◎ 蘇 晶

（淮安市食品藥品檢驗(yàn)所，江蘇 淮安 223001）

含乳飲料主要是以乳及乳制品為原料，添加輔料配制或發(fā)酵而成。含乳飲料國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定配制型含乳飲料其蛋白質(zhì)含量應(yīng)≥1.0 g/100 g[1]，但在監(jiān)督抽檢過程中，常出現(xiàn)含乳飲料蛋白質(zhì)含量指標(biāo)不達(dá)標(biāo)的現(xiàn)象。測(cè)量不確定度是對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)品質(zhì)高低評(píng)價(jià)的一項(xiàng)重要指標(biāo)，表示所述結(jié)果與被測(cè)量真值的接近程度，反映檢測(cè)數(shù)據(jù)的可信程度[2-5]。因此，為確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確有效，本實(shí)驗(yàn)依據(jù)《測(cè)量不確定度評(píng)定與表示》（JJF 1059.1—2012）[6]，對(duì)凱氏定氮法檢測(cè)含乳飲料中蛋白質(zhì)含量進(jìn)行不確定評(píng)定。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

復(fù)配型含乳飲料購(gòu)自超市；鹽酸溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（標(biāo)準(zhǔn)值0.100 7 mol·L-1，編號(hào)：GBW（E）081601），購(gòu)自北京海岸鴻蒙標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)有限責(zé)任公司；凱氏定氮催化劑片，購(gòu)自賽諾利康生物技術(shù)（北京）有限公司。

ME204T/02 電子天平（精度0.001 g，梅特勒-托利多公司）、K9840 凱氏定氮儀（海能儀器股份有限公司），容量瓶、滴定管等玻璃器皿（天玻玻璃儀器有限公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

按照GB 5009.5—2016[7]第一法進(jìn)行檢測(cè)，樣品經(jīng)混合均勻，稱取試樣質(zhì)量10 g（精確至0.001 g），移入干燥的250 mL 定氮瓶中加入2 片凱氏定氮催化劑，加硫酸20 mL 消解、冷卻，定容至100 mL。準(zhǔn)確吸取10.0 mL 試樣處理液注入反應(yīng)管，加入10.0 mL 氫氧化鈉溶液，開始蒸餾。蒸餾10 min 后移動(dòng)蒸餾液接收瓶，液面離開冷凝管下端，再蒸餾1 min。然后用少量水沖洗冷凝管下端外部，取下蒸餾液接收瓶。盡快以鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至終點(diǎn)，同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。

1.3 結(jié)果計(jì)算

蛋白質(zhì)含量按式（1）計(jì)算：

式（1）中，X為試樣中蛋白質(zhì)的含量，單位為g/100 g；V1為試液消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液的體積，單位為mL；V2為試劑空白消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液的體積，單位為mL；V3為吸取消化液的體積，單位為mL；c為鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度，單位為mol·L-1；0.014 0 為1.0 mL 鹽酸[c（HCl）=1.000 mol·L-1]標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液相當(dāng)?shù)牡馁|(zhì)量，單位為g；m為試樣的質(zhì)量，單位為g；F為氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù)，乳飲料換算系數(shù)為6.38。

2 結(jié)果與分析

2.1 測(cè)量不確定度的主要來源

利用魚骨圖對(duì)整個(gè)檢測(cè)過程的不確定來源進(jìn)行分析，結(jié)果見圖1。

圖1 檢測(cè)過程不確定來源分析圖

2.2 測(cè)量不確定度分析

2.2.1 重復(fù)測(cè)量帶來的不確定度urel(X)

本試驗(yàn)做6 次重復(fù)試驗(yàn)，結(jié)果見表1，測(cè)量重復(fù)性引入的不確定度屬于A 類不確定度，用統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行計(jì)算。樣品測(cè)量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差：

引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

表1 蛋白質(zhì)含量測(cè)定結(jié)果表

2.2.2 試樣稱量帶來的不確定度urel(m)

（1）天平稱量準(zhǔn)確度。本實(shí)驗(yàn)使用的電子天平最大允許誤差為0.001 g，服從均勻分布，包含因子km1=，按B 類方法評(píng)定，由此引入的不確定度：

