駱福裕，陳俊坤，劉傳榮，黃俊高，甘錦繪，賴貴華，涂相文

（贛州市婦幼保健院新生兒疾病篩查中心，江西 贛州 341000）

苯丙酮尿癥（phenylketonuria，PKU）是因患兒體內(nèi)PAH活性降低、喪失或其輔酶四氫生物喋呤缺乏導(dǎo)致苯丙氨酸在肝臟中代謝失償，不能正常轉(zhuǎn)化成酪氨酸，導(dǎo)致旁路代謝增強(qiáng)，使體內(nèi)Phe濃度增高，大量苯丙酮酸、苯乙酸和苯乳酸從尿中排出，屬常染色體隱形遺傳，是常見的遺傳代謝病[1]。根據(jù)發(fā)病機(jī)制苯丙酮尿癥分為PAH 缺乏癥和四氫生物蝶呤缺乏癥（tetrahydrobiopterin，BH4D）。因此，早期Phe 新生兒疾病篩查（newborn screening，NBS）是發(fā)現(xiàn)PKU患兒并及時給予低苯丙氨酸飲食治療的關(guān)鍵，也是目前預(yù)防PKU患兒最有效的方法。贛州市婦幼保健院新生兒疾病篩查中心負(fù)責(zé)贛南18 個縣市的新生兒疾病篩查工作，現(xiàn)將2014 年至2019年共篩查655 179名新生兒PKU篩查結(jié)果情況進(jìn)行回顧性分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取贛南18 個縣市100 多家助產(chǎn)機(jī)構(gòu)2014 年 1 月至 2019 年 12 月出 生 的 655 179 名活產(chǎn)新生 兒 。充分哺乳，采集出生后3～7 d 的新生兒濾紙干血斑（dried blood spot，DBS），接產(chǎn)醫(yī)院根據(jù)《新生兒疾病篩查血片采集技術(shù)規(guī)范》[2]中要求采足跟血制成DBS。采血時間原則上一般不超過出生后20 d。血片懸置晾干后由EMS快遞和冷鏈專人工作人員負(fù)責(zé)將篩查標(biāo)本遞送至贛州市新生兒疾病篩查中心進(jìn)行Phe 檢測。所有樣本的采集和實(shí)驗(yàn)檢測均經(jīng)贛州市婦幼保健院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)并在新生兒家屬簽署知情告知后的情況下完成所有工作。

1.2 方法 標(biāo)本用Puncher 9全自動打孔儀進(jìn)行打孔，采用芬蘭全自動新生兒疾病篩查系統(tǒng)（genetic screening processor，GSP）時間分辨熒光免疫分析儀進(jìn)行熒光定量法檢測DBS 中Phe 含量，配套苯丙氨酸試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品及質(zhì)控品。實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒提供的說明書流程進(jìn)行，本實(shí)驗(yàn)室Phe 值≥2.0 mg/dL 判斷為高風(fēng)險指標(biāo)，工作人員對原DBS 進(jìn)行原血復(fù)查，Phe≥2.0 mg/dL，則立即通知召回復(fù)查，召回標(biāo)本若仍≥2.0 mg/dL，則通知患兒家屬盡早做進(jìn)一步的氨基酸譜分析；若Phe≥2.0 mg/dL（≥120 μmol/L），血Phe 與酪氨酸（Tyr）比值（Phe/Tyr）＞2.0 則診斷為高苯丙氨酸血癥（HPA），應(yīng)立即外送標(biāo)本轉(zhuǎn)上級醫(yī)院進(jìn)行PAH基因檢測、尿蝶呤譜分析、紅細(xì)胞二氫蝶呤還原酶活性檢測，進(jìn)行四氫生物蝶呤缺乏癥（BH4D）鑒別。血Phe≥120 μmol/L，并排除BH4D后，診斷為經(jīng)典型PKU、輕度PKU或輕度HPA。

1.3 質(zhì)量控制 贛州市新生兒疾病篩查中心自開展以來每年參加3 次衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心標(biāo)準(zhǔn)的濾紙干血斑苯丙氨酸檢測室間質(zhì)量評價，均合格。實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制每一批實(shí)驗(yàn)均按照要求進(jìn)行做雙孔定標(biāo)校準(zhǔn)，每塊實(shí)驗(yàn)板均做低、高值室內(nèi)質(zhì)控，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料用率（%）表示。

2 結(jié)果

2.1 篩查結(jié)果分析 2014 年至2019 年總共分娩活產(chǎn)新生兒724 154 名，進(jìn)行新生兒疾病篩查Phe 檢測共計(jì)655 179名，篩查率逐年上升，分別為79.2%、85.8%、92.2%、95.8%、95.5%、96.3%，初篩陽性數(shù)為859例，已召回841例，總召回率為 97.9%，確診數(shù) 27 例，其中經(jīng)典型 PKU 3 例、輕度 PKU 6 例、BH4D 9 例、輕度HPA 為 9 例，發(fā)病率為4.1/萬（27/655 179）。見表1。

表1 Phe篩查結(jié)果分析

2.2 確診陽性患者治療情況 本研究發(fā)現(xiàn)27 例確診陽性患者，其中9 例為輕度HPA，不需治療，但需定期進(jìn)行隨訪復(fù)查血Phe 結(jié)果，如果Phe 結(jié)果超出一定范圍，應(yīng)進(jìn)行干預(yù)治療，9例PKU需飲食治療，治療依從性高，9例為BH4D患兒（非經(jīng)典型PKU），需進(jìn)行美多巴以及5-羥色氨酸聯(lián)合BH4藥物治療，27例患兒體格和智力發(fā)育均較好且繼續(xù)接受長期、定期隨訪。

