蔡懷陽，李運澤，鄒勁濤，涂 強

（柳州市人民醫(yī)院消化內(nèi)科1，核醫(yī)學(xué)科2，體檢部3，廣西 柳州 545006）

內(nèi)臟脂肪素（visfatin）是2005 年Fukuhara 等用差異PCR 方法發(fā)現(xiàn)的一種新的由內(nèi)臟脂肪組織表達的脂肪細胞因子，并將其命名為Visfatin，序列分析顯示Visfatin 即為前B 細胞克隆增強因子（PBEF）。內(nèi)臟脂肪素是一種由脂肪組織分泌的蛋白質(zhì)細胞因子，其分子質(zhì)量為52×103，基因編碼區(qū)由491 個氨基酸組成。臨床試驗及動物實驗均發(fā)現(xiàn)內(nèi)臟脂肪素主要在內(nèi)臟脂肪中高度表達，與皮下脂肪組織關(guān)系不大，故將其命名為內(nèi)臟脂肪素。熒光免疫原位雜交法顯示內(nèi)臟脂肪素還主要在骨髓、肝臟、肌肉、淋巴組織及胎膜中表達。研究表明，內(nèi)臟脂肪素與肥胖、2 型糖尿病、動脈粥樣硬化、缺血性腦血管病等均有密切關(guān)系[1，2]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)臟脂肪素具有類胰島素樣作用，還能促進脂肪的合成和聚集，可能與肥胖、胰島素抵抗和脂代謝密切相關(guān)。已有的研究表明非酒精性脂肪性肝病與肥胖及代謝綜合征有密切關(guān)系。近年研究發(fā)現(xiàn)胰島素抵抗在非酒精性脂肪性肝病發(fā)病機制中起關(guān)鍵作用[1，2]。目前尚未有關(guān)于血漿內(nèi)臟脂肪素與非酒精性脂肪性肝病患者胰島素抵抗的關(guān)系的研究報道。本研究旨在探討血漿內(nèi)臟脂肪素水平與非酒精性脂肪性肝病患者胰島素抵抗的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 經(jīng)柳州市人民醫(yī)院倫理委員會批準，選取2013 年7 月～2014 年12 月于柳州市人民醫(yī)院非酒精性脂肪性肝病患者110 例，根據(jù)嚴重程度分為輕度NAFLD 組（40 例）、中度NAFLD 組（40 例）和重度NAFLD 組（30 例），另外選取同期體檢正常者作為對照組（60 例）。非酒精性脂肪性肝病的診斷標準采用中華醫(yī)學(xué)會肝臟病學(xué)分會脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組制定的非酒精性脂肪性肝病診斷標準[3]。

1.2 方法

1.2.1 生理指標的測定 所有受檢者均空腹、免冠、脫鞋，僅穿單衣測量其身高、體質(zhì)量、腰圍、臀圍。腰圍：取腋中線肋弓下緣至髂前上棘連線的中點水平面周徑；臀圍：取兩側(cè)股骨粗隆水平面周徑；體質(zhì)量指數(shù)（BMI）=體質(zhì)量（kg）/身高（m2）。腰臀比（WHR）=腰圍/臀圍。

1.2.2 生化指標的測定 抽取禁食12 h 后的次日清晨空腹時肘靜脈血，分離血清2 ml，用酶聯(lián)免疫法（日立7170-S 全自動生化分析儀）測定甘油三脂、總膽固醇、血糖、肝功能等指標。分離血清4 ml，采用BL-9600 化學(xué)發(fā)光分析儀（天津貝爾公司）測定血清空腹胰島素水平。穩(wěn)態(tài)模型評估的胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）=空腹血糖（FBG）×空腹胰島素（FINS）/22.5。

1.2.3 血漿內(nèi)臟脂肪素的標本采集及測定 采生化指標血樣同時留取肘靜脈血2 ml，EDTA 抗凝，室溫靜置30 min 后，離心機3000 r/min 離心15 min，分離血漿0.5 ml，-80 ℃保存待檢。試劑盒購自武漢博士公司，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定血漿內(nèi)臟脂肪素水平。按照試劑盒說明書進行操作。

