戴超英，林強鋒，吳夢伊，胡崇偉

(福建農(nóng)林大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院(蜂學(xué)學(xué)院)，福州 350000)

阿法沙龍為新型固醇類快速起效麻醉藥，誘導(dǎo)麻醉迅速平穩(wěn)，且有輕微的肌松效果[1]。無刺激性，犬貓臨床通常靜脈或肌肉注射，該藥經(jīng)肝代謝后即可蘇醒，故可重復(fù)用藥或連續(xù)注射延長作用時間[2]。阿法沙龍具有安全性高、意識及食欲恢復(fù)快、代謝迅速在體內(nèi)不造成藥物累積[3]等優(yōu)點，在國外小動物臨床中廣泛使用。阿法沙龍的臨床應(yīng)用已成為備受關(guān)注的領(lǐng)域，在全憑靜脈麻醉(TIVA)、連續(xù)靜脈滴注(CRI)等方面均有相關(guān)研究[4-6]?，F(xiàn)階段改良后水溶性阿法沙龍，避免了組胺釋放和過敏反應(yīng)，但部分文獻提示其單用易造成蘇醒期不平穩(wěn)、淺麻醉狀態(tài)下可見肌肉顫搐和靜脈注射誘導(dǎo)麻醉時發(fā)生呼吸暫停的不良反應(yīng)[7]，可能由于此原因?qū)е聡鴥?nèi)小動物臨床對該藥應(yīng)用較少，且大多僅將其作為誘導(dǎo)麻醉劑使用。

異氟烷作為目前小動物臨床廣泛使用的吸入性麻醉劑，具有可逆、可控、安全性高的優(yōu)點。但其作為吸入麻醉劑，給藥方式對小動物呼吸道具有刺激性，藥物本身對心功能也有一定的抑制作用，麻醉過深時同樣會造成呼吸抑制、顫栗、血壓心率驟降的不良反應(yīng)[8]，而烷類氣體的大量使用也會造成環(huán)境污染問題[9]。

綜上所述，IVIA可大幅度降低異氟烷的劑量，人醫(yī)和獸醫(yī)中有大量關(guān)于氯胺酮、芬太尼類藥物的IVIA研究[10-12]，而關(guān)于阿法沙龍IVIA的研究則較少。因此，本文采用不同劑量的阿法沙龍CRI配合0.5%異氟烷的IVIA，與單純的2%異氟烷吸入麻醉比較，探討阿法沙龍和異氟烷靜吸復(fù)合麻醉對機體生理功能和麻醉效果的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

體況良好的成年小型犬18只，雌雄各半，體重為(3.79±1.08) kg。在同一條件下飼養(yǎng)10 d，經(jīng)體檢判定為健康后，進行IVIA試驗(靜吸組)。每只試驗犬間隔45 d，在體檢健康后，進行單純吸入麻醉試驗(吸入組)。

1.2 主要試驗器材

Midmark Cardell touch監(jiān)護儀，EDAN VE-300 獸用心電圖儀，瑞沃德RM400S獸用麻醉揮發(fā)罐，美國MATRX麻醉機。

1.3 試驗藥品

阿法沙龍(alfaxalone，ALF)購自Jurox公司(Batch No:72247)，丙泊酚(propofol，PRO)購自廣東嘉博制藥有限公司(Batch No:19AA007)，異氟烷(isoflurane，ISO)購自江蘇恒豐強生物技術(shù)有限公司(Batch No:20190406),布托啡諾(butrophanol，BUT)購自Merial公司(Batch No:A141A03)。

1.4 試驗分組及方法

維持麻醉期間，各組給藥分別如下,L組(編號1～6號)： ALF 3 mg·(kg·h)-1連續(xù)恒速靜脈滴注(CRI)，0.5% ISO吸入給藥；M組(7～12號)：ALF 6 mg·(kg·h)-1， 0.5% ISO；H組(13～18號)：ALF 9 mg·(kg·h)-1， 0.5% ISO；CⅠ(1～6號)、CⅡ(7～12號)、CⅢ(13～18號)組：2% ISO。

