李紅艷，汪曉平，楊 林，何晶晶，劉愛京

(1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬江寧醫(yī)院 風(fēng)濕免疫科，江蘇 南京 211100；2.河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院 風(fēng)濕免疫科，河北 石家莊 050000)

系統(tǒng)性硬化癥(systemic sclerosis, SSc)是以微血管閉塞、器官組織進(jìn)行性纖維化及免疫學(xué)異常為特征的自身免疫性病[1]，目前尚缺乏評估其血管病變的血清檢測指標(biāo)。正五聚蛋白3(pentraxin 3, PTX3)是近年新發(fā)現(xiàn)的急性期反應(yīng)蛋白，其肽鏈末端可與成纖維細(xì)胞生長因子2(fibroblast growth factor 2, FGF2)等結(jié)合參與炎癥[2-3]，同時抑制FGF2在內(nèi)皮細(xì)胞上的血管生成活性，間接發(fā)揮抗血管生成的作用[4-6]，而二者比值的平衡可能是維持血管病變穩(wěn)定狀態(tài)的因素之一。本研究主要將探討PTX3在SSc疾病評估中意義，同時篩選SSc血管病變的危險(xiǎn)因素，為臨床SSc疾病監(jiān)測、早期治療及預(yù)后評估提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1研究對象 選取2016年6月至2017年7月在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院風(fēng)濕免疫科住院的SSc初治患者37例為病例組，男5例，女32例，平均年齡(46.4±13.4)歲，病程24.0(33.6)個月。所有患者均符合2013年EULAR/ACR SSc分類標(biāo)準(zhǔn)[7]。隨機(jī)選取同期健康體檢者31例作為對照組，男4例，女27例，平均年齡(46.58±12.91)歲。兩組年齡、性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2分組標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1疾病活動分組 按疾病活動指數(shù)分為活動組(活動指數(shù)≥2.5)及非活動組(0≤活動指數(shù)<2.5)，其中活動指數(shù)是2016年歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟硬皮病試驗(yàn)研究組(The European Scleroderma Trials and Research group, EUSTAR)對SSc患者病情活動程度的修正指數(shù)[8]，總分為10分，以分值2.5為截點(diǎn)，≥2.5即代表疾病活動。

1.2.2肢端潰瘍分組 據(jù)患者病程中有無出現(xiàn)肢端潰瘍(digital ulcer, DU)，分為DU組和無DU組，其中DU定義為在手指掌側(cè)近端指間關(guān)節(jié)指褶線以遠(yuǎn)，出現(xiàn)直徑至少為2 mm的表皮及真皮缺損。

1.2.3肺動脈高壓分組 參照2015年歐洲心臟病學(xué)會/歐洲呼吸學(xué)會肺動脈高壓診斷和治療指南[9]，按超聲心動測量的肺動脈收縮壓估測肺動脈收縮壓力(systolic pulmonary artery pressure, sPAP)分組：無肺動脈高壓(pulmonary arterial hypertension, PAH)：sPAP≤30 mmHg(1 kPa=0.133 mmHg)；輕度PAH：30～50 mmHg；中度PAH：50～70 mmHg；重度PAH：>70 mmHg。

1.3觀察指標(biāo) 記錄患者相關(guān)臨床資料，包括：病程、mRss總積分(total skin score, TSS)、甲襞微循環(huán)檢測總積分(nilfold capillary total score, NCTS)、PTX3、FGF2、總膽固醇(CHOL)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-G)、C-反應(yīng)蛋白(CRP)、紅細(xì)胞沉降率(ESR)。

2 結(jié) 果

2.1PTX3、FGF2水平比較 病例組血清PTX3、FGF2水平均高于對照組(P<0.05)，疾病活動組PTX3水平高于非活動組及對照組(P<0.05)，非活動組與對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而FGF2水平僅在活動組與對照組升高(P<0.05)，見表1～2。

2.2血管相關(guān)病變分組中PTX3、FGF2、PTX3/FGF2水平比較 DU組PTX3、PTX3/FGF2水平高于無DU組(P<0.05)，PAH組PTX3、PTX3/FGF水平高于無PAH組(P<0.05)(因病例組PA均<50 mmHg，故僅分為有無PAH兩組)，而兩組FGF2水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表3～4。

表3 DU分組血清PTX3、FGF2、PTX3/FGF2水平比較

表4 PAH分組血清PTX3、FGF2、PTX3/FGF2水平比較

2.3PTX3與臨床指標(biāo)相關(guān)性分析 病例組血清PTX3水平與CHOL、LDL-G、NCTS呈正相關(guān)(P<0.01)，而與年齡、病程、TSS、CRP、ESR等均無明顯相關(guān)性(P>0.05), 見表4，圖1～3。