1.3 觀察指標 比較對照組與NAFLD 組的身高、體質(zhì)量、臀圍、腰圍、甘油三脂、總膽固醇、血糖、肝功能、胰島素水平、血漿內(nèi)臟脂肪素水平及HOMAIR。并對NAFLD 組患者血漿內(nèi)臟脂肪素水平與HOMA-IR 的相關(guān)性進行Pearson 相關(guān)分析。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 17.0 統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計，計數(shù)資料以（%）表示，采用χ2檢驗；計量資料以（）表示，各組之間比較均進行方差齊性檢驗，兩組間顯著性比較用t檢驗。相關(guān)性用Pearson 相關(guān)分析。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組臨床及實驗室指標比較 對照組與各NAFLD 組的性別構(gòu)成、年齡、身高、總膽紅素、直接膽紅素、間接膽紅素、白蛋白、膽固醇、甘油三酯比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；各組體質(zhì)量、體質(zhì)量指數(shù)、腰臀比、內(nèi)臟脂肪素、HOMA-IR 比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；內(nèi)臟脂肪素在輕度NAFLD 組、中度NAFLD 組、重度NAFLD 組中依次升高，輕度NAFLD 組與中度NAFLD 組、重度NAFLD 組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；HOMA-IR 在輕度NAFLD 組、中度NAFLD 組、重度NAFLD 組中兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 各組臨床及實驗室指標比較（n，）

表1 各組臨床及實驗室指標比較（n，）

注：與對照組比較，aP＜0.05；與輕度NAFLD 組比較，bP＜0.05

2.2 NAFLD 組患者血漿內(nèi)臟脂肪素水平與HOMAIR 的相關(guān)性 Pearson 相關(guān)分析顯示，內(nèi)臟脂肪素與HOMA-IR 呈正相關(guān)，在輕度NAFLD 組、中度NAFLD 組、重度NAFLD 組，內(nèi)臟脂肪素與HOMAIR 的相關(guān)性隨脂肪肝的加重而增強，見表2。

表2 NAFLD 組患者血漿內(nèi)臟脂肪素水平與HOMA-IR 的相關(guān)性

3 討論

非酒精性脂肪性肝病是代謝綜合征的一種，在臨床上十分重要，它的特征是肝細胞變性以及脂肪沉積。該病是一種良性病變，然而也需要進行積極的治療，否則可能演化成非酒精性脂肪性肝炎，甚至相關(guān)肝硬化和肝細胞癌變也有可能[4，5]。最近的隊列研究顯示，年內(nèi)連續(xù)肝活檢發(fā)現(xiàn)進展為非酒精性脂肪性肝炎的風(fēng)險高達44%[6]。隨著肥胖的增加，肥胖相關(guān)性疾病，如代謝綜合征和2 型糖尿病脂肪肝等發(fā)病率也逐年上升，成年人非酒精性脂肪性肝病的患病率高達25%[7]。

胰島素抵抗不僅是糖尿病的特征，同時也普遍存在于人類多種疾病和病理狀態(tài)中，如存在于發(fā)病率日益增加的代謝綜合征中。迄今，人們對于代謝綜合征的病因及病理生理機制尚不明確，比較趨向性的觀點是由于某些原因?qū)е赂箖?nèi)脂肪增多，形成腹型肥胖（中心性肥胖），因此它也被認為是核心環(huán)節(jié)，而胰島素抵抗在代謝綜合征中的地位被認為繼發(fā)于中心性肥胖所產(chǎn)生的一種病理生理變化。胰島素抵抗也被認為是糖尿病和心血管病發(fā)病的重要機制之一。胰島素抵抗狀態(tài)常與肥胖特別是腹部脂肪組織增加并存，兩者可互為因果。