記錄維持麻醉15、30、45、60 min以及停止給藥后15 min(75 min)的各項指標，記錄停藥后動物自主呼吸、自主站立的時間，并在試驗后3 d對試驗犬進行基礎(chǔ)生理檢查，觀察是否有異常情況。

1.5 監(jiān)測指標

試驗犬側(cè)臥位，分別測量體溫(T)、脈搏(P)、呼吸頻率(RR)、心率(HR)、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、平均壓(MBP)、呼末二氧化碳(EtCO2)、血氧(SpO2)、心電圖(ECG)，評估眼球位置、眼瞼反射、鎮(zhèn)痛效果、鎮(zhèn)靜效果和肌松效果。其中，HR、EtCO2、SpO2、ECG利用監(jiān)護儀進行監(jiān)測；SBP、DBP、MBP利用血壓儀進行監(jiān)測。人為各項疼痛刺激結(jié)合墨爾本評分[13]評估試驗犬麻醉中的鎮(zhèn)痛效果；從監(jiān)測的各項生理指標、眼瞼反射、眼球位置及鎮(zhèn)靜效果試驗和肌松效果試驗綜合評估麻醉質(zhì)量[14]，觀察有無任何不良反應(yīng)。

1.6 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié) 果

2.1 基礎(chǔ)生理體征監(jiān)測

2.1.1 體溫(T) 維持麻醉過程中，試驗犬T均發(fā)生下降，除CⅠ組和L組在15 min時無顯著下降外，其余各組各時間點均發(fā)生顯著或極顯著下降(P<0.05，P<0.01)。 比較靜吸組和吸入組結(jié)合表1可見，在30、45及75 min CⅠ組顯著或極顯著低于L組(P<0.05，P<0.01)；在15、45、60及75 min CⅡ組顯著或極顯著低于M組(P<0.05，P<0.01)；在15、30 min CⅢ組顯著低于H組(P<0.05)。將靜吸組與吸入組的T0與75 min比較，均存在極顯著差異(P<0.01)。

表1 試驗各組不同時間點體溫的變化

2.1.2 脈搏(P)及心率(HR) 維持麻醉過程中，靜吸組和吸入組的P及HR差異較大，CⅠ、CⅡ、CⅢ及L組在麻醉后各時間點均發(fā)生顯著或極顯著下降(P<0.05，P<0.01)，M組和H組則在麻醉不同時間點顯著或極顯著升高(P<0.05，P<0.01)。比較靜吸組及吸入組結(jié)合表2可見，15 min時，CⅠ組的P極顯著低于L組(P<0.01)，30 min時，CⅠ組的HR顯著低于L組(P<0.05)；維持麻醉全過程中，CⅡ組的P及HR顯著或極顯著低于M組(P<0.05，P<0.01)；15、30、45及60 min時，CⅢ組的P及HR顯著或極顯著低于H組(P<0.05，P<0.01)。吸入組及在60 min左右P及HR達到最低點，靜吸M、H組在60 min左右P及HR升至最高點，僅靜吸M組的P在75 min時與T0比較仍存在極顯著差異(P<0.01)。

表2 試驗各組不同時間點脈博(P)及心率(HR)的變化

2.1.3 呼吸頻率(RR)及呼末二氧化碳(EtCO2) 維持麻醉時RR均下降并大致與EtCO2成反比，由于無法測量誘導(dǎo)麻醉前EtCO2的數(shù)值，則不進行EtCO2的組內(nèi)比較。RR除CⅡ組在維持麻醉過程中無統(tǒng)計學(xué)差異外，其余各組維持麻醉過程中均發(fā)生顯著或極顯著下降(P<0.05，P<0.01)。比較靜吸組及吸入組結(jié)合表3可見，CⅡ組的RR在15、30、45、60 min時顯著或極顯著低于M組(P<0.05，P<0.01)，CⅢ組的EtCO2在45 min顯著低于H組(P<0.05)，其他組無統(tǒng)計學(xué)差異。由表3可見，除CⅢ組外，RR均在45 min 時達到最低點，同時，EtCO2達到最高點，靜吸組維持麻醉時呼吸抑制程度高于吸入組，且ALF劑量越大呼吸抑制越嚴重。在75 min時RR均有回升，并與T0比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。

