◎ 李翔輝，劉瑞霞

（漯河食品職業(yè)學(xué)院，河南 漯河 462300）

隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們的膳食結(jié)構(gòu)也在發(fā)生變化，主要體現(xiàn)在高鹽、高脂、高糖飲食習(xí)慣的增加，這對(duì)人們的身體健康具有不利影響[1]。已有研究表明，長(zhǎng)期高脂膳食會(huì)造成機(jī)體氧化還原狀態(tài)失衡，進(jìn)而引起各類(lèi)慢性疾病，危害人們的健康[2]。尋找天然的抗氧化劑具有非常意義，巴拉圭茶（Ilex Paraguariensis）原產(chǎn)于南美，具有多酚、黃酮等活性成分，具有抗氧化、減肥等作用[3-4]。本文擬通過(guò)建立高脂血癥小鼠模型，探討巴拉圭茶對(duì)高脂血癥小鼠氧化應(yīng)激的調(diào)節(jié)作用，為進(jìn)一步研究巴拉圭茶抗氧化活性提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 設(shè)備與材料

UV2600 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（島津公司）、BSA124S 電子分析天平（賽多利斯公司）、CenLee 18K 離心機(jī)（湖南湘立科學(xué)儀器有限公司）。

巴拉圭茶茶（阿根廷進(jìn)口）；活性氧自由基（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）及丙二醛（MDA）測(cè)定試劑盒，由南京建成生物工程研究所有限公司提供。

高脂飼料配方：78.8%基礎(chǔ)飼料添加1%膽固醇、10%豬油、10%蛋黃粉和0.2%豬膽鹽。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 小鼠高脂模型建立

48 只雄性C57 小鼠，預(yù)養(yǎng)一周后，12 只小鼠給予普通飼料，另外36 只小鼠給予高脂飼料，高脂血癥模型造模4 周后，禁食12 h 眼眶靜脈叢采血，測(cè)定膽固醇、甘油三酯等血脂指標(biāo)，以確定模型是否成功。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組

造模成功后，36 只高脂飼料小鼠隨機(jī)分為模型組、巴拉圭茶低劑量組、巴拉圭茶高劑量組，每組12 只。對(duì)照組繼續(xù)進(jìn)食基礎(chǔ)飼料，其余3 組繼續(xù)進(jìn)食高脂飼料，高脂+巴拉圭茶低劑量組灌胃1 g·kg-1劑量巴拉圭茶，高脂+巴拉圭茶高劑量組灌胃2 g·kg-1劑量巴拉圭茶，灌胃容量為20 mL·kg-1，連續(xù)灌胃4 周。

1.2.3 組織樣品采集

小鼠禁食12 h，取肝臟組織，在預(yù)冷的生理鹽水中沖洗干凈后，按照比例稱(chēng)取肝臟組織和生理鹽水（w ∶v=1 ∶9）混合勻漿，低溫離心，取上清液，置于-20 ℃環(huán)境中備用。

1.2.4 氧化還原指標(biāo)測(cè)定

嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明測(cè)定肝臟中活性氧自由基（ROS）水平、超氧化物歧化酶（SOD）活性、過(guò)氧化氫酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）的含量。

1.3 數(shù)據(jù)處理

使用SPSS 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，顯著水平為p ＜0.05，極顯著水平為p ＜0.01。

2 結(jié)果與分析

2.1 巴拉圭茶對(duì)小鼠肝臟中活性氧自由基水平的影響

脂類(lèi)代謝過(guò)程會(huì)有自由基的產(chǎn)生，長(zhǎng)期高脂膳食會(huì)導(dǎo)致過(guò)量的自由基無(wú)法及時(shí)得到清除，造成機(jī)體氧化還原狀態(tài)失衡。ROS 是反應(yīng)機(jī)體氧化還原狀態(tài)的一個(gè)重要指標(biāo)，如圖1 所示，與對(duì)照組相比，高脂日糧可顯著提高小鼠肝臟中ROS 水平（p ＜0.05），與模型組相比，低劑量巴拉圭茶和高劑量巴拉圭茶均可顯著降低小鼠肝臟中ROS 水平（p ＜0.05），巴拉圭茶低劑量組和巴拉圭茶高劑量組小鼠肝臟中ROS 水平差異顯著，說(shuō)明巴拉圭茶對(duì)降低高脂血癥小鼠肝臟中ROS 水平具有一定的作用。

