◎ 張曉莉
(甘肅省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院,甘肅 蘭州 730050)
百合營養(yǎng)豐富,富含多種營養(yǎng)成分及活性物質(zhì),具有一定的藥理作用,其鱗莖可入藥用于治療陰虛久咳、虛煩、失眠等癥。我國衛(wèi)生部將其列入首批藥食同源目錄[1-3]。近年來,百合在湖北恩施、江西宜春、甘肅蘭州以及全國其它地方均有較大規(guī)模的種植,隨著百合產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,越來越多的百合產(chǎn)品被研發(fā)出來,現(xiàn)已研制出了百合粉、百合飲料、百合果脯等系列產(chǎn)品[4]。
百合含有多種生物活性成分,主要有多糖、總黃酮、秋水仙堿等,其中多糖具有降血糖、降血脂、抗腫瘤、抗衰老、調(diào)節(jié)免疫力和潤肺止咳等功效[5-9]。近年來,對百合多糖的研究主要側(cè)重于多糖提取工藝的研究[10-14],而對百合不同品種、不同產(chǎn)地、百合鱗莖不同部位多糖含量差異性的研究較少。因此,本文以百合為研究對象,對不同產(chǎn)地、不同品種、百合鱗莖不同部位多糖含量進行比較研究,以期為百合優(yōu)質(zhì)品種的選育及百合保健食品的開發(fā),提供科學(xué)依據(jù)和資料。
云南曲靖、江蘇宜興、江西宜春、四川江油、湖北恩施和甘肅蘭州的新鮮百合去根剝片清洗后,于60 ℃烘干,粉碎,過60 目篩,密封冷藏,備用。
1.2.1 試劑
無水葡萄糖(GC >99.5%),苯酚、氯仿、正丁醇、硫酸、95%乙醇和雙氧水等均為國產(chǎn)分析純。
1.2.2 儀器
TLE204 電子天平(梅特勒托利多儀器有限公司)、UV2700 紫外可見分光光度計(島津企業(yè)管理(中國)有限公司)、KQ-600DE 臺式數(shù)控超聲波清洗機(東莞市科橋超聲波設(shè)備有限公司)、KH30R-Ⅱ高速離心機(湖南凱達科學(xué)儀器有限公司)、DHG-9147A 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海精宏實驗設(shè)備有限公司)、TENSORII 傅里葉紅外光譜儀(德國BRUKER 光譜儀器公司)及RV10 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(德國IKA)。
準(zhǔn)確稱取50 g 百合樣品,加入500 mL 蒸餾水,超聲提?。üβ?00 Hz,溫度70 ℃)2 h,提取2 次后過濾,收集濾液,離心收集上清液,減壓濃縮至原體積的1/3,加入乙醇使其濃度達到80%,靜置12 h后離心,收集沉淀,于45 ℃,0.08 MPa 下真空干燥至恒重,得百合粗多糖[15-16]。
稱取百合粗多糖15 g 用蒸餾水溶解,加入溶液1/2體積的seveag試劑(氯仿∶正丁醇體積比為3∶1),混合后振蕩30 min,靜置,棄去下層有機相,水相繼續(xù)加1/2 體積的seveag 試劑,重復(fù)上步操作。收集水相,加溶液體積4 倍量的95%乙醇,醇沉過夜。離心分離混合液,沉淀于45 ℃恒溫干燥箱中烘干得百合多糖[15]。
采用傅里葉紅外光譜儀對多糖的分子結(jié)構(gòu)進行分析,在0 ~5 000 cm-1范圍內(nèi)掃描,掃描次數(shù)16 次,分辨率為4 cm-1。
1.6.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
準(zhǔn)確稱取105 ℃干燥恒重的葡萄糖0.1 g,加水溶解,定容至1 000 mL。分別吸取0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL 和0.6 mL 的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液于25 mL具塞試管,加水至2 mL,加入5 %苯酚溶液1.0 mL,迅速滴加濃硫酸5.0 mL,混勻后靜置30 min,于490 nm處測定吸光度值[16]。