表3 試驗各組不同時間點呼吸頻率(RR)及呼末二氧化碳(EtCO2)的變化

2.1.4 血壓(BP) 包括SBP、DBP、MBP。靜吸組和吸入組的BP中，各組維持麻醉過程中均發(fā)生顯著或極顯著下降(P<0.05，P<0.01)，而靜吸L、H組75 min時，與T0比較也提示顯著或極顯著下降(P<0.05，P<0.01)。比較靜吸組與吸入組結(jié)合表4可見，在45 min時，CⅠ組MBP極顯著低于L組(P<0.01)；在維持麻醉過程中的DBP，在15、30 min 時的MBP以及在75 min時的SBP、DBP、MBP，CⅡ組顯著或極顯著低于M組(P<0.05，P<0.01)； 在75 min時CⅢ組SBP顯著高于H組(P<0.05)。吸入組與靜吸組比較可見，兩者對試驗犬SBP的影響相似，對DBP的影響差異較大，維持麻醉時DBP的最低值與T0比較，全試驗組下降44.95～54.55 mmHg，其中，吸入組對DBP抑制作用較強，靜吸M組的BP在75 min時與T0比較無顯著差異(P>0.05)。

開放平臺針對各類圖書館館藏資源的開放數(shù)據(jù)建立統(tǒng)一、標準的外部訪問接口，同時采用成熟的接口管理系統(tǒng)對包括API、Web Service、SPARQL Endpoint、關(guān)聯(lián)數(shù)據(jù)發(fā)布接口等在內(nèi)的各項服務(wù)進行有效的監(jiān)控和管理；針對圖書館資源的訪問方式，構(gòu)建基于總線的訪問接口體系結(jié)構(gòu)；并針對資源的格式，利用RDF的方式進行結(jié)構(gòu)化數(shù)據(jù)向三元組的轉(zhuǎn)換。

表4 試驗各組不同時間點收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)及平均壓(MBP)的變化

2.1.5 血氧(SpO2) 維持麻醉時氧流量均保持不變，但靜吸組和吸入組SpO2差異較大，除吸入CⅠ、CⅢ組在維持麻醉后無統(tǒng)計學(xué)差異外，其余各組維持麻醉時均發(fā)生顯著或極顯著下降(P<0.05，P<0.01)。 比較靜吸組及吸入組結(jié)合表5可見，在15 min時CⅠ組顯著低于L組(P<0.05)；在30、45、60 min時CⅡ組顯著或極顯著低于M組(P<0.05，P<0.01)；在75 min時CⅢ組顯著低于H組(P<0.05)。吸入組在麻醉后SpO2呈下降趨勢，靜吸組呈上升趨勢。

2.1.6 心電圖(ECG) 圖1為隨機挑選的某試驗犬誘導(dǎo)麻醉前及維持麻醉期間的ECG紙圖，該圖提示，該犬在兩次誘導(dǎo)麻醉前均出現(xiàn)竇性心律不齊的現(xiàn)象，懷疑是由于緊張引起的竇性心律不齊[15]。而在維持麻醉時，靜吸組ECG多提示心律規(guī)律；吸入組則表現(xiàn)出更嚴重的心律不齊和竇性心率變緩。

