◎ 陸俊波，吳珍珍，姚 軍，余水紅，馮 莉

（1.安慶市食品藥品檢驗(yàn)中心，安徽 安慶 246000；2.安慶醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，安徽 安慶 246052）

隨著人們生活水平的提高和對(duì)自身健康的日益關(guān)注，桶裝水憑借其飲用方便、水質(zhì)潔凈等優(yōu)勢(shì)，開(kāi)始逐步走入家庭，受到廣大消費(fèi)者的青睞。但是近年來(lái)桶裝水中銅綠假單胞菌污染問(wèn)題逐漸嚴(yán)峻，關(guān)于銅綠假單胞菌污染桶裝水的報(bào)道日漸增多，銅綠假單胞菌污染引起的食物中毒頻頻發(fā)生，成為公共衛(wèi)生的重大隱患[1]。銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa），又稱綠膿桿菌，在自然界中分布較廣，空氣、水、土壤以及健康人的皮膚組織、呼吸道和腸道都存在，是醫(yī)源性感染疾病中常見(jiàn)的一類條件致病菌，也是引起食源性和水源性疾病的病原之一[2]。本課題擬通過(guò)實(shí)驗(yàn)室模擬找到最佳的消毒工藝，為桶裝水企業(yè)選擇安全高效和經(jīng)濟(jì)適用的殺菌工藝提供理論依據(jù)，幫助桶裝飲用水企業(yè)解決銅綠假單胞菌大范圍超標(biāo)問(wèn)題。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

微酸性次氯酸電解水，由本地某公司生產(chǎn)；高純二氧化氯氣，鹽城康寶消毒劑有限公司生產(chǎn)；臭氧，由安慶太湖某瓶裝水企業(yè)生產(chǎn)線臭氧可控發(fā)生設(shè)備OW-20TB生產(chǎn)；銅綠假單胞菌，編號(hào)：ATCC15442）；桶裝水管道及回收桶，由桶裝水企業(yè)提供；銅綠假單胞菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基（CN瓊脂）、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基、金氏B培養(yǎng)基、乙酰胺液體培養(yǎng)基、氧化酶試紙及鈉氏試劑等，由北京路橋技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn)。

1.2 儀器與設(shè)備

蘇州蘇潔-2FD型超凈工作臺(tái)（蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司）、BHC-1300IIA2生物安全柜（蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司）、SPX-150B-Z生化培養(yǎng)箱（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司）、GR60AD高壓滅菌鍋（致微儀器有限公司）、HTY-306A六連過(guò)濾系統(tǒng)（浙江泰林生物技術(shù)有限公司）、賽默飛ICS-11OO離子色譜儀（賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司）及7890A氣相質(zhì)譜聯(lián)用儀（安捷倫科技有限公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 檢測(cè)方法

按照《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 飲用天然礦泉水檢驗(yàn)方法》中銅綠假單胞菌檢測(cè)方法對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)；根據(jù)《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 消毒副產(chǎn)物指標(biāo)》測(cè)定三氯甲烷、四氯化碳及溴酸鹽含量。

1.3.2 消毒效果實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對(duì)管道及回收桶進(jìn)行涂抹預(yù)先經(jīng)過(guò)復(fù)活培養(yǎng)的銅綠假單胞菌，再把微酸性次氯酸電解水和高純二氧化氯配制成一系列的濃度梯度后，對(duì)管道及回收桶進(jìn)行罐裝，分別作用5min、10 min、20 min、30 min、60 min和24 h后倒出消毒水并對(duì)管道用無(wú)菌棉棒擦拭表面殘留消毒水并檢測(cè)銅綠假單胞菌含量。取樣后對(duì)管路及回收桶進(jìn)行沖洗并測(cè)定每次沖洗后的副產(chǎn)物三氯甲烷、四氯化碳?xì)埩袅?。臭氧的消毒效果在企業(yè)的生產(chǎn)車間完成，通過(guò)調(diào)節(jié)臭氧發(fā)生儀器的參數(shù)改變臭氧投放量，并對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行銅綠假單胞菌及副產(chǎn)物溴酸鹽跟蹤監(jiān)測(cè)。

2 結(jié)果與分析

2.1 微酸性次氯酸電解水的消毒效果

對(duì)選用的微酸性次氯酸電解水（有效次氯酸含量50 ppm），進(jìn)行梯度稀釋后作用于管道及回收桶。由表1知，濃度為50 ppm的次氯酸電解水在被稀釋2 200倍 以下均有殺菌作用，對(duì)試驗(yàn)所有稀釋濃度均做了三氯甲烷及四氯化碳跟蹤測(cè)定，結(jié)果均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) GB 5749—2006要求（三氯甲烷限量值：0.06 mg·L-1； 四氯化碳限量值：0.002 mg·L-1）。

2.2 高純二氧化氯的消毒效果

建立有效二氧化氯0.04～0.40 mg·L-1的濃度范圍，分別作用于樣品后測(cè)定消毒效果及副產(chǎn)物。由表2知，有效二氧化氯濃度低于0.12 mg·L-1作用時(shí)間少于5 min后銅綠假單胞菌檢出陽(yáng)性。之后對(duì)該6個(gè)濃度梯度分別測(cè)定了三氯甲烷及四氯化碳，結(jié)果均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求。

2.3 臭氧的消毒效果

建立有效臭氧0.13～0.65 mg·L-1的濃度范圍，分別作用于樣品后測(cè)定消毒效果及副產(chǎn)物。由表3知，在5月、7月、8月、9月和10月有效臭氧濃度低于0.15 mg·L-1時(shí)銅綠假單胞菌出現(xiàn)檢出陽(yáng)性。之后對(duì)該6個(gè)濃度梯度分別測(cè)定了溴酸鹽含量，結(jié)果在濃度梯度（0.13～0.50 mg·L-1）范圍內(nèi)溴酸鹽含量均符合要求 （GB 5749—2006規(guī)定溴酸鹽限量值：0.01 mg·L-1）。 當(dāng)臭氧濃度達(dá)到0.65 mg·L-1時(shí)溴酸鹽測(cè)定值為 1.4×10-2mg·L-1，略高于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)限量值。

表1 微酸性次氯酸電解水的消毒效果及副產(chǎn)物量表

表2 高純二氧化氯的消毒效果及副產(chǎn)物量表

表3 臭氧的消毒效果及副產(chǎn)物量表

3 結(jié)論

通過(guò)實(shí)驗(yàn)分析得出對(duì)于桶裝水的消毒要確保次氯酸濃度為50 ppm的電解水稀釋倍數(shù)要低于2 200倍；二氧化氯中有效氯含量要控制在0.16 mg·L-1以上；臭氧的殺菌濃度要控制在0.15～0.65 mg·L-1?？刂坪眉儧匪奈⑸镂廴臼且粋€(gè)系統(tǒng)而精細(xì)的工作[3]，除了按照控制措施操作以外，更重要的是進(jìn)行有效的監(jiān)督、檢查和落實(shí)，才能控制好包裝飲用水的銅綠假單胞菌污染。