3 討論

PKU 是一種導(dǎo)致新生兒體格發(fā)育落后及出現(xiàn)智力低下的遺傳代謝性疾病，苯丙酮尿癥患兒在早期時臨床癥狀尚不明顯，往往不太會引起家屬及醫(yī)生的注意，因而易延誤患兒的最佳治療時間，造成大腦不可逆的重大損傷，因此，新生兒疾病篩查是一項(xiàng)三級預(yù)防的高風(fēng)險檢測工作，早期檢測Phe新生兒疾病篩查，是發(fā)現(xiàn)PKU患兒并及時給予低苯丙氨酸飲食治療的關(guān)鍵。越早發(fā)現(xiàn)，越早治療，其患兒預(yù)后情況也會越佳。本研究結(jié)果顯示，2014 年至2019 年總共分娩活產(chǎn)新生兒724 154名，進(jìn)行新生兒疾病篩查Phe檢測共計(jì)655 179名，篩查率逐年上升，分別為79.2%、85.8%、92.2%、95.8%、95.5%、96.3%。主要原因：①在本省及市衛(wèi)生行政管理部門的大力支持下，已將新生兒疾病篩查工作納入年終考核項(xiàng)目之一，也逐力加強(qiáng)對各縣市醫(yī)療機(jī)構(gòu)的督導(dǎo)和監(jiān)管；②從2014 年開始，到目前為止已有11 個縣被納入貧困地區(qū)新生兒疾病篩查，進(jìn)行免費(fèi)二病篩查（PKU、TSH）；③我市醫(yī)保政策的不斷完善；④加大宣傳力度，進(jìn)行宣教告知，使家屬更主動的參與到新生兒疾病篩查工作中。從而促進(jìn)本市新生兒早期檢測Phe苯丙酮尿癥篩查率的不斷提高。

本研究結(jié)果顯示，贛州市新篩查中心6年共篩查新生兒655 179 例 ，PKU 初 篩 陽 性 859 例 ，召 回 841 例 ，召 回 率 為97.9%；確診陽性數(shù)為27例，其中經(jīng)典型PKU 3例、輕度PKU 6例、BH4D（非經(jīng)典型 PKU）9 例、輕度 HPA 9 例，發(fā)病率為 4.1/萬。有研究顯示，PKU 的發(fā)病率也有地域性差異，呈現(xiàn)北方高而南方地區(qū)低的趨勢。王興等[3]研究顯示，甘肅省苯丙酮尿癥總體檢出率為1/3420，徐艷華等[4]報(bào)道顯示全國PKU發(fā)病率為8.6/10 萬（1∶11681）,李蓓等[5]報(bào)道廣州市苯丙酮尿癥發(fā)病率為1∶30 606，鄒團(tuán)標(biāo)等[6]報(bào)道云南省苯丙酮尿癥發(fā)病率為0.41/萬（1∶24 125），可見贛州市發(fā)病率低于全國水平，略高于廣州市，和云南省相接近，符合我國南低北高的特點(diǎn)。BH4D 又稱非經(jīng)典型PKU,是苯丙氨酸羥化酶的輔酶缺乏，從而導(dǎo)致酶的活性降低。約10%～15%的高苯丙氨酸血癥患者為BH4D，其中以6-丙酮酰四氫蝶呤合成酶（PTPS）缺乏型最常見[7]，本研究中檢出BH4D 9 例（均為PTPS缺乏型），占PKU 的50%，明顯高于全國的10%～15%，也高于福建省的20.00%[8]，本省九江市BH4 缺乏癥發(fā)病率為35.7%[9]，也略高于九江市，其原因仍待于進(jìn)一步的探究。PKU是可治療的遺傳代謝病，通過早期檢測Phe 結(jié)果，經(jīng)篩查確診的新生兒通過及時控制Phe 的攝入可以達(dá)到滿意的治療效果，Phe 濃度是評價治療效果的金標(biāo)準(zhǔn)，控制患兒血Phe濃度在理想的范圍內(nèi)，也是新生兒疾病篩查的最終目的[10]。

綜上所述，贛州市新生兒苯丙酮尿癥發(fā)病率明顯低于全國平均水平，在今后全面落實(shí)篩查質(zhì)量管理措施中，實(shí)施層層質(zhì)量把關(guān)，仍需政府部門的大力支持，加大政策支持力度，為提高PKU 患兒治療依從性，打下基礎(chǔ)，從2014 年開始篩查中心按照（贛衛(wèi)婦幼字[2014]3 號）文件精神，實(shí)施“誰篩查誰救助”的原則，將歷年累積的、符合政策的患兒一并納入救助范圍。2018 年苯丙酮尿癥治療性食品進(jìn)入本院定點(diǎn)銷售，率先納入本市醫(yī)保報(bào)銷，在2018年上半年積極推進(jìn)遺傳代謝病出生缺陷救助項(xiàng)目的實(shí)施。加強(qiáng)和完善新生兒疾病篩查信息化網(wǎng)絡(luò)建設(shè)和管理，開展專業(yè)技術(shù)人員培訓(xùn)，加強(qiáng)健康促進(jìn)，多渠道廣泛宣傳PKU 知識宣傳，有效提高贛州市新生兒PKU 篩查率和召回率，及時對確診患兒進(jìn)行規(guī)范診療，從而減少或避免因PKU 致殘兒童發(fā)生。通過早期檢測Phe 不僅能提高患兒的康復(fù)和生存質(zhì)量，同時，能為夫妻雙方的再生育及患兒將來的發(fā)育提供更好的遺傳咨詢，提高贛南出生人口素質(zhì)。