表5 試驗各組不同時間點血氧(SpO2)的變化

A. M組麻醉前心電圖，心率165次·min-1(25 mm·s-1, 10 mm·mv-1)；B. M組麻醉后30 min心電圖，心率128次·min-1(25 mm·s-1, 10 mm·mv-1)；C. CⅡ組麻醉前心電圖，心率144次·min-1(25 mm·s-1, 10 mm·mv-1)；D. CⅡ組麻醉后30 min 心電圖，心率95次·min-1(25 mm·s-1, 10 mm·mv-1)A. ECG before anesthesia in group M, heart rate 165 times·min-1 (25 mm·s-1, 10 mm·mv-1); B. ECG 30 min after anesthesia in group M, heart rate 128 times·min-1 (25 mm·s-1, 10 mm·mv-1); C. ECG anesthesia in group CⅡ, heart rate 144 times·min-1 (25 mm·s-1, 10 mm·mv-1); D. ECG 30 min after anesthesia in group CⅡ, heart rate 95 times ·min-1 (25 mm·s-1, 10 mm·mv-1)圖1 隨機挑選1只試驗犬(10號)前后兩次試驗的ECGFig.1 ECG of two trials of a randomly selected experimental dog (No.10)

2.1.7 眼球位置及眼瞼反射 臨床上常將眼球位置和眼瞼反射來作為簡單判別犬的麻醉深度的指標之一，在本試驗中，吸入組的眼球位置均轉(zhuǎn)向腹側(cè)達到圍手術(shù)期麻醉深度[16]，且在維持麻醉期間眼瞼均無反射。靜吸L組中，2只試驗犬(2號、4號)眼球在15～30 min時并未下落，同時，伴有輕微的眼瞼反射，可能提示ALF 3 mg·(kg·h)-1的靜吸麻醉方案對部分犬只存在麻醉劑量過??；而靜吸H組中，1只試驗犬(15號)則發(fā)生眼球后翻下落過深及無眼瞼反射的現(xiàn)象。

2.2 鎮(zhèn)痛效果(夾尾反射、針刺試驗)、鎮(zhèn)靜效果評估

結(jié)合各類文獻及墨爾本疼痛評分[17]，維持麻醉過程中，針刺唇鼻無反應(yīng)計1分；針刺四肢軀干無反應(yīng)計1分；針刺腹部無反應(yīng)計1分；針刺肛周無反應(yīng)計1分；鉗夾尾根下方無反應(yīng)計1分；鉗夾四肢趾部無反應(yīng)計1分；鉗夾腹部皮膚無反應(yīng)計1分。根據(jù)表6可見，靜吸L組在15、30 min時有輕微的疼痛反應(yīng)，其他靜吸組和吸入組無明顯疼痛反應(yīng)。

維持麻醉過程中，用手術(shù)器械敲打桌面觀察觀察試驗犬是否出現(xiàn)動耳、眨眼、肌肉顫抖、抽動四肢和抬頭等行為。在所有試驗犬麻醉過程中均無發(fā)生以上現(xiàn)象，提示鎮(zhèn)靜效果良好。

表6 各試驗組給藥后鎮(zhèn)痛效果評分

2.3 肌松效果評估

結(jié)合文獻資料[18]，評估試驗犬維持麻醉后舌肌松弛程度、肛門松弛程度以及擺尾松弛程度。打開口腔牽拉舌部，完全無阻力計3分；輕度阻力計2分；中度阻力計1分；阻力嚴重計0分。監(jiān)測人員小指伸入肛門0.5～1.0 cm指檢，試驗犬清醒狀態(tài)下肛門松弛程度為0分后依次遞增，肛門完全松弛無阻力計5分。監(jiān)測人員擺動尾根部，完全無阻力計3分；輕度阻力計2分；中度阻力計1分；阻力嚴重計0分。表7可見，在肛門松弛評分多計為3分中度松弛時，維持麻醉時吸入組肌松效果均良好，靜吸L組在15、30 min時肌松效果較差，部分試驗犬尾根部有輕度阻力和肛門較緊張；靜吸H組部分試驗犬在45 min時，肛門括約肌過度松弛。