1.6.2 樣品測定
稱取適量樣品加水溶解,得待測液。準(zhǔn)確吸取適量待測液,按1.6.1 步驟操作,測定其吸光度值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中多糖含量。
以吸光度為縱坐標(biāo)(y),濃度為橫坐標(biāo)(x)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果表明,多糖在0.01 ~0.06 mg·mL-1濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,回歸方程為y=10.608 41x+0.074 10,相關(guān)系數(shù)r=0.999 5。
通過紅外光譜可以鑒定樣品是否具有多糖的結(jié)構(gòu)特征,圖1 為百合多糖的紅外光譜圖。從圖1 可以看出,在3 438 cm-1處有強吸收峰,表明存在分子間或分子內(nèi)氫鍵;2 931 cm-1是糖類C-H(-CH)的伸縮振動峰,這兩組吸收峰是糖的特征吸收峰;1 743 cm-1處有一明顯吸收峰,是醛基吸收峰,初步判斷百合多糖上含有乙?;? 623 cm-1是-COOH 的C=O 吸收峰;1 103 cm-1處有一明顯吸收峰,該吸收峰為C-O 鍵伸縮振動吸收峰;1 103 cm-1、1 049 cm-1和1 016 cm-1有3 處吸收峰,為吡喃糖苷的特征吸收峰;914 cm-1處為D-吡喃型葡萄糖的特征峰。因此可推斷百合多糖為一種吡喃多糖。
圖1 百合多糖紅外光譜圖
2.3.1 不同品種及不同產(chǎn)地百合多糖含量差異性分析本文考察了川百合、卷丹百合、蘭州百合和龍牙百合4 個百合品種及其6 個大型百合產(chǎn)區(qū)的百合多糖含量(見表1)。結(jié)果表明,百合品種不同,多糖含量也存在差異,總量在8.72%~19.42%,其中蘭州百合多糖含量最高,卷丹百合和川百合次之,龍牙百合較低。同一品種,產(chǎn)地不同百合多糖含量也不同。例如,產(chǎn)于湖北恩施的卷丹百合多糖含量較江蘇宜興和云南曲靖的要高,這可能與產(chǎn)地的環(huán)境、氣候、土壤和海拔等多種生態(tài)因子的差異有關(guān)。
表1 百合多糖含量表
2.3.2 蘭州百合內(nèi)外鱗片多糖含量的差異性分析
分別測定3 年生蘭州百合鱗莖的外層鱗片(由外向內(nèi)3 層)、中間部分(除外層鱗片和內(nèi)層鱗片的鱗片)和內(nèi)層鱗片(由內(nèi)向外3 層)的多糖含量,見圖2。結(jié)果表明,蘭州百合鱗片中多糖含量依次為外層鱗片>中間部位>內(nèi)層鱗片。百合鱗片不同部位多糖含量的差異,可能與百合生長過程中營養(yǎng)成分的變化有關(guān)。
圖2 蘭州百合鱗莖不同部位多糖含量圖
本文對4 個品種、6 個百合種植產(chǎn)區(qū)和蘭州百合內(nèi)外鱗片的多糖含量進行比較分析。結(jié)果表明,不同品種的百合多糖含量存在差異,蘭州百合多糖含量最高,卷丹百合和川百合次之,龍牙百合較低。同一品種的百合,產(chǎn)地不同其多糖含量也有所差異,這可能與產(chǎn)地的環(huán)境、氣候、土壤和海拔等多種生態(tài)因子的差異有關(guān)。本研究可為百合品種的篩選、栽培、育種和質(zhì)量品質(zhì)評價提供參考。
此外,本文還對蘭州百合鱗片不同部位中多糖含量也進行了比較分析。結(jié)果表明,百合外層鱗片多糖含量高于內(nèi)層鱗片,可為百合鱗片的分級加工和應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。