張 帆，曹 汐，范能全

（重慶市食品藥品檢驗檢測研究院，重慶401121）

藥用復(fù)合膜作為藥品的一部分，其質(zhì)量好壞直接影響藥品的療效。復(fù)合膜中殘留溶劑主要來源于在復(fù)合、印刷、涂布等生產(chǎn)過程中使用的各類溶劑［1］，而在藥用復(fù)合膜生產(chǎn)過程中不能完全除去各類溶劑，在藥品保存過程中可能會遷移至藥品，最終影響藥品的質(zhì)量與安全。我國《包裝材料溶劑殘留量測定法》（YBB00312004-2015）明確指出，殘留溶劑的檢測種類不僅限于本標準中舉例的12種溶劑，溶劑殘留總量不得超過5.0 mg/m2?？筛鶕?jù)產(chǎn)品配方工藝的特性，采用適宜的色譜條件對除12種以外的殘留溶劑進行測定。乙酸丙酯和環(huán)戊酮廣泛用于工業(yè)生產(chǎn)。乙酸丙酯主要用于涂料、油墨、硝基噴漆、香精香料等行業(yè)［2］，低濃度時會刺激眼和上呼吸道黏膜；吸入濃度過高時，對眼睛有較強烈的灼熱感，導(dǎo)致全身無力，并伴有惡心、胸悶癥狀，嚴重時還會產(chǎn)生麻醉現(xiàn)象。環(huán)戊酮主要作為中間體，小鼠急性毒性半數(shù)致死量（LD50）為1 950 mg/kg［3］，可刺激眼睛及皮膚，通過呼吸道、食道等進入身體，對人體健康造成危害。本研究中采用頂空氣相色譜法同時檢測11批藥用復(fù)合膜中乙酸丙酯和環(huán)戊酮的殘留量，操作簡單、快速?，F(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

島津GC-2010PLUS型色譜儀（日本島津公司）；XPE205型電子天平（Mettler公司，精度為萬分之一）；HSS 86.50PLUS型頂空進樣器（意大利Dani公司）。

1.2 試藥

乙酸丙酯對照品（批號為20170602，純度大于99.5%），環(huán)戊酮對照品（批號為20161207，純度大于99.5%），均購于天津市光復(fù)精細化工研究所；正己烷（色譜級，Honeywell公司，批號為T2MM1H）；藥用復(fù)合膜（廠家A，批號分別為A1，A2，A3；廠家B，批號分別為B1，B2；廠家C，批號為C1；廠家D，批號分別為D1，D2，D3；廠家E，批號為E1；廠家F，批號為F1）。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液制備與樣品處理

對照品貯備液：取乙酸丙酯0.091 0 g、環(huán)戊酮0.101 2 g，精密稱定，置裝有少量正己烷的100 mL容量瓶中，迅速稀釋，并定容至100 mL，搖勻，取1.00 mL置裝有少量正己烷的50 mL容量瓶中，稀釋并定容至50 mL，即得。

待測樣品：裁取表面積為0.02 m2的供試品，剪成10 mm×30 mm大小，置20 mL頂空瓶中，密封，即得。同法制備空白基質(zhì)樣品。

2.2 氣相色譜條件

色譜柱：安捷倫DB-WAXETR柱（30 m×0.32 mm，1.00μm）；柱溫：程序升溫，初始溫度55℃保持5 min，以5℃/min的速率升至150℃維持3min，再以60℃/min的速率升至220℃保持3 min；進樣口溫度：200℃；分流比：20∶1；載氣：氮氣；柱流量：2 mL/min；檢測器：火焰離子化檢測器(FID)，溫度為220℃；頂空平衡時間：60 min；平衡溫度：100℃。

2.3 方法學(xué)考察

專屬性試驗：分別精密量取空白溶劑（正己烷）、對照品溶液及供試品溶液各0.10 mL，置20 mL頂空瓶（預(yù)先加入0.02 m2復(fù)合膜空白基質(zhì)）中，進樣測定，記錄色譜圖。結(jié)果空白溶劑對乙酸丙酯和環(huán)戊酮的測定均無干擾。色譜圖見圖1。

線性關(guān)系考察及檢測限(LOD)和定量限(LOQ)確定：取對照品貯備液適量，配制成每1 mL分別含對照品0.5，1，2，4，8，10μg的對照品線性溶液，各取0.10 mL，置20 mL頂空瓶（預(yù)先加入0.02 m2復(fù)合膜空白基質(zhì)）中，壓蓋密封，進樣測定。以進樣質(zhì)量濃度為橫坐標（X，μg/mL）、峰面積（Y）為縱坐標繪制標準曲線，并計算回歸方程。結(jié)果表明，乙酸丙酯和環(huán)戊酮的線性范圍為0.5～10μg/mL。以信噪比(S/N)的線性范圍為3時為LOD，S/N=10時為LOQ。結(jié)果見表1。

表1 乙酸丙酯和環(huán)戊酮的線性關(guān)系考察結(jié)果及檢測限和定量限（n=6）Tab.1 Linear relationship，limit of detection and limit of quantitation of propyl acetate and cyclopentanone（n=6）

