◎ 陳紅芝，郭中甲，趙 琴

（河南科技學(xué)院新科學(xué)院，河南 新鄉(xiāng) 453003）

決明子為豆科植物決明或小決明的干燥成熟種子，作為一種保健食品的原料越來(lái)越被人們重視，極具開(kāi)發(fā)應(yīng)用價(jià)值[1]。芽菜是指利用植物種子或營(yíng)養(yǎng)器官，在陽(yáng)光的照射或黑暗的條件下培育出的可以食用的幼苗、幼莖。因其綠色無(wú)污染、食用安全，部分芽菜更具一定的藥用或保健價(jià)值[2-3]，深受歡迎。決明子芽菜生長(zhǎng)周期短，產(chǎn)率高，口感較好，可以作為蔬菜食用。黃酮類化合物具有抗菌、抗光敏、抗氧化、解毒和增白等作用[4]，決明子功能與其含有的黃酮密切相關(guān)。本文通過(guò)研究培養(yǎng)時(shí)間對(duì)決明子芽苗菜生物學(xué)產(chǎn)量以及黃酮含量的影響，為充分發(fā)揮芽菜便于栽培成本低的優(yōu)點(diǎn)，提高決明子的醫(yī)療藥用價(jià)值，制定合適的采收期提供了參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器

材料：當(dāng)年飽滿度和大小基本一致的決明子種子。

試劑：蘆丁、無(wú)水乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁和氫氧化鈉。

儀器：722N 可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海儀電儀器分析有限公司）、JCD-001 家用自動(dòng)豆芽苗菜機(jī)（浙江健龍科技永康市建龍健身器材廠）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

選取當(dāng)年飽滿度和大小一致發(fā)芽率高的決明子種子，恒溫60 ℃溫水中浸泡20 min，濃度1 000 mg·L-1的二氧化氯溶液浸泡30 min 進(jìn)行消毒處理，之后用清水沖洗干凈備用。

每個(gè)培養(yǎng)期設(shè)置3 個(gè)重復(fù)，標(biāo)注為A1、A2、A3，分別取決明子種子15 g 播種于不同的豆芽菜自動(dòng)培養(yǎng)機(jī)發(fā)芽盒中，插電在20 ℃下培養(yǎng)，每隔1 h 澆水一次。每隔1 d 按上述處理播種一次，第2 批為B1、B2、B3， 第3 批 為C1、C2、C3， 第4 批 為D1、D2、D3，第5 批為E1、E2、E3。

每天為豆芽機(jī)進(jìn)行換水處理，觀察芽苗菜的生長(zhǎng)狀況，播種5 次。在13 d 時(shí)一同收割，并在同一時(shí)間進(jìn)行黃酮的提取和測(cè)定。第1 批生長(zhǎng)期為13 d，第2批為11 d，第3 批為9 d，第4 批為7 d，第5 批為5 d。采摘后進(jìn)行生物學(xué)產(chǎn)量的測(cè)定，烘干粉碎放置備用。

1.3 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線

配 制 濃 度 為0.0101 mg·mL-1、0.0202 mg·mL-1、0.0303 mg·mL-1、0.0404 mg·mL-1和0.0505 mg·mL-1的蘆丁對(duì)照品溶液，繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線[5]。

1.4 超聲波提取

將決明子芽菜分別放入電熱恒溫干燥箱中60 ℃下烘干6 h，再用高速多功能粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎。稱取粉碎好的決明子芽菜1 g，用65%的乙醇溶液作溶劑，按照料液比1 ∶40（g·mL-1），在20 ℃下用超聲波清洗機(jī)提取25 min，后用真空泵抽濾。用65%的乙醇定容到50 mL 的容量瓶中，移取濾液1 mL 于50 mL 的容量瓶中，用65%的乙醇溶液稀釋至25 mL，然后加入5%的亞硝酸鈉溶液1.50 mL 搖勻，放置5 min；移取10%的硝酸鋁溶液1.50 mL，搖勻，放置5 min；移取1 mol·L-1氫氧化鈉溶液20.00 mL，各移取65%的乙醇溶液定容至刻度線，搖勻，放置15 min 待測(cè)。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

配制一定濃度梯度的蘆丁對(duì)照品溶液，繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線。可得回歸方程為Y=9.652.1X+0.008，相關(guān)系數(shù)R2=0.997 1。蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖1。

圖1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

2.2 不同生長(zhǎng)期決明子芽菜的生物學(xué)產(chǎn)量

由表1 可知，不同生長(zhǎng)期決明子芽菜的胚根長(zhǎng)度、子葉長(zhǎng)度、胚軸長(zhǎng)度、單株鮮重和單株凈菜重在7 d采收時(shí)均高于5 d 采收，且差異顯著，7 d 后各指標(biāo)數(shù)值雖呈增加趨勢(shì)，但是差異不顯著，如果單從生物學(xué)產(chǎn)量上來(lái)講決明子芽菜7 d 就可以采收。

表1 不同生長(zhǎng)期決明子芽菜的生物學(xué)產(chǎn)量表

2.3 不同生長(zhǎng)期黃酮含量的測(cè)定

通過(guò)超聲波輔助法對(duì)決明子芽菜中黃酮進(jìn)行提取，每個(gè)生長(zhǎng)期做3 個(gè)重復(fù)，使用分光光度計(jì)在510 nm處測(cè)定黃酮的吸光度，通過(guò)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線方程Y=0.101 2X計(jì)算樣品中黃酮的含量，結(jié)果如表2、表3 所示。

表2 不同生長(zhǎng)期決明子芽菜的黃酮的吸光度表

表3 不同生長(zhǎng)期決明子芽菜的黃酮含量表

由表3 可知，黃酮含量隨生長(zhǎng)期增長(zhǎng)不斷增加，但在5 d、7 d、9 d 和11 d 之間差異不顯著，13 d 時(shí)黃酮含量最高為16.17 mg·g-1，且與之前不同生長(zhǎng)期差異顯著。但綜合考慮時(shí)間成本和黃酮含量，決明子芽菜7 d 天采收比較合適。

3 結(jié)論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，決明子發(fā)芽7 d 以后生物學(xué)產(chǎn)量差異不顯著，從時(shí)間和成本考慮，第7 d 采收比較合適，雖然此時(shí)決明子芽菜內(nèi)黃酮的含量為12.14 mg·g-1，但是與第9 d 天決明子芽菜內(nèi)黃酮的13.43 mg·g-1，11 d天的決明子芽菜內(nèi)黃酮的13.69 mg·g-1之間差異不顯著。第13 d 決明子芽菜內(nèi)黃酮的含量雖然為最大值16.17 mg·g-1，但從實(shí)際生產(chǎn)角度考慮，培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，在生長(zhǎng)期容易感染?？傊C合考慮生物學(xué)產(chǎn)量、黃酮含量和時(shí)間成本，決明子芽菜7 d 采收比較合適。