汪海英 孟丹

(神木市醫(yī)院;1.科教科;2.婦科,陜西 榆林 719300)

人乳頭狀瘤病毒是一種雙鏈?zhǔn)壬掀o包膜的小DNA病毒，屬乳多空病毒科，在人和動(dòng)物中分布廣泛[1]。然而地區(qū)不同，HPV的人群感染率不同，優(yōu)勢型別也不同。并且現(xiàn)有的疫苗對其它型別的交叉預(yù)防能力有限，因此特定地區(qū)的HPV流行病學(xué)資料的獲得很有必要[2-6]。為研究榆林地區(qū)女性感染HPV情況，收集我科自2015年至2019年女性宮頸HPV檢測病例，探討本地區(qū)女性HPV感染率及感染亞型分布。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2015.2至2019.2來我院就診，有性生活史，自愿接受宮頸HPV檢測的女性共30 000例，者均無其他宮頸疾病，其中年齡20～72歲，平均(49.23±4.14)歲。患者均未進(jìn)行過宮頸手術(shù)及盆腔放療，且非月經(jīng)期。

1.2方法 (1)石蠟切片：將宮頸腺癌及正常宮頸石蠟組織標(biāo)本切片3～5片，4 μm厚度，不同石蠟組織切片前對刀片進(jìn)行消毒。(2)提取DNA，將各組織切片置入高速冷凍離心機(jī)(德國eppendorf5810R)離心，加入150μL裂解液，充分混勻，金屬浴(100℃，10 min)，13 000 r/min，10 min后取中層溶液待用。(3)PCR擴(kuò)增：使用基因擴(kuò)增儀(新加坡Gene amp pcr system 2400)擴(kuò)增，將PCR反應(yīng)管，經(jīng)4 s離心后，編號，加入不同物質(zhì)和空白對照，離心，擴(kuò)增。(4)雜交、孵育、染色：取離心管，貼上標(biāo)簽，加入膜條，置入A液及相關(guān)PCR產(chǎn)物，蓋緊管蓋，沸水浴10 min，置入分子雜交儀(江蘇興化分析儀器廠)1.5h，取50 ml離心管，置入B液，預(yù)熱，將雜交箱中離心管液體置入B液離心管，洗滌5 min，移至孵育液孵育，室溫，30 min，A液洗滌2次，共10 min，使用C液洗滌2 min；加入顯色液顯色30 min，移至去離子水浸泡，觀察。使用人乳頭狀瘤病毒基因分型檢測試劑盒(亞能生物技術(shù)有限公司)檢測基因分型。觀察指標(biāo)：根據(jù)檢查結(jié)果，對女性子宮頸感染HPV的分型特點(diǎn)及相關(guān)因素進(jìn)行分析和總結(jié)。

2 結(jié) 果

2.1HPV感染年齡分布 HPV感染人群中，以21～30歲的檢出率最高(19.30%)，31～40歲次之(11.58%)，41歲以上只有(5.25～3.42%)。見表1。

表1 不同年齡 HPV 陽性構(gòu)成比

2.2HPV感染亞型分布表 所采集的30 000例標(biāo)本中檢出HPV陽性3 000例，陽性率10.00%，23種亞型被檢出19種，MM4、73、83、44未檢出。高危型檢出率占68.43%，低危型檢出率占31.57%。見表2。

表2 HPV感染亞型分布表

3 討 論

人乳頭瘤病毒的基因序列與生物學(xué)行為之間相關(guān)性很高，型別不同的人乳頭瘤病毒在致病性上存在差異[7]。在自然人群中人乳頭瘤病毒的感染率大約在1.4%～25.6%之間，近年來對宮頸癌的研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌發(fā)生的必要條件便是高危型人乳頭瘤病毒感染，感染者發(fā)生癌前病變的風(fēng)險(xiǎn)比未感染者高出52倍[8-9]。據(jù)統(tǒng)計(jì)[10]，有50%的人在一生之中至少感染一次HPV。臨床檢測HPV的方法中，DNA原位雜交法一般用于回顧性研究，具有較高的敏感性和特異性，但價(jià)格較貴。血清檢測HPV特異性IgG可以用來判斷患者的感染情況，但是不能確定感染部位。

人乳頭瘤病毒基因根據(jù)地域不同分布復(fù)雜，以深圳和西藏地區(qū)來說，其高危人乳頭瘤病毒篩查結(jié)果顯示，感染率分別為14.0%和9.19%，流行的人乳頭瘤病毒亞型分別為16、58、52與16、33、58、52、31。本次研究結(jié)果表明，所采集的30 000例標(biāo)本中檢出HPV陽性3 000例，陽性率10.00%，23種亞型被檢出19種，MM4、73、83、44未檢出。高危型檢出率占68.43%，低危型檢出率占31.57%，相比我國其他地區(qū)水平處于中等，本次受檢女性中以11、16、58、52 為常見感染亞型，從中也可以看出人乳頭瘤病毒分布存在地域差異。人乳頭瘤病毒的感染年齡多見于中年女性，且其感染密切影響著宮頸病變程度，細(xì)胞學(xué)分級與感染可能性呈1:2倍左右的正相關(guān)增加。本次研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，HPV感染人群中，以21～30歲的檢出率最高(19.30%)，31～40歲次之(11.58%)，41歲以上只有(5.25%～3.42%)，表明隨年齡的增加，感染的風(fēng)險(xiǎn)逐漸降低，其原因可能與年青婦女性生活頻繁有關(guān)。

綜上所述，榆林地區(qū)女性人乳頭瘤病毒感染陽性率為10%，以11、16、58、52 為常見感染亞型，高危型檢出率占68.43%，低危型檢出率占31.57%。