表7 各試驗組給藥后肌松效果評分

2.4 停藥后蘇醒監(jiān)測

2.4.1 各組蘇醒時間 蘇醒時間分為恢復(fù)眨眼反射時間和自主站立時間，從(60±2) min關(guān)閉所有麻醉藥物給藥途徑，結(jié)束維持麻醉開始計時。表8可見，眨眼反射項目中 L-CⅠ組差異顯著(P<0.05)；M-CⅡ組差異極顯著(P<0.01)。自主站立項目中H-CⅢ組差異極顯著(P<0.01)。靜吸L、M組眨眼反射和自主站立時間，均小于同試驗犬的吸入CⅠ、CⅡ組，可提示ALF 3和6 mg·(kg·h)-1的IVIA中，犬的蘇醒時間要快于單純吸入麻醉。

表8 各試驗組停藥后的蘇醒時間

2.4.2 蘇醒期異常情況 所有試驗犬在蘇醒時均未發(fā)生異常情況，蘇醒較為平穩(wěn)，在試驗后3 d的基礎(chǔ)生理檢查時也均未發(fā)生異常。

3 討 論

3.1 ALF+ISO的IVIA對主要生理指標的影響

3.1.1 對體溫的影響 試驗結(jié)果顯示，各組體溫存在不同的統(tǒng)計學(xué)差異。PRO誘導(dǎo)的ISO吸入麻醉會對犬的體溫造成顯著下降[19]，據(jù)劉慶等[20]報道，與TIVA比較，IVIA在給予更高劑量的氟類麻醉劑時，機體的體溫會下降更多。圍麻醉期的低體溫會引起如心律失常、術(shù)后顫栗缺氧、BP、HR下降及手術(shù)后切口更易感染等一系列問題[21]，故體溫是保證機體在圍麻醉期安全性的重要條件之一。本試驗中，單純吸入麻醉對體溫有明顯的抑制作用，而ALF的IVIA，從整體來看，對試驗犬體溫的影響小于吸入組，其中,M組在圍麻醉期對體溫的影響最小。

3.1.2 對P、HR、BP、SBP、DBP、MBP及SpO2的影響 P、HR、BP及SpO2可反映機體的循環(huán)系統(tǒng)問題，各類麻醉劑的使用都會不同程度地抑制循環(huán)系統(tǒng)[22]，在人醫(yī)和獸醫(yī)中，關(guān)于IVIA和吸入麻醉的對比試驗，結(jié)果多為吸入麻醉對機體循環(huán)、呼吸系統(tǒng)影響較大[23-24]。ALF在TIVA、誘導(dǎo)麻醉、超量靜脈麻醉等麻醉方式中都表現(xiàn)出對循環(huán)系統(tǒng)影響極小[25]。結(jié)合表2的P及HR，IVIA與吸入麻醉的對比很顯著，在靜吸M、H組的維持麻醉過程中，P及HR均有不同程度的升高，且劑量越大，試驗犬P及HR越接近T0的數(shù)值。

BP的監(jiān)測分成了SBP、DBP、MBP 3項，在Psatha等[26]的研究中，提出ALF在健康犬中作為誘導(dǎo)麻醉劑使用時，平均動脈壓的基線會比給予PRO的犬更早恢復(fù)。Ambros 等[27]研究表明，僅使用ALF的犬心臟指數(shù)(CI)似乎表現(xiàn)的更好，甚至在誘導(dǎo)麻醉后CI數(shù)值還會輕微上升。同時，ISO在維持麻醉中更容易出現(xiàn)低血壓的情況[28]，本試驗中，SBP、DBP、MBP在維持麻醉過程中均出現(xiàn)下降，但M-CⅡ組的DMP在維持麻醉過程中存在顯著差異，提示該劑量ALF的IVIA對DBP有較好的正向提高作用，在全試驗組中對BP的舒張功能影響最小。從表4可見，靜吸組維持麻醉時整體BP值高于吸入組，且波動更小，可合理推測靜吸組對試驗犬BP的影響，尤其是DBP要小于吸入組。

在Muir等[29]研究中,在給予ALF后會造成HR上升、BP下降，但每分輸出量(CO)和CI并未改變的結(jié)果，該作者解釋懷疑是由于體循環(huán)阻力(SVR)的補償反應(yīng)所導(dǎo)致。本試驗僅進行了基礎(chǔ)監(jiān)測，但靜吸組HR及BP的監(jiān)測結(jié)果，也反映出在ALF 6及9 mg·(kg·h)-1的IVIA時，對心血管影響極小。

