曾 濤

（電子科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬婦女兒童醫(yī)院·成都市婦女兒童中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川 成都 611731）

急性呼吸道感染（acute respiratory infection）是兒童最常見的呼吸道疾病，也是全世界嬰幼兒發(fā)病和死亡的最主要原因，病毒和非典型病原體是急性呼吸道感染的重要致病原[1]。各種呼吸道感染性疾病中以肺炎和毛細(xì)支氣管炎為主[2]。據(jù)報道，2013年，630 萬5 歲以下死亡兒童中約有94 萬死于肺炎，占該年齡段死亡人數(shù)的15%，其中大部分發(fā)生在發(fā)展中國家[3]。急性呼吸道感染嚴(yán)重影響著兒童的健康，同時也給患兒家屬帶來了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。本研究收集2019 年在我院就診的有呼吸道感染癥狀患兒的臨床資料，分析預(yù)測兒童呼吸道病原體感染的流行病學(xué)特征，旨在為本地區(qū)兒童呼吸道感染臨床診療和預(yù)防提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2019 年1 月～12 月在成都市婦女兒童中心醫(yī)院就診的有呼吸道感染癥狀的患兒19687 例，其中男10975 例，女8712 例，年齡0～14歲。將其按年齡分為嬰兒組（≤1 歲）5733 例，幼兒組（1～3 歲）6837 例，學(xué)齡前兒童組（3～6 歲）4529 例，學(xué)齡期兒童組（6～14 歲）2588 例。

1.2 方法 采集呼吸道感染患兒空腹靜脈血3～4 ml，4000 r/min 離心10 min，分離血清備用。應(yīng)用間接免疫熒光法檢測患兒血清中LP1、MP、COX、CP、ADV、RSV、IFVA、IFVB 及PIV9 種呼吸道病原體的IgM 抗體，檢測試劑盒為鄭州安圖生物工程股份有限公司生產(chǎn)的9 項呼吸道感染病原體IgM 抗體檢測試劑盒，顯微鏡為日本OLYMPUS 公司生產(chǎn)的BX51 型顯微鏡。在載玻片的孔中分別加入稀釋的血清和質(zhì)控品，濕盒37 ℃放置90 min，PBS 洗2 次，蒸餾水洗1 次，自然風(fēng)干后，加入熒光素結(jié)合物，濕盒37 ℃放置90 min，再次PBS 洗2 次，蒸餾水洗1次，自然風(fēng)干后，加入適量封閉介質(zhì)，蓋上蓋玻片，在熒光顯微鏡400 倍視野下觀察。每次試驗(yàn)均設(shè)置陽性和陰性對照，嚴(yán)格按照試劑說明書對結(jié)果進(jìn)行判別。分析患兒病原體陽性率及混合感染情況，比較不同性別、年齡段、季節(jié)患兒的感染情況。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 21.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，計數(shù)資料以（n，%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兒童9 項呼吸道病原體總體檢出情況 19,687 例標(biāo)本中，9 種呼吸道病原體總陽性檢出數(shù)為5928 例，總陽性率為30.11%，陽性檢出率由高到低依次為：MP、IFVB、PIV、ADV、RSV、IFVA、LP、COX 和CP。其中MP 陽性率最高，占69.47%，其次為IFVB 15.91%。9 種病原體的陽性構(gòu)成比見表1。

表1 9 項呼吸道病原體陽性構(gòu)成比（n，%）

2.2 兒童9 項呼吸道病原體混合感染情況 19,687例標(biāo)本中，至少檢出一種呼吸道病原體陽性5029例，陽性檢出率為25.54%，其中4249 例樣本僅檢出一種病原體，陽性檢出率為21.58%，以MP 感染為主，其次為IFVB。兩種及兩種以上呼吸道病原體混合感染780 例，陽性檢出率為3.96%。9 項呼吸道病原體混合感染模式共計24 種，其中二聯(lián)混合感染中MP+IFVB 模式最為常見，占混合感染病例的50.90%，三聯(lián)混合感染模式中MP+IFVB+PIV 陽性檢出率最高，占8.08%，見表2。

2.3 9 項呼吸道病原體患兒的性別分布 9 項呼吸道病原體檢出陽性共5928 例，其中男性患兒陽性率為24.05%，女性患兒陽性率為37.74%，女性患兒感染率高于男性患兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

2.4 9 項呼吸道病原體患兒的年齡分布 從年齡分布來看，4 個年齡組9 項呼吸道病原體的陽性率依次為：嬰兒組18.18%、幼兒組36.30%、學(xué)齡前兒童組36.06%、學(xué)齡期兒童組29.75%，陽性率最高的為幼兒組。各年齡組均以MP 感染為主，尤以幼兒組陽性率最高。各年齡組最易感染的呼吸道病原體如下：嬰兒組：MP（12.79%）和RSV（2.22%）；幼兒組：MP（25.76%）和IFVB（5.59%）；學(xué)齡前兒童組：MP（24.27%）和IFVB（6.93%）；學(xué)齡期兒童組：MP（20.29%）和IFVB（6.34%）。從病原體分布來看，MP、ADV、IFVA 陽性率最高為幼兒組，RSV 陽性率最高為嬰兒組，IFVB、PIV 陽性率最高為學(xué)齡前兒童組，LP1 陽性率最高為學(xué)齡前兒童組。COX、CP 感染在各年齡組均較少見，見表4。