精密度試驗：取質(zhì)量濃度為4μg/mL的對照品溶液0.10mL，置20mL頂空瓶（預(yù)先加入0.02m2復(fù)合膜空白基質(zhì)）中，連續(xù)進樣6次。結(jié)果乙酸丙酯和環(huán)戊酮峰面積的RSD分別為2.98%，2.54%（n=6），表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗：取質(zhì)量濃度為4μg/mL的對照品溶液0.10 mL，置20 mL頂空瓶（預(yù)先加入0.02 m2復(fù)合膜空白基質(zhì)）中，分別于0，3，5，7 h時進樣測定。結(jié)果乙酸丙 酯 峰 面 積 值 的 變 化 率 分 別 為1.32%，2.87%，2.47%，環(huán)戊酮峰面積值的變化率分別為1.84%，5.22%，3.40%，表明供試品溶在7 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

加樣回收試驗：取同一批（批號為A3）樣品12份，其中6份作為樣品本底，其余6份分別精密加入質(zhì)量濃度為4μg/mL的對照品溶液0.10 mL，進樣測定。結(jié)果見表2和表3。

表2 樣品重復(fù)性試驗結(jié)果（μg/m2，n=6）Tab.2 Results of repeatability tests（μg/m2，n=6）

圖1氣相色譜圖1.propyl acetate 2.cyclopentanoneA.Blank solvent B.Reference solution C.Test solutionFig.1 Gas chromatograms

表3 乙酸丙酯和環(huán)戊酮加樣回收試驗結(jié)果（n=6）Tab.3 Results of the recovery tests of propyl acetate and cyclopentanone（n=6）

2.4 樣品溶劑殘留量測定

將11批樣品各適量，進樣測定，結(jié)果乙酸丙酯的殘留量在0.01～0.21 mg/m2范圍內(nèi)，環(huán)戊酮的殘留量在0.01～0.12 mg/m2范圍內(nèi)。乙酸丙酯最大濃度為0.211 6 mg/m2，環(huán)戊酮最大濃度為0.123 6 mg/m2，遠低于急性毒性濃度，不會給藥品帶來安全風(fēng)險。詳見表4。

表4 樣品溶劑殘留量測定結(jié)果Tab.4 Determination results of residual solvents in the samples

3 討論

3.1 空白基質(zhì)確定

在頂空氣相色譜條件選擇過程中，未加入空白基質(zhì)時，乙酸丙酯的線性相關(guān)系數(shù)R為0.999，精密度的RSD為4.73%，回收率僅69.88%；環(huán)戊酮的線性相關(guān)系數(shù)R為0.998，精密度的RSD為6.18%，回收率僅50.16%。通過一系列實驗發(fā)現(xiàn)，在進行樣品加樣回收時，頂空瓶內(nèi)樣品本底復(fù)合膜都會發(fā)生一定變形，且每次加入溶劑時液體接觸復(fù)合膜的面積因制樣誤差也不完全相同，宋晶丹等［4］用頂空氣相色譜法測定藥品包裝材料中12種有機溶劑的殘留量時，發(fā)現(xiàn)復(fù)合膜對溶劑有一定吸附作用，導(dǎo)致在進行加樣回收時，樣品占據(jù)了一定氣體進樣體積，同時復(fù)合膜對加入的對照品溶液有一定吸附作用，導(dǎo)致有機溶劑揮發(fā)不完全，可能降低回收率。因此，在方法學(xué)考察中加入面積為0.02 m2，(剪成10 mm×30 mm)的復(fù)合膜作為空白基質(zhì)，可減少試驗本身帶來的誤差，使樣品中殘留溶劑量的測定更準確。

3.2 平衡時間和溫度優(yōu)化

鄭景峰等［1］測定藥品包裝用復(fù)合膜中殘留溶劑量時，平衡溫度和時間分別為80℃和30 min；喻亮宇等［5］測定藥品包裝材料中溶劑殘留量時，平衡溫度和時間分別為100℃和60 min；劉穎玲［6］在測定藥品包裝用復(fù)合膜、袋中溶劑殘留量時，平衡溫度和時間分別為100℃和30 min。結(jié)合乙酸丙酯和環(huán)戊酮沸點考慮，在平衡溫度分別為80℃和100℃時，進行方法學(xué)驗證試驗。當溫度為80℃時，方法的檢出限和定量限均不符合要求，故不能準確地對樣品中殘留溶劑進行定量。乙酸丙酯的沸點為101.6℃，環(huán)戊酮的沸點為130.6℃，由于平衡溫度過低，頂空瓶中的殘留溶劑不能完全揮發(fā)，導(dǎo)致檢測值較低。當選擇平衡溫度為100℃時，方法學(xué)驗證試驗中線性相關(guān)系數(shù)均大于0.99，精密度、回收率均能符合試驗要求。為了使頂空瓶內(nèi)的有機溶劑揮發(fā)完全，達到穩(wěn)定的氣液平衡狀態(tài)，平衡時間采用60 min。因此，本研究中采用平衡溫度為100℃、平衡時間為60 min對藥品包裝用復(fù)合膜的殘留溶劑進行定量分析。

3.3 方法評價

本研究中建立的測定藥用復(fù)合膜中乙酸丙酯和環(huán)戊酮的方法操作簡單，檢測結(jié)果準確，可為檢測除《包裝材料溶劑殘留量測定法》（YBB00312004-2015）中規(guī)定的12種以外的溶劑提供參考，為今后藥用復(fù)合膜中溶劑殘留量的檢測研究提供數(shù)據(jù)。