麻醉狀態(tài)下的SpO2可以評估機體的氧合狀態(tài)和麻醉劑對呼吸、心血管的抑制作用[30]，評估是否出現(xiàn)低氧血癥或突發(fā)性缺氧。本試驗可見，靜吸組比吸入組在維持麻醉中整體SpO2值更高，M-CⅡ組有統(tǒng)計學(xué)差異。O’Hagan等[31]研究顯示ALF對SpO2幾乎無影響。Juan等[32]也提出的ALF可提供穩(wěn)定的麻醉和溫和的麻醉恢復(fù)期，與本試驗結(jié)果基本相一致。

3.2 ALF+ISO的IVIA對鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛和肌松效果的影響

ALF具有與PRO類似的快速起效的麻醉效果，鎮(zhèn)靜作用良好但無鎮(zhèn)痛作用，與PRO相比，ALF對心血管的影響更小安全性更高[3]，Buisman等[33]研究表明，與氯胺酮比較，ALF的麻醉恢復(fù)期更短。本試驗均在試驗前30 min皮下注射BUT，因此，鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜效果良好，僅靜吸L組個別試驗犬有疼痛反應(yīng)和眼瞼反射，懷疑是由于個體麻醉耐受程度不同，導(dǎo)致ALF 3 mg·(kg·h)-1的IVIA無法滿足部分犬圍手術(shù)期的麻醉深度。

與ISO相比，ALF的肌松作用較輕微[34-36]，肌松效果試驗其他組表現(xiàn)良好，僅靜吸H組個別試驗犬肛門松弛程度較高及擺尾試驗評分較高，可能是由于ALF 9 mg·(kg·h)-1的IVIA麻醉方案的藥物劑量過高，造成部分犬圍手術(shù)期過度肌松。

3.3 ALF+ISO的IVIA對麻醉質(zhì)量的提高

ALF(3α-hydroxy-5α-pregnane-11,20-dione)是具有麻醉特性的神經(jīng)活性類固醇，對氨基丁酸A型受體(GABAA)有正向變構(gòu)調(diào)節(jié)作用[37]。靜脈注射ALF對犬的血液動力學(xué)穩(wěn)定性優(yōu)于PRO和硫噴妥鈉[38]，反復(fù)給藥后不造成藥物積累，可用于TIVA[39]。但該藥存在呼吸抑制的現(xiàn)象[40]，且用于TIVA的成本較高，因此，臨床上ALF的TIVA較少。ISO的可控性和安全性較好，但會造成心功能抑制、血壓降低及顫栗等不良反應(yīng)。

多模式復(fù)合麻醉是小動物現(xiàn)代麻醉的熱點研究之一，ALF及ISO的優(yōu)缺點鮮明，兩者聯(lián)合用藥的IVIA方案，可降低ALF的TIVA造成呼吸抑制現(xiàn)象且節(jié)約成本；與單純的吸入麻醉相比， IVIA對機體麻醉中體溫、HR、DBP及SpO2等生理影響更小?？梢姡珹LF+ISO的IVIA可以有效地提高麻醉質(zhì)量。

4 結(jié) 論

ALF 6 mg·(kg·h)-1配合0.5% ISO的IVIA的麻醉質(zhì)量優(yōu)于單純吸入麻醉，且對心血管影響極小，因此，在老、幼年犬，特別是患心血管疾病的犬中使用該麻醉方案較為適用。但由于其呼吸抑制作用以及未深入監(jiān)測的問題，該麻醉方案需進行更深入的試驗，建議在使用該方案時，給予純氧支持并密切關(guān)注患犬的RR及ETCO2，及時正壓通氣，防止出現(xiàn)窒息或高碳酸血癥等情況，并且，患呼吸系統(tǒng)疾病的犬慎用此麻醉方案。