圖1 巴拉圭茶對(duì)小鼠肝臟中活性氧自由基水平的影響圖

2.2 巴拉圭茶對(duì)小鼠肝臟中丙二醛含量的影響

MDA 的含量可以間接反應(yīng)組織細(xì)胞受自由基攻擊的程度，如圖2 所示，與對(duì)照組相比，高脂日糧可顯著提高小鼠肝臟中丙二醛含量（p ＜0.05），與模型組相比，高劑量巴拉圭茶可顯著降低小鼠肝臟中丙二醛含量（p ＜0.05），巴拉圭茶低劑量組可降低小鼠肝臟中丙二醛含量，但差異不顯著，說(shuō)明高劑量巴拉圭茶對(duì)降低小鼠肝臟中丙二醛含量具有一定的作用。

2.3 巴拉圭茶對(duì)小鼠肝臟中過(guò)氧化氫酶活性的影響

過(guò)氧化氫酶是抗氧化體系中一個(gè)重要的酶，具有重要作用，如圖3 所示，與對(duì)照組相比，高脂日糧可顯著降低小鼠肝臟中過(guò)氧化氫酶活性（p＜0.05），與模型組相比，低劑量巴拉圭茶和高劑量巴拉圭茶均可顯著提高小鼠肝臟中過(guò)氧化氫酶活性（p＜0.05），巴拉圭茶高劑量組和對(duì)照組小鼠肝臟中過(guò)氧化氫酶活性差異不顯著，說(shuō)明巴拉圭茶對(duì)提高小鼠肝臟中過(guò)氧化氫酶活性具有一定的作用。

圖2 巴拉圭茶對(duì)小鼠肝臟中丙二醛含量的影響圖

2.4 巴拉圭茶對(duì)小鼠肝臟中超氧化物歧化酶活性的影響

圖3 巴拉圭茶對(duì)小鼠肝臟中過(guò)氧化氫酶活性的影響圖

超氧化物歧化酶可以協(xié)助清除過(guò)剩的自由基，對(duì)于清除體內(nèi)ROS 具有關(guān)鍵作用，如圖4 所示，與對(duì)照組相比，高脂日糧可顯著降低小鼠肝臟中超氧化物歧化酶活性（p＜0.05），與模型組相比，低劑量巴拉圭茶和高劑量巴拉圭茶均可顯著提高小鼠肝臟中超氧化物歧化酶活性（p＜0.05），對(duì)照組和巴拉圭茶高劑量組小鼠肝臟中超氧化物歧化酶活性差異不顯著，說(shuō)明巴拉圭茶對(duì)提高小鼠肝臟中超氧化物歧化酶活性具有一定的作用。

圖4 巴拉圭茶對(duì)小鼠肝臟中超氧化物歧化酶活性的影響圖

3 結(jié)論

隨著社會(huì)的發(fā)展，有更多的人們開(kāi)始關(guān)注飲食健康，而膳食結(jié)構(gòu)的變化對(duì)人們的健康具有重要的影響，因此有關(guān)膳食結(jié)構(gòu)與健康的課題非常值得關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究巴拉圭茶對(duì)高脂血癥小鼠氧化還原狀態(tài)的影響，發(fā)現(xiàn)巴拉圭茶能夠顯著降低高脂血癥小鼠肝臟中ROS 水平和MDA 含量，提高CAT 和SOD 活性，說(shuō)明巴拉圭茶對(duì)改善高脂血癥小鼠氧化還原狀態(tài)具有一定的作用，已有研究表明巴拉圭茶對(duì)改善小鼠氧化還原狀態(tài)，保持機(jī)體健康具有重要意義[4-6]，抗氧化活性往往與機(jī)體健康具有密切關(guān)系，接下來(lái)還需進(jìn)一步研究巴拉圭茶對(duì)機(jī)體氧化還原狀態(tài)的影響與機(jī)體健康之間的關(guān)系。