（2）天平分辨率。由天平說明書可知其分辨力為0.001 0 g，服從均勻分布，半?yún)^(qū)間寬度為0.000 5 g，由此引入的不確定度

因此，樣品稱量引入的合成相對(duì)不確定度

2.2.3 樣品定容引入的不確定度urel(v100)

（1）廠家提供的100 mL 容量瓶的示值誤差為±0.04 mL，屬均勻分布，包含因子k1(v100)=，按B類方法評(píng)定，由此引入的不確定度

（2）溫度變化。因容量瓶在20 ℃下檢定，假設(shè)定容時(shí)溫差為4 ℃，水的膨脹系數(shù)為2.1×10-4/℃，按B 類不確定度評(píng)定，在95%置信概率下，按正態(tài)分布技術(shù)，溫度變化引入的不確定度

（3）充滿液體到刻度的變動(dòng)性。100 mL A 級(jí)容量瓶重復(fù)測(cè)定20 次，測(cè)定結(jié)果的相對(duì)偏差為0.092 mL，按A類不確定度評(píng)定，則充滿液體到刻度引入的不確定度為

因此，樣品定容引入的合成相對(duì)不確定度

2.2.4 稱液管容量較準(zhǔn)引入的不確定度urel(V3)

（1）由廠家提供的A 級(jí)10 mL 移液管允許容量誤差為±0.02 mL，屬均勻分布，引入的不確定度

（2）溫度變化。參考2.2.3，溫度變化引入的不確定度

（3）充滿液體至刻度的變動(dòng)性。10 mL 移液管重復(fù)測(cè)定20 次，測(cè)定結(jié)果的相對(duì)偏差為0.068 mL，按A類不確定度評(píng)定，則充滿液體到刻度引入的不確定度為

因此，移液管移取溶液引入的合成相對(duì)不確定度

2.2.5 試樣消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液的體積V1引入的不確定度urel(V1)

（1）10 mL 滴定管其校準(zhǔn)不確定度為0.01 mL，按矩形分布，其引入的不確定度

（2）溫度變化。參考3.2.3，溫度變化引入的不確定度

因此，試樣消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液體積引入的合成相對(duì)不確定度

2.2.6 試劑空白消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液的體積V2引入的不確定度urel(V2)

空白試驗(yàn)重復(fù)6 次，結(jié)果見表1，樣品測(cè)量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差

引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度

2.2.7 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液帶來的不確定度urel(c)

本次滴定用的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液廠家給出的濃度c（HCl）=（0.1007±0.000 1）mol·L-1（k=2），所以，鹽酸儲(chǔ)備液的不確定度為

2.3 合成不確定度

計(jì)算合成相對(duì)不確定度為：

含乳飲料中蛋白質(zhì)含量為1.53 g/100 g，則其合成不確定度為：U=k×urel=0.063 6。

2.4 擴(kuò)展不確定度

擴(kuò)展不確定度是評(píng)定測(cè)量結(jié)果可信度的量化參數(shù)，取包含因子k=2（即置信概率95%），U=k×u=2×0.0636=0.127 2，則其擴(kuò)展不確定度為0.13 g/100 g。

3 結(jié)論

采用凱氏定氮法測(cè)定含乳飲料中蛋白質(zhì)含量為1.53 g/100 g，擴(kuò)展不確定度為0.13 g/100 g，因此蛋白質(zhì)含量為（1.53±0.13）g/100 g，符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求（≥1.0 g/100 g）。

考察各不確定度來源及其貢獻(xiàn)率，可以確定該方法檢測(cè)過程中空白測(cè)量帶來的不確定度影響最大，測(cè)量重復(fù)性的影響次之，而定容體積與樣品稱量帶來的影響可忽略不計(jì)。因此，在含乳飲料蛋白質(zhì)含量日常檢測(cè)中，應(yīng)對(duì)影響結(jié)果的主要因素進(jìn)行嚴(yán)格的把控，以提高檢測(cè)結(jié)果的可信度。