2.5 9 項呼吸道病原體感染的季節(jié)分布 兒童9 項呼吸道病原體陽性檢出率分別為：春季49.44%、夏季13.08%、秋季21.22%、冬季29.83%，春季陽性率最高，其次為冬季，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。春季陽性率最高的病原體是MP（33.57%）和IFVB（10.34%）；夏季陽性率最高的病原體是MP（10.36%）和RSV（1.07%）；秋季陽性率最高的是MP（13.49%）和IFVB（3.10%）；冬季陽性率最高的是MP（21.68%）和IFVB（3.45%），見表5。

表2 9 項呼吸道病原體混合感染構(gòu)成比（n，%）

表3 9 項呼吸道病原體感染的性別分布情況

表4 9 項呼吸道病原體患兒的年齡分布情況

表5 9 項呼吸道病原體患兒的季節(jié)分布情況

3 討論

急性呼吸道感染是兒童最常見的呼吸道疾病，其中病毒和非典型病原體是小兒急性呼吸道感染的重要致病原。由于氣候、地理位置、人口密度、空氣質(zhì)量、檢測方法等因素的影響，不同地區(qū)病原體流行情況有所不同。成都位于四川盆地西部，地貌多為平原、山地和丘陵。氣候?qū)賮啛釒Ъ撅L(fēng)氣候，空氣潮濕，日照時間短。由于成都獨(dú)特的地理位置和氣候特點(diǎn)，加之人口眾多，該地區(qū)兒童呼吸道病原體感染狀況與其他城市有一定差異。因此，對本地區(qū)兒童呼吸道病原體感染情況進(jìn)行長時間、大樣本量的檢測，能夠使我們及時的掌握該地區(qū)兒童呼吸道病原體的感染特點(diǎn)，更有利于呼吸道疾病的預(yù)防和控制。

本次研究中，患兒病原體感染總陽性率為30.11%，低于湖北（42.6%）[4]、武漢（36.95%）[5]、重慶（38.42%）[6]、瓊海（49.17%）[7]，高于常州（25.93%）[8]、上海（29.67%）[9]，高于本地區(qū)2015 年兒童呼吸道病原體總陽性率27.23%[10]，高于本地區(qū)2015～2017 三年內(nèi)兒童呼吸道病原體總陽性率28.55%[11]，說明盡管近年來相關(guān)部門加大了對呼吸道病原體的防控和治療，但呼吸道病原體的總陽性率依然呈現(xiàn)上升的趨勢。9 項呼吸道病原體中，MP 陽性率最高，為20.92%，其次是IFVB，陽性率為4.79%。MP 是一種原核細(xì)胞型生物，其大小介于細(xì)菌和病毒之間，主要通過呼吸道飛沫傳播，可引起多種呼吸道疾病。近年來的研究表明，MP 等非典型病原體已逐漸成為兒童呼吸道疾病的重要病原體之一[12，13]。流感病毒屬正粘病毒科，為有包膜的單負(fù)鏈RNA 病毒，每年都能引起季節(jié)性的傳播和流行，尤其易在兒童、老人及慢性病患者群體中蔓延。本研究中，9 項呼吸道病原體中包含5 中常見呼吸道病毒，其中IFVB 陽性率最高。與既往本地區(qū)及其他地區(qū)一致，但與國內(nèi)[14-16]和國外[17，18]存在一定地域差別。同時，本研究結(jié)果還表明，兒童急性呼吸道感染易發(fā)生多重病原體感染，其中MP 和IFVB 混合感染最為常見，占混合感染病例的50.90%。

本研究結(jié)果提示，從性別分布來看，女性患兒的總陽性率高于男性患兒，且MP、IFVA、IFVB、PIV陽性率均高于男性患兒，與以往報道符合[19，20]。從年齡分布來看，幼兒組陽性率最高，嬰兒期最低，各年齡組均以MP 感染為主。其原因可能是嬰兒期尚有母體胎盤分泌的保護(hù)性抗體，且與外界環(huán)境接觸較少。而幼兒期兒童免疫系統(tǒng)及呼吸道結(jié)構(gòu)和功能均尚未完善，對各種病原體抵抗力較弱，因此最易受病原體入侵。隨著年齡增長，兒童免疫系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)功能均逐步趨于成熟，因此發(fā)病率逐漸減低。本研究還顯示，各年齡組最易感染的呼吸道病原體分別是：嬰兒組為MP 和RSV、幼兒組為MP 和IFVB、學(xué)齡前兒童組為MP 和IFVB、學(xué)齡期兒童組為MP 和IFVB。因此，應(yīng)該注重對幼兒期兒童呼吸道病原體的防治，同時應(yīng)根據(jù)不同年齡段兒童的易感病原體采取疫苗接種等相應(yīng)措施。

從季節(jié)分布來看，兒童9 項呼吸道病原體陽性檢出率分別為：春季49.44%、夏季13.08%、秋季21.22%、冬季29.83%，春季陽性率最高，其次為冬季。同時，研究結(jié)果還顯示，春季陽性率最高的病原體是MP（33.57%）和IFVB（10.34%）、夏季陽性率最高的病原體是MP（10.36%）和RSV（1.07%）、秋季陽性率最高的是MP（13.49%）和IFVB（3.10%）、冬季陽性率最高的是MP（21.68%）和IFVB（3.45%）。這與各種病原體生長、傳播的環(huán)境條件、溫度、濕度等不同有關(guān)，提示在春冬季節(jié)應(yīng)該加強(qiáng)對兒童的防護(hù)。

綜上所述，MP、IFVB、PIV 為本地區(qū)兒童急性呼吸道感染的最主要的病原體，且兒童多種病原體混合感染較為常見，以MP+IFVB 混合感染最為常見。同時，兒童呼吸道病原體的流行呈現(xiàn)一定的季節(jié)分布特點(diǎn)，年齡和性別對病原體感染和分布有影響。