李曉瓊 ， 王紅英 ， 陳玉晶 ， 張 潔 ， 趙東璞

(1.鄭州蘭博爾科技有限公司 ， 河南 鄭州 450009 ； 2.河南省化工研究所有限責(zé)任公司 ， 河南 鄭州 450052)

0 前言

氰霜唑是日本石原產(chǎn)業(yè)株式會社獨立開發(fā)的新一代苯基咪唑類殺菌劑，對以霜霉病、疫病為代表的卵菌綱病害和油菜科的根腐病有優(yōu)異的防效[1-2]。2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑(2-Cyano-4-chloro-5-(4-methylphenyl)imidazole)是合成氰霜唑的關(guān)鍵中間體(圖 1)，其含量對氰霜唑合成的收率和質(zhì)量有重要影響，因此2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑含量的實時分析監(jiān)控是非常必要的[3]。盡管氰霜唑的分析方法多有報道，但目前國內(nèi)還未見有2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑分析方法的報道，本文采用液相色譜法開發(fā)了一種2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑的定量分析方法。該方法簡便快捷，分離效果好，準確度和精密度均能達到定量分析的要求，可作為企業(yè)生產(chǎn)過程控制中間體的分析手段，為產(chǎn)成品質(zhì)量控制提供重要保障[4-6]。

圖1 2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑的結(jié)構(gòu)

1 實驗部分

1.1 試劑和溶液

乙腈，色譜純；水，高純水；2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑標樣，質(zhì)量分數(shù)為99.76%，自提純；2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑工業(yè)品。

1.2 儀器

Agilent 1220高效液相色譜儀，具有可變波長紫外檢測器；色譜工作站；色譜柱：150 mm ×4.6 mm(id)不銹鋼柱，內(nèi)裝5 μm粒徑的 XDB C18填充物。

1.3 液相色譜操作條件

流動相，60∶40(體積比)的乙腈-水，經(jīng)過濾和超聲脫氣；流速，1.0 mL/min；柱溫，室溫；檢測波長，254 nm；進樣體積，5 μL；保留時間，2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑約3.7 min。

1.4 測定步驟

1.4.1標樣溶液的配制

稱取2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑標樣0.03 g(精確至0.000 2 g)，置于25 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻備用。

1.4.2試樣溶液的配制

稱取2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑試樣0.03 g(精確至0.000 2 g)，置于25 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻備用。

1.4.3測定

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標樣溶液，直至相鄰2針標樣溶液的響應(yīng)值相對變化≤1.5%后 ，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

1.4.4計算

將測得的2針試樣溶液以及試樣溶液前后2針標樣溶液中2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑峰面積分別進行平均。試樣中2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑的質(zhì)量分數(shù)X(%)按下式計算：

式中：r1，標樣溶液中2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑峰面積的平均值；r2，試樣溶液中2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑峰面積的平均值；m1，2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑標樣的質(zhì)量，g；m2，2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑試樣的質(zhì)量，g；P，標樣中2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑的質(zhì)量分數(shù)，%。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的選擇

首先，用紫外分光光度計對2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑標準溶液進行全波長掃描，發(fā)現(xiàn)在波長254 nm處有較強吸收，選擇254 nm為檢測波長對樣品進行測定。然后，分別選用不同比例的乙腈-水在不同流速下進行分析測試，發(fā)現(xiàn)以60∶40(體積比)的乙腈-水作為流動相，流速為1.0 mL/min時，2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑前后雜質(zhì)都能得到較好地分離，各峰峰形對稱性好，保留時間相對較短，因此選擇了60∶40(體積比)的乙腈-水作為流動相。

2.2 線性關(guān)系曲線的測定

在上述色譜操作條件下，按照“標樣溶液的配制方法”，配制5個不同濃度的2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑的標樣溶液，依次進行測定，測定結(jié)果見表1。以2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑標樣質(zhì)量體積濃度為橫坐標，相應(yīng)的2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑峰面積為縱坐標繪制出對應(yīng)的關(guān)系曲線，計算得出線性回歸方程為：y=7.851x+235.14，相關(guān)系數(shù)為：R2=0.999 5，見表1、圖2。

2.3 精密度的測定

在上述色譜操作條件下，稱取5個同一批次的試樣，按照上述方法配制成5個試樣溶液進行平行測定，2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑質(zhì)量分數(shù)平均值為96.18%，標準偏差為0.47，變異系數(shù)為0.49%。

表1 線性相關(guān)性測定結(jié)果

圖2 線性關(guān)系曲線

2.4 方法的準確度的測定

在上述色譜操作條件下，稱取5份已知質(zhì)量分數(shù)的2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑的試樣，分別加入已知質(zhì)量的2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑標樣，配成5個混合樣，依次進行測定，結(jié)果見表2，測得平均回收率為99.70%。從檢測結(jié)果可以看出：該測定方法具有較好的準確度。

表2 添加回收率測定結(jié)果

3 結(jié)論

本文開發(fā)了一種2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑的高效液相色譜分析方法，該方法使用XDB C18色譜柱(5 μm，150 mm×4.6 mm)，優(yōu)化的檢測條件為紫外檢測器檢測波長254 nm，流動相60∶40(體積比)乙腈-水，流速1.0 mL/min。同時對該方法測試的線性關(guān)系、準確度和精密度進行了評價。結(jié)果表明，利用該方法分析2-氰基-4-氯-5-(4-甲基苯基)咪唑樣品時，含量與峰面積具有較好的線性關(guān)系，方法的準確度和精密度較高，操作簡單、快速、準確，完全能夠滿足企業(yè)對產(chǎn)品生產(chǎn)和控制時的分析要求，是進行產(chǎn)品質(zhì)量檢測的理想分析方法。