非酒精性脂肪性肝病的發(fā)生與內(nèi)分泌系統(tǒng)關(guān)系密切，特別與代謝綜合征的發(fā)生互為因果[8]。已有的研究表明內(nèi)臟Visfatin mRNA 表達水平增加可使血清內(nèi)臟脂肪素水平增高，從而降低血糖和胰島素水平。內(nèi)臟脂肪素不僅增加胰島素的敏感性，而且具有類胰島素作用，甚至誘導(dǎo)脂肪和肌肉組織中的葡萄糖攝取并抑制肝臟組織中葡萄糖生成，這表明內(nèi)臟脂肪素可能在防止胰島素抵抗的發(fā)生在起重要作用。而當用口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）進行糖代謝篩查時，約70%的非酒精性脂肪性肝炎患者出現(xiàn)空腹血糖受損，葡萄糖耐量異常或2 型糖尿病[9]。研究發(fā)現(xiàn)，2 型糖尿病患者空腹血漿內(nèi)臟脂肪素水平明顯升高，與胰島素抵抗有一定的相關(guān)性，提示可能存在內(nèi)在聯(lián)系。近年大量研究表明，非酒精性脂肪性肝病與代謝綜合征的各個組分密切伴隨，甚至有學(xué)者將其作為代謝綜合征的組分之一。有研究表明非酒精性脂肪性肝病患者存在明顯胰島素抵抗，腹型肥胖與非酒精性脂肪性肝病發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切。

有研究提示脂肪肝患者存在的慢性低度炎癥反應(yīng)，炎癥反應(yīng)程度與肥胖和以高胰島素血癥為主的胰島素抵抗有密切關(guān)系[10]。Day 和James 的“二次打擊”學(xué)說，認為胰島素抵抗是參與非酒精性脂肪性肝炎發(fā)病機制的核心環(huán)節(jié)。胰島素抵抗可減弱和（或）破壞胰島素調(diào)節(jié)脂肪代謝的作用，促進脂質(zhì)溶解，提高循環(huán)中游離脂肪酸濃度，加快肝臟游離脂肪酸的攝取和肝細胞內(nèi)甘油三酯的合成，減少甘油三酯從肝細胞內(nèi)排出，促進非酒精性脂肪性肝炎的形成。研究發(fā)現(xiàn)胰島素增敏劑使非酒精性脂肪性肝炎患者的生化指標及組織學(xué)特征獲得改善，進一步證明了胰島素抵抗在非酒精性脂肪性肝炎發(fā)病中的作用。另研究表明非酒精性脂肪肝大鼠肝組織存在胰島素抵抗[11]。本研究結(jié)果顯示，相對于對照人群，非酒精性脂肪性肝病患者存在胰島素抵抗，同時空腹血糖及空腹胰島素水平也升高。血漿內(nèi)臟脂肪素在非酒精性脂肪性肝病患者中表達增加，且隨著脂肪肝的加重，血漿內(nèi)臟脂肪素水平逐漸升高。本研究結(jié)果表明，非酒精性脂肪性肝病患者空腹血漿內(nèi)臟脂肪素水平與胰島素抵抗呈正相關(guān)，且隨著脂肪肝程度的加重，其相關(guān)性更強烈。這提示內(nèi)臟脂肪素與胰島素抵抗密切相關(guān)，且有可能參與糖脂代謝。根據(jù)已有的研究推測內(nèi)臟脂肪素可能通過旁分泌途徑作用于內(nèi)臟脂肪組織，促進內(nèi)臟脂肪堆積，加重胰島素抵抗。在2 型糖尿病患者中增多的內(nèi)臟脂肪素既加重內(nèi)臟脂肪的堆積，又能促進導(dǎo)致胰島素抵抗的炎癥因子如TNF-α、IL-6 和IL-1β 等的表達和分泌。因此，內(nèi)臟脂肪素最終表現(xiàn)出加重胰島素抵抗。推測在非酒精性脂肪性肝病患者中存在同樣的作用機制。

綜上所述，血漿內(nèi)臟脂肪素水平與非酒精性脂肪性肝病的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)；非酒精性脂肪性肝病與代謝綜合征關(guān)系密切，胰島素抵抗是代謝綜合征的中心環(huán)節(jié)，內(nèi)臟脂肪素與胰島素抵抗呈正相關(guān)，但兩者用于評價非酒精性脂肪性肝病的價值尚需進一步的研究。