馬敬花，李小毓

(南陽張仲景醫(yī)院 檢驗科，河南 南陽 473000)

急性白血病(acute leukemia，AL)是臨床上常見的血液系統(tǒng)惡性腫瘤，多由造血干細胞克隆性增生抑制造血功能所致，進展快，易復(fù)發(fā)[1]。T淋巴細胞由胸腺分泌，是機體免疫功能重要細胞群，具有中心調(diào)控作用，與AL病程密切相關(guān)[2]。血清鐵蛋白(serum ferritin，SF)是高分子鐵結(jié)合蛋白，發(fā)生AL時合成SF數(shù)量異常增加，且不同病情程度SF水平變化不一致[3]。本研究旨在探討不同病程階段AL患者SF、CD4+/CD8+水平的變化及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1研究對象及分組 選取2015年2月至2019年1月南陽張仲景醫(yī)院收治的99例處于不同病程階段的AL患者為觀察組。選取同期健康體檢者33例為對照組。根據(jù)AL類型將觀察組患者分為淋巴細胞組(淋巴細胞白血病35例)和髓細胞組(髓細胞白血病64例)。根據(jù)病程不同階段將觀察組患者分為初治期33例，緩解期33例，復(fù)發(fā)期33例。觀察組男53例，女46例，年齡24～73歲，平均(48.36±11.89)歲。對照組男18例，女15例，年齡23～73歲，平均(48.78±11.92)歲。兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核批準。研究對象均簽署知情同意書。

1.1.2選取標準 (1)納入標準：①經(jīng)分子生物學、細胞遺傳學、細胞形態(tài)學、臨床體征和(或)骨髓象檢查確診為AL；②近2個月未接受免疫抑制劑治療或化學療法；③近期未輸血且無發(fā)熱。(2)排除標準：①骨髓增生異?；蚵粤＜毎籽〖弊兊腁L；②急性粒細胞缺乏癥。

1.2 檢測方法抽取受檢者清晨空腹靜脈血5 mL，采用乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid，EDTA)進行抗凝，以轉(zhuǎn)速為3 000 r·min-1離心10 min，提取上清液。向標本中加入10 μL單克隆抗體，包括CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE，并加入100 μL細胞懸液，混合均勻后于室溫下避光孵育30 min。加入500 μL溶血素混勻，待紅細胞完全溶解后采用磷酸緩沖鹽溶液洗滌2次，加入500 μL磷酸緩沖鹽溶液混勻，上機。采用邁瑞流式細胞儀檢測血清T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平。采用全自動化學發(fā)光免疫分析儀(DXI-800)以化學發(fā)光法測定SF，嚴格按照試劑盒(武漢默沙克生物科技有限公司)操作步驟進行。

1.3 觀察指標(1)淋巴細胞組、髓細胞組及對照組CD4+、CD3+、CD4+/CD8+水平。(2)初治期、緩解期、復(fù)發(fā)期AL患者及對照組SF、CD4+、CD3+、CD4+/CD8+水平。(3)SF陽性率：陽性標準為男性>336.2 μg·L-1，女性>306.8 μg·L-1。

2 結(jié)果

2.1 淋巴細胞組、髓細胞組及對照組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平淋巴細胞組、髓細胞組、對照組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；淋巴細胞組、髓細胞組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于對照組，淋巴細胞組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于髓細胞組(P<0.05)。見表1。

表1 淋巴細胞組、髓細胞組及對照組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平比較

2.2 不同病程階段AL患者及對照組SF、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平初治期、緩解期、復(fù)發(fā)期AL患者及對照組SF、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；初治期、緩解期、復(fù)發(fā)期AL患者SF水平均高于對照組，初治期、復(fù)發(fā)期AL患者SF水平高于緩解期患者(P<0.05)；初治期、復(fù)發(fā)期AL患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于緩解期患者和對照組(P<0.05)。見表2。

表2 不同病程階段AL患者及對照組SF、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平比較

2.3 SF陽性率對照組未出現(xiàn)SF陽性，觀察組SF陽性率為19.19%(19/99)。觀察組SF陽性率較對照組高(χ2=5.923，P=0.015)。

3 討論

AL屬于造血干細胞疾病，患者淋巴結(jié)和骨髓中白細胞過度增生、造血功能異常，免疫功能紊亂導(dǎo)致繼發(fā)性免疫缺陷[4]。近年來AL發(fā)病率呈逐漸上升的趨勢，病死率較高，多與電離輻射、病毒感染、遺傳因素等有關(guān)[5]。

SF、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平能反映AL患者的病情，可為AL的臨床診斷提供重要的參考依據(jù)[6]。本研究結(jié)果顯示，觀察組SF水平高于對照組，初治期、復(fù)發(fā)期AL患者SF水平高于緩解期患者，觀察組SF陽性率高于對照組。SF是機體鐵的儲存形式，為造血的重要原料，存在于脾、肝、骨髓等部位。AL初期白細胞大量增生，SF合成增多，釋放入血后無法及時清除，且白血病細胞代謝物會引起血紅蛋白合成過量的SF，鐵利用率降低，從而引起SF水平升高。AL患者單核-吞噬細胞系統(tǒng)也會釋放SF。緩解期使用化療藥物控制異常幼稚細胞，造血功能恢復(fù)，鐵利用率升高，SF水平降低[7]。復(fù)發(fā)期白細胞與鐵代謝紊亂，SF水平異常。

本研究結(jié)果還顯示，觀察組初治期、復(fù)發(fā)期AL患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于緩解期患者和對照組，淋巴細胞組、髓細胞組CD4+、CD3+、CD4+/CD8+水平低于對照組，淋巴細胞組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于髓細胞組。AL患者伴有免疫功能障礙，而T淋巴細胞參與機體免疫調(diào)節(jié)過程。當機體免疫內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定時，CD4+/CD8+水平恒定，若免疫內(nèi)環(huán)境失衡，機體會發(fā)生免疫缺陷。AL會導(dǎo)致T淋巴細胞亞群功能損傷及其數(shù)量改變，機體免疫調(diào)節(jié)失衡，導(dǎo)致免疫缺陷。AL初治期、復(fù)發(fā)期免疫功能紊亂，導(dǎo)致T淋巴細胞水平下降，其亞群CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平發(fā)生變化。CD3+可反映T淋巴細胞數(shù)量，CD4+能決定性增強或擴大其他免疫細胞功能，CD8+是CD4+調(diào)節(jié)性免疫抑制因子，CD4+/CD8+水平保持穩(wěn)定是維持細胞免疫平衡的前提和基礎(chǔ)[8]。AL患者初期細胞免疫功能被強烈抑制，T淋巴細胞群處于紊亂狀態(tài)，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均較低。緩解期患者免疫功能恢復(fù)，T淋巴細胞亞群水平接近正常，有利于白血病細胞的自然清除，但復(fù)發(fā)期患者免疫功能重新紊亂。上述研究結(jié)果說明，AL患者SF、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平變化能準確反映不同病程階段，且急性淋巴細胞白血病的免疫狀態(tài)較急性髓細胞白血病更差。通過檢測SF、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平來判斷AL患者的免疫功能與白細胞狀態(tài)，從而間接判斷AL患者的病情。不同白血病類型的T淋巴細胞亞群紊亂情況也有所差異，這能夠為臨床治療方案的制定與預(yù)后的準確判斷提供依據(jù)。

綜上所述，借助SF、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平可以評估AL患者的病情和類型，為臨床制定治療方案提供依據(jù)。