動化的道路上做出一些新的產(chǎn)品。

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作者簡介：宋毅，1984年出生，男，漢族，籍貫江蘇連云港，碩士研究生，工程師，液體活檢中的循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測方向，聯(lián)系方式y(tǒng)Song@nanoliteSyStemS.net

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