圖1 PTX3與CHOL的相關(guān)性 圖2 PTX3與LDL-G的相關(guān)性 圖3 PTX與NCTS的相關(guān)性

表4 PTX3與各指標(biāo)的相關(guān)性分析

2.5SSc患者合并PAH危險(xiǎn)因素分析 以SSc患者是否合并PAH為應(yīng)變量，以CHOL、LDL-G、NCTS、PTX3、PTX3/FGF2為自變量，進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PTX3/FGF2、LDL-G水平升高是SSc患者合并PAH的危險(xiǎn)因素，見表5。

表5 SSc患者合并PAH危險(xiǎn)因素分析結(jié)果

3 討 論

PTX3是含有381個呈不對稱結(jié)構(gòu)的氨基酸分子，結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性促成了其多樣的生物學(xué)特性。近來Meta分析發(fā)現(xiàn)SSc患者血清PTX3水平明顯高于健康對照[10]。也有研究提出PTX3是SSc發(fā)生DU的預(yù)測因素及診斷PAH的生物標(biāo)志物[11-12]，提示PTX3在SSc血管病變的評估中具有一定價值。但也有文獻(xiàn)報(bào)道PTX3升高的患者更易出現(xiàn)肺間質(zhì)纖維化，與血管表現(xiàn)未見統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性[13]。

本研究中SSc患者與對照組相比，血清PTX3值明顯升高，且病情活動者更為顯著。分別對DU組及PAH組比較發(fā)現(xiàn)血清PTX3水平均高于陰性對照，進(jìn)一步分析PTX3/FGF2的變化，發(fā)現(xiàn)二者比值在DU、PAH組中均升高，提示PTX3參與SSc血管病變過程。這可能與PTX3分子肽鏈N端高親和識別及結(jié)合FGF2，既可阻斷PI3K/AKt信號通路，間接減弱血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)分泌，又能使依賴激活狀態(tài)纖維母細(xì)胞生長因子受體(FGFR)的內(nèi)皮細(xì)胞增殖通路MAPKs/ERKs受影響，從而扮演抗血管生成因子的角色有關(guān)[14-16]。因此，二者的平衡或許可被用作評價抗/促血管生成活動的因素。

甲襞微循環(huán)檢測作為一種反應(yīng)末梢微循環(huán)的最常用輔助手段，且具有操作簡單無創(chuàng)等優(yōu)勢，故在SSc早期診斷中應(yīng)用越來越廣泛[17]，積分越高代表微血管病變越嚴(yán)重。在本文中我們發(fā)現(xiàn)SSc患者血清PTX3與NCTS具有正相關(guān)，進(jìn)一步表明PTX3確與SSc患者末梢微循環(huán)障礙有關(guān)聯(lián)。

在本研究中我們還分別對SSc患者合并DU、PAH的可能危險(xiǎn)因素進(jìn)行Logistic回歸分析，結(jié)果提示PTX3/FGF2升高是PAH的危險(xiǎn)因素，故我們認(rèn)為PTX3可能作為預(yù)測SSc患者血管病變之一PAH的一個有價值的生物學(xué)標(biāo)志物。與NC聯(lián)合評價SSc患者末梢循環(huán)更有助于對臨床療效及預(yù)后進(jìn)行總體評估。

另外，本研究中患者血清PTX3值與CHOL、LDL-G呈正相關(guān)，提示PTX3也與脂質(zhì)代謝紊亂有關(guān)。而有研究通過免疫組化染色檢測發(fā)現(xiàn)在動脈粥樣硬化損傷部位確有高表達(dá)PTX3，沉積在病變部位導(dǎo)致血管原位急性反應(yīng)，影響凝血纖溶機(jī)制及血栓形成，加速動脈粥樣硬化進(jìn)程[18-20]。

本文尚有以下許多不足之處：研究為小樣本數(shù)據(jù)，未能檢測到重度肺動脈高壓患者，且由于有創(chuàng)及費(fèi)用高無法通過右心漂浮導(dǎo)管證實(shí)，后期需進(jìn)一步補(bǔ)充病例及數(shù)據(jù)；另外未進(jìn)行追蹤隨訪以比較同一患者病情活動變化、新發(fā)DU、PAH或治療前后的PTX3水平，無法評價PTX3對預(yù)測血管病變的特異及靈敏度，因此尚需要大樣本隨訪研究，并采用適當(dāng)方法深入探究PTX3在SSc病變?nèi)缧盘杺鲗?dǎo)通路等方面的機(jī)制。

綜上，SSc患者血清PTX3水平明顯升高，并與病情活動有關(guān)，且PTX3及PTX3/FGF2可能是SSc患者發(fā)生PAH的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。做為判斷SSc疾病活動及評估血管損傷的血清學(xué)標(biāo)志物之一，PTX3的特異性具有潛在的臨床應(yīng)用價值，有助于疾病的臨床監(jiān)測及預(yù)后評估。當(dāng)然SSc血管病變發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，多種細(xì)胞因子參與其中，PTX3在SSc血管病變中的具體作用機(jī)理及意義尚有待于進(jìn)一步大樣本系統